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免疫共沉淀技术路线

准备工作: 预冷PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机 1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次,最后一次吸干PBS; 2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶,0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿、75cm2培养瓶) 3. 用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶上刮下,把悬液转到1.5EP管中,4℃,缓慢晃动15min(EP管插冰上,置水平摇床上) 4. 4℃,14000g离心15min,立即将上清转移到一个新的离心管中 5. 准备Protein A agarose,用PBS 洗两遍珠子,然后用PBS配制成50%浓度,建议减掉枪尖部分,避免在涉及琼脂糖珠的操作中破坏琼脂糖珠 6. 每1ml总蛋白中加入100μl Protein A琼脂糖珠(50%),4℃摇晃10min(......阅读全文

蛋白质组,蛋白质组学及研究技术路线

基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然,不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类

蛋白质组,蛋白质组学及研究技术路线

基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然,不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类

临床质谱培训班圆满收官 聚焦LC-MS检测项目与解决方案

  分析测试百科网讯 2018年4月25-27日,由复旦大学附属中山医院检验科主办、国家级I类继续教育学习班——“液相色谱-质谱技术临床应用培训班”在复旦大学附属中山医院独山厅举办。本次活动围绕LC-MS/MS技术在我国临床检验领域的应用,邀请了国内外著名专家教授,向学员们讲授了液相色谱-质谱检测技

Co IP Protocol-3

免疫共沉淀技术路线准备工作:预冷PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次,最后一次吸干PBS;2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶,0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿

流式细胞技术基本原理应用和发展趋势

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成

是什么卡了我们的脖子:国产创新药很迷惘

iCLIP技术的发明,让人们抛弃精密的观测仪器,也能确定RNA(核糖核酸)和蛋白质在哪个位置“交汇”,甚至可以读出位点“密码”。 生物学者习惯将iCLIP这个词拆解为3部分,i:单点,就像捋着一条绳子,看它上面

2014年中国十大生物芯片企业排名

生物芯片,又称蛋白芯片或基因芯片,它们起源于DNA杂交探针技术与半导体工业技术相结合的结晶。生物芯片技术是近几年才发展起来的高通量检测技术,它利用微电子、微机械、物理化学技术、计算机技术在固体芯片表面构建的微流体分析单元和系统,将生命科学研究中不连续的分析过程(如样品制备、化学反应和分析检测)连续化

circRNA机制研究汇总(一)

文章导读超强子调控circRNA-Nfix缺失诱导成年小鼠心肌梗死后再生circRNAs正在成为心脏发育和疾病强有力的调节因子,但其在心脏再生中的作用仍然未知。鉴于此,作者与他的团队探究了与超增强子(SEs)相关的circRNA-Nfix在小鼠心肌梗死后再生过程中的功能,并探究了其调节心脏重塑的分子

circRNA研究揭示矽肺炎症和肺纤维化的干预靶点

东南大学医学院巢杰教授课题组主要研究方向为肺炎和肺纤维化的机理机制的研究。该课题组利用Arraystar CircRNA芯片研究发现circRNA circHECTD1通过HECTD1/ZC3H12A依赖的泛素化介导SiO2诱导的矽肺中巨噬细胞活化,释放相关炎性因子和纤维化因子,继而影响矽

P53响应的lncRNA GUARDIN参与维护基因组的稳定

中国科学技术大学吴缅教授团队多年来在肿瘤细胞凋亡/生存的信号转导及分子机制,非编码RNA调控肿瘤发生发展的分子机理,p53与细胞代谢及诱导性多能干细胞调控的分子机制方面做出了很多开创性的研究成果。近期,研究团队应用Arraystar Human LncRNA Array对带有WT p53表达系统

离心机及其转子的种类

离心机是一种常用的稍大型的仪器,几乎每个实验室都会配置一到两台甚至数台。大家对其并不陌生,只是可能只了解其中少数种类。刚好小编实验室最近准备购置一台离心机,所以搜集并整理了一些关于离心机及其转子种类的资料分享给大家。 一、离心技术的基本原理 1、离心力(force, F)&nbs

