亲和色谱法的技术特点

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。......阅读全文

亲和色谱法的技术特点

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。

亲和色谱法的技术简介

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。

亲和色谱法的技术简介

利用酶与基质(或抑制剂)、抗原与抗体,激素与受体、外源凝集素与多糖类及核酸的碱基对等之间的专一的相互作用,使相互作用物质之一方与不溶性担体形成共价结合化合物,用来作为层析用固定相,将另一方从复杂的混合物中选择可逆地截获,达到纯化的目的。

亲和色谱的技术特点

亲和色谱也称为亲和层析,是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和色谱在凝胶过滤色谱柱上连接与待分离的物质有一定结合能力的分子,并且它们的结合是可逆的,在改变流动相条件时二者还能相互分离。亲和色谱可以用来从混合物中纯化或浓缩某一分子,也可以用来去除或减少混合物中某一分子的含量。

免疫亲和色谱法-技术的应用

1)免疫萃取(innunoextraction)IAC 技术最简单的应用就是单纯作为样品的预处理手段,即制备免疫亲和柱,也称为离线(off-line)IAC。现在市场上已有克伦特罗、黄曲霉毒素等多种免疫亲和柱出售,使用效果非常好。2)IAC 联用技术IAC 联用技术也可称为在线 IAC。将 IAC

免疫亲和色谱法的技术原理

IAC 是一种利用抗原抗体特异性可逆结合特性的 SPE 技术,根据抗原抗体的特异性亲和作用,从复杂的待测样品中捕获目标化合物。其原理是将抗体与惰性微珠共价结合,然后装柱,将含抗原的溶液过免疫亲和柱,抗原与固定了的抗体结合,而非目标化合物则沿柱流下,最后用洗脱缓冲液洗脱抗原,从而得到纯化的抗原。用适当

DNA亲和层析的技术特点

DNA亲和层析是一种检测DNA与蛋白质相互作用的技术手段,属于亲和层析的一种,利用一些蛋白质能结合特定序列的DNA片段的原理,分离与特定DNA序列有相互作用的蛋白质。

亲和色谱法

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。中文名:亲和色谱法外文名:affinity chromatography所属学科:生物应用领域:实验例如利用酶与基质(或抑制剂)

亲和色谱法

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。

亲和色谱法

一、基本理论(一)原理  在生物体内,许多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有与某些相对应的专一分子可逆结合的特性。例如抗原和抗体、酶和底物及辅酶、激素和受体、RNA和其互补的DNA等,都具有这种特性。生物分子之间这种特异的结合能力称为亲和力,根据生物分子间亲和吸附和解离的原理,建立起来的

亲和色谱法原理

在生物体内,许多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有与某些相对应的专一分子可逆结合的特性。例如抗原和抗体、酶和底物及辅酶、激素和受体、RNA和其互补的DNA等,都具有这种特性。生物分子之间这种特异的结合能力称为亲和力,根据生物分子间亲和吸附和解离的原理,建立起来的色谱法称亲色谱法。亲和色谱

亲和色谱法简介

一、基本理论(一)原理:在生物体内,许多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有与某些相对应的专一分子可逆结合的特性。例如抗原和抗体、酶和底物及辅酶、激素和受体、RNA和其互补的DNA等,都具有这种特性。生物分子之间这种特异的结合能力称为亲和力,根据生物分子间亲和吸附和解离的原理,建立

免疫亲和层析的技术应用和特点

免疫亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫亲和色谱,是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。

亲和色谱法条件的选择

亲和色谱法一般采用柱层析法,要达到好的分离效果,必需选择好操作条件。①吸附  亲和柱所用的平衡缓冲液的组成、pH值和离子强度都应选择最有利于配基与生物大分子形成复合物。吸附时,一般在中性条件下,上柱样品液应和亲和柱平衡缓冲液一样,上柱前样品应对平衡缓冲液进行充分透析,这有利于络合物的形成。亲和吸附常

