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根据动物细胞的类型，可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢，易污染，培养需用抗生素 2.细胞大，无细胞壁，机械强度低，环境适应性差 3.需氧少，不耐受强力通风与搅拌 4.群体生长效应，贴壁生长（锚地依赖性） 5.培养过程产品分布细胞内外，成本高 6.原代培养细胞一般繁殖50代即退化死亡 依据在体外培养时对生长基质依赖性差异，动物细胞可分为两类： ●贴壁依赖型细胞：需要附着于带适量电荷的固体或半固体表面才能生长，大多数动物细胞，包括非淋巴组织细胞和许多异倍体细胞均属于这一类。 ●非贴壁依赖型细胞：无需附着于固相表面即可生长，包括血液、淋巴组织细胞、许多肿瘤细胞及某些转化细胞。 培养细胞的最适温度相当于各种细胞或组织取材机体的正常温度。人和哺乳动物细胞培养的最......阅读全文
一、前言动物细胞培养开始于本世纪初1962年，动物细胞培养规模开始扩大，发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等，动物细胞培养已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市
根据动物细胞的类型，可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢，易污染，培养需用抗生素 2.细胞大，无细胞壁，机械强度低，环境适应性差 3.需氧少，不耐受强力通风与搅拌 4.群体生长效应，贴壁生长（锚地依赖性） 5.培养过程产
2、固定化方法的选择 (1) 培养规模 由于各种固定化系统可以获得相同的细胞密度，且细胞的产率主要取决于细胞的扩散，因此反应器的体积是培养规模放大的主要决定因素。虽然微载体系统可以提供最大的单元操作，但其他系统也可以通过增加单元套数而获得放大。 (2) 培养方式&nbs
微生物细胞培养，简称微生物培养，包括原核细胞培养（细菌培养）和真核细胞培养（霉菌培养和酵母培养）。这些细胞小、且具有细胞壁，细胞周期非常短，如细菌每20-30min增殖1次。植物细胞培养指原生质体培养。未考虑分离出原生质体的植物细胞培养，无论是游离的单细胞或组织块，都称作植物组织培养。动物组织细胞培
3.2 免 疫 B 细胞的制备血清效价有意义(>1 : 1000)的免疫后动物可以提供抗原反应性B 细胞用于融合。这些细胞可以从脾脏或淋巴结中获得。动物用吸人CO2 处死，在无菌操作下取组织，放 在 4°C无血清培养基中，最多可放lh 。用慑子或针头轻轻打开组织脾脏或淋巴结的外包膜获得
细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术，是当前国际上生物制品生产的主流模式，其最大优势是通过更为精确有效的工艺控制手段，在获得最大产量的同时能稳步提高产品的质量。但该技术目前在国内尚未得到广泛应用，生物制品生产仍主要采用病毒产率低、生产成本高、劳动强度大的转瓶细胞培养方
动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式，一般分为分批式操作（batch）、流加式操作（Fed-batch）、半连续式操作（semi-continuous）、连续式操作（continuous）和灌流式操作（perfusion）五种操作模式。 1. 批式操作（batch c
实验概要动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式，一般分为分批式操作（batch）、流加式操作（Fed-batch）、半连续式操作（semi-continuous）、连续式操作（continuous）和灌流式操作（perfusion）五种操作模式。实验步骤1. 批式操作（batch culture）&
经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本，简化分离纯化步骤，避免病毒污染造成的危害。 无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们
实验概要 经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本，简化分离纯化步骤，避免病毒污染造成的危害。 实验原理 无血清培养基(serum free medi
3.2国内生物反应器设计与制造发展趋势 3.2.1以代谢流分析为核心的生物反应器 长期来发酵过程优化与放大所依据的基本思想和方法是采用经典动力学为基础的最佳工艺控制点为依据的静态操作方法，实质上这只是化学工程宏观动力学概念在发酵工程上的延伸。例
在过去几十年来，动物细胞大规模培养技术经有了很大发展，从使用转瓶(roller bottle) 、CellCube等贴壁细胞培养，发展为生物反应器（Bioreactor）进行大规模细胞培养。 自70年代以来，细胞培养用生物反应器有很大的发展，种类越
一、前沿生物技术主题 1.蛋白质测序新技术新装备及配套试剂国产化 (1)阵列毛细管柱蛋白质分离-阵列点样装置 研制二维阵列毛细管分离新装置，第一维分离柱可分离48个馏分,第二维维阵列毛细管分离柱可同时分离48个流份；开发阵列紫外检测器； 研制多柱点样头并行点样器和流份收集器；开发
无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求，但对有些实验却