第二届全国样品制备学术报告会在贵阳举办(上)

  分析测试百科网讯 2015年8月16日,中国仪器仪表学会分析仪器分会样品制备专业委员主办的第二届全国样品制备学术报告会在贵阳举行。本次大会与中国仪器仪表学会分析仪器分会2015学术年会同期举办,参会200余人。张玉奎院士担任会议名誉主席,关亚风研究员担任会

离心机及其转子的种类

离心机是生物学实验中必不可少的仪器,看似通用的仪器,却是有许多学问的,实验操作中我们需要了解离心机知识,能够合理利用它而更稳定地为我们的实验服务。离心机作为一种实验室通用仪器,几乎每个实验室都会配置一到两台甚至数台。大家对其并不陌生,我们整理了一些关于离心机及其转子种类的资料分享给大家。一、离心技术

密理博的世纪转型

2008年3月5日,北京清华科技园国际会议中心内座无虚席,主题为“干细胞研究和表观遗传学的科学前沿”的 “Millipore 2008 亚洲生物高峰论坛-北京站”隆重举行,来自全国各地的380多位相关研究领域的重要科学家和研究者出席了此次由Millipore公司主办,北京大学干细胞中心,北京大学干细

AI守护人类健康再发力,提升肝癌治疗水平

  人工智能已经成为国家发展战略,肿瘤防治是人工智能重要研究和应用领域。国家癌症中心中国肿瘤登记年报相关数据显示,中国疾病谱中恶性肿瘤死亡率居首位,且高于世界平均水平。我国每年所需肿瘤医疗费用2200亿元。全国每年新发恶性肿瘤病例约309万,死亡病例196万,肺癌、胃癌、食管癌、肝癌和结直肠癌居前五

张贵锋:从阿胶真伪鉴别到明胶动物溯源分析

  【导语】第十一期质 谱 沙 龙活动中,中科院过程工程所生化工程国家重点实验室的张贵锋博士,给我们做了《HPLC/MS在胶类药物质量控制中的应用》的报告,各届反响强烈。今日,分析测试百科网的记者再次走近张博士,详细了解一下这个项目的来龙去脉,看看他又为我们带来些什么?   阿胶,《神农本草经》滋

结核病临床实验室检测

当前,我国结核病临床实验室检测的分类:光学检测、免疫学检测、分子生物学检测和微生物学检测,其中微生物学检测是结核病检测的金标准,也是我国疾控系统所采用的主要方法。     光学检测包括胸透和X光片,该方法主要是临床用于肺结核的筛查,发现肺部的阴影和继发性结核的

干货|细胞治疗与基因治疗---载体纯化

  细胞治疗是将细胞转移到一个病人身上,其目的是改善或治疗疾病。细胞治疗策略包括分离和转移特定的干细胞群,执行效应细胞,诱导成熟细胞成为多能性细胞,以及成熟细胞的重新编程。图片来源于网络  基因治疗是一种新的治疗手段,是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目

细胞治疗与基因治疗---载体纯化

  细胞治疗是将细胞转移到一个病人身上,其目的是改善或治疗疾病。细胞治疗策略包括分离和转移特定的干细胞群,执行效应细胞,诱导成熟细胞成为多能性细胞,以及成熟细胞的重新编程。  基因治疗是一种新的治疗手段,是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目的。即将外源基

2013药物研发研讨会大会报告(一)

  2013年12月5日,由梅特勒-托利多赞助的2013药物研发研讨会在杭州圆满召开。此次研讨会以“药品质量控制与工艺优化”为主题,来自知名制药公司、API原料药生产厂家、合同生产组织(CMO)、医药科研机构从事药品生产、工艺优化、质量控制和实验室管理的百余名专家学者齐

诺贝尔化学奖全收录(1901-2018)

  当地时间10月3日,2018年度诺贝尔化学奖获得者揭晓。瑞典皇家科学院决定将2018年的诺贝尔化学奖授予美国加州理工学院科学家Frances H. Arnold在“酶的定向进化(the directed evolution of enzymes)”方面的研究,另一半授予美国密苏里大学科学家Geo