亲和色谱法载体的选择

用于亲和色谱法的理想载体应非特异性吸附要尽可能小,对其他大分子物质的作用很微弱;必须具有多孔的网状结构,能使大分子自由通过而增加配基的有效浓度;必须具有相当量的化学基团可供活化,并在温和条件下能与大量的配基连接;具有良好的机械性能;在较宽的pH值、离子强度和变性剂浓度范围内具有化学和机械稳定性;高度

亲和色谱法的适应范围

可用于分离活体高分子物质、过滤性病毒及细胞。或用于对特异的相互作用进行研究。

亲和色谱法的适应范围

可用于分离活体高分子物质、过滤性病毒及细胞。或用于对特异的相互作用进行研究。

什么是亲和色谱法?

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。

亲和色谱法(affinity-chromatograph)

一、基本理论(一)原理:在生物体内,许多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有与某些相对应的专一分子可逆结合的特性。例如抗原和抗体、酶和底物及辅酶、激素和受体、RNA和其互补的DNA等,都具有这种特性。生物分子之间这种特异的结合能力称为亲和力,根据生物分子间亲和吸附和解离的原理,建立起来的色

常用色谱法介绍亲和色谱法

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。

免疫亲和色谱法的相关介绍

动物性食品中兽药残留水平是食品安全检验的重要内容。兽药残留超标不仅给公众健康带来严重危害,也影响动物性食品的进出口贸易,世界各国都高度重视。由于药物残留检测属于复杂混合物中的痕量有机物质分析,且分析量大,因此非常需要采用有效、快捷、普及的净化方法。免疫亲和色谱(immunoaffinity chro

亲和素的应用特点

亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子

高速逆流色谱法的技术特点

  1.应用范围广,适应性好  由于溶剂系统的组成及配比可以是无限多的,因而从理论上讲可以适用于任何极性范围内样品的分离,在分离天然化合物方面具有其独到之处。由于聚四氟乙烯管中的固定相为液体不需要固相载体,因而可以消除固-液色谱中由于使用固相载体而带来的吸附损失,特别适用于分离极性物质。  2.操作

高效液相色谱法的技术特点

高效液相色谱法有“四高一广”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。③高效:分离效能高。可选择固定

亲和色谱法配基与载体的结合

配基要结合到载体上,首先要活化载体上的功能基团,再将配基连接到活化基团上。此偶联反应必须在温和条件下进行,不致使配基和载体遭到破坏;且偶联后要反复洗涤载体,以除去残存的未偶联的配基,还要测定偶联的配基的量。最常用的载体是琼脂糖4B(Sepharose4B)。把琼脂糖与溴化氰在pH值为11条件下进行处

亲和色谱法的基本原理

亲和色谱法是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的层析技术。首先将载体在碱性条件下用溴化氰(CNBr)活化,再用化学方法将能与生物分子进行可逆性结合的物质(称为配基结合到某种活化固相载体上此过程称为偶联反应。将偶联反应得到的亲和吸附剂装入层析柱中而形成亲和柱,溶液样品通过亲和柱时,生物大分子和亲和

免疫亲和色谱法-效率的关键影响因素

IAC 作用的基础是色谱法与抗原抗体的可逆反应平衡相结合的理论,遵循经典的 Scatchard方程。因此,影响 IAC 效率的因素有很多。①柱容量:免疫亲和柱常用的柱床体积为1mL。其高效特异性保留能力,使之能在较小的柱容量或柱床体积下完成净化过程,减少了非特异性吸附并节省了昂贵的柱材和抗体。另外,

亲和标记技术的应用

有人用亲和标记技术直接鉴别结合部位的氨基酸残基。其做法是将一化学性质活跃的侧链连接到半抗原上,当此带有侧链的半抗原与相应抗体结合后,侧链即与邻近的氨基酸形成共价键,也就是说,结合部位邻近的氨基酸残基被标记了。也有人用叠氮基作侧链连接到半抗原上,并与相应抗体结合,经紫外线照射后,叠氮基转变成活化的硝基

免疫亲和层析的应用特点

免疫亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫亲和色谱,是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。

亲和层析技术

亲和层析     (一)原理    亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在液相中的相应抗体(或抗原)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。