2.3 人工合成高分子材料人工合成高分子材料可以通过分子设计等手段精确的控制其性质，也可以通过化工生产得到大批量性质基本相同的产品。相对于天然材料，更利于进行标准化的生产，力学强度也较好，但是生物相容性还有待提高，目前比较常用的办法是通过表面修饰在材料表面引入生物活性因子。合成高分子材料包括聚乳酸(
动物细胞培养技术能否大规模工业化、商业化，关键在于能否设计出合适的生物反应器（bioreactor）。由于动物细胞与微生物细胞有很大差异，传统的微生物反应器显然不适用于动物细胞的大规模培养。首先必须满足在低剪切力及良好的混合状态下，能够提供充足的氧以供细胞生长及细胞进行产物的合成。 一、
仍面临挑战的体外培养新技术有望替代现有的、用于药物测试的模型动物，具有纪念意义的是，日前政府拥有的360只黑猩猩正式从药物测试中退役，研究人员相信体外新技术将来可应用于药物测试和生理生化研究。 更灵敏的体外技术新平台被开发出并应用于研究人体药物代谢，从而让动物从药物试验中解放出来。动物保护
文章比较全面的介绍了我国目前生物反应器的现状,各种品种发酵的特点.提出了反应器的设计要以代谢流分析为核心,要从系统生物学的角度出发.1、发展大规模细胞培养及其生物反应器借助于细胞培养进行各种产品生产已是我国生物技术产业化的重要组成部分，涉及医药、化工、轻工、食品、农业、海洋、环保等行业。培养的细胞不
3 免疫策略不同实验室使用的免疫策略是不同的，很多免疫策略都同样有效。 目的是扩大宿主体内抗原反应性 B 细胞的数量。体内每次接触到蛋白质抗原，都会增加抗原反应性B 细胞的数量。在对抗原的再次应答中，产生的抗体量会增加，总的免疫球蛋白类别会从以IgM 为主转变为以IgG 为主，特异性抗体
法国巴斯德研究所利用生物反应器进行Vero细胞的大规模培养获得成功以来，生物反应器便以其高密度、大规模、低成本的优势时引起广泛关注。与先进国家相比，我国动物细胞生物反应器方面的技术研究和装备严重滞后，国内用于动物细胞工业化大规模培养生产的人用和兽用疫苗生产技术正处于从转瓶培养向生物反应器悬浮培养技术
单克隆抗体(monoclonal antibody，MAb)，是针对专一的抗原决定簇产生的抗体，单克隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年，主要原理是利用产生抗体的B细胞与骨髓瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞，生产抗体。目前大量制备单抗的方法主要有两种方法：一种是动物体内生产法（腹水制备），在小鼠腹腔内接种
缩短时间，例如生产人参素，人参要很久才长大，用机器既可以大量生产，又可以缩短时间，可以解决以前市场的供不应求的局面。 法国巴斯德研究所利用生物反应器进行Vero细胞的大规模培养获得成功以来，生物反应器便以其高密度、大规模、低成本的优势时引起广泛关注。与先进国家相比，我国动物细胞生物反应器方面的技
生物反应器（bioreactor）经历了三个发展阶段：细菌基因工程、细胞基因工程、转基因动物生物反应器。转基因动物生物反应器的出现之所以受到人们极大的关注，是因为它克服了前两者的缺陷，即细菌基因工程产物往往不具备生物活性，必须经过糖基化、羟基化等一系列修饰加工后才能成为有效的药物，而细胞基因工程又因
发展阶段生物反应器（bioreactor）经历了三个发展阶段：细菌基因工程、细胞基因工程、转基因动物生物反应器。转基因动物生物反应器的出现之所以受到人们极大的关注，是因为它克服了前两者的缺陷，即细菌基因工程产物往往不具备生物活性，必须经过糖基化、羟基化等一系列修饰加工后才能成为有效的药物，而细胞基因
一、克隆的早期研究 克隆一词是英文单词clone的音译，作为名词，c1one通常被意译为无性繁殖系。同一克隆内所有成员的遗传构成是完全相同的，例外仅见于有突变发生时。自然界早已存在天然植物、动物和微生物的克隆，例如：同卵双胞胎实际上就是一种克隆。然而，天然的哺乳动物克隆
细胞反应器是最经典、最早被采用的一种生物反应器。此类反应器与传统的微生物生物反应器类似，针对动物细胞培养的特点，采用了不同的搅拌器及通气方式。通过搅拌器的作用使细胞和养分在培养液中均匀分布，使养分充分被细胞利用，并增大气液接触面，有利于氧的传递。新加坡艺思高细胞反应器现已开发的有：笼式通气搅拌器、双
实验步骤一、化学法和酶法细胞裂解微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况，而且应用这些机械的方法经常会遇到过度的产热和样品被氧化等问题。微量细胞裂解的简化方面的重大进
实验步骤 一、化学法和酶法细胞裂解 微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况，而且应用这些
当婴儿呱呱坠地、胚胎干细胞分化为成体细胞的那一刻，多数细胞的功能和命运似乎被定格，并开启了不可逆的时钟发条。然而肿瘤组织中层出不穷的基因突变和永生化癌细胞，却以最惨烈的方式昭示着细胞命运的其他可能。随着克隆技术和人工诱导多能干细胞的出现，改写细胞命运的传奇更走入了再生医学和肿瘤研究的聚光灯下。
在我们生存的自然界里，除了单细胞生物、少数低等生物，绝大多数的生物从小到大都遵循着一个相同的规律——由一个受精卵发育形成。 就像是父母的精卵结合，产生了受精卵，受精卵开始快速的生长分裂，经历四细胞期、八细胞期后形成桑椹胚，直到胚胎干细胞有了明显的分化进而发育成囊胚，原肠胚，最后发育成一个各器官