亲和色谱法的技术特点

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。......阅读全文

液—固分配色谱法的技术特点

流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm式中:Xm-

液液分配色谱法的技术特点

液-液分配(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入

色谱分析技术(高压液相色谱、亲和色谱法和吸...(二)

二、易出现的问题(一)涡流扩散(Eddy diffusion)流动相碰到较大的固体颗粒,就像流水碰到石头一样产生涡流。如果柱装填得不均匀,有的部分松散或有细沟,则流动相的速度就快;有的部位结块或装直紧密则流就慢,多条流路有快有慢,就使区带变宽。因此,固相载体的颗粒要小而均匀,装柱要松紧均一,这样涡流

色谱分析技术(高压液相色谱、亲和色谱法和吸...(一)

色谱分析技术(高压液相色谱、亲和色谱法和吸附色谱法)高压液相色谱Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色谱的设想,然而直到六十年代后期,由于各种技术的发展,高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱(HighSpeed Liquid Chromatography)

高效亲和色谱法测定血浆蛋白结合率

  高效亲和色谱法用于测定药物与血浆蛋白的结合,可由药物的迁移变化率的连续变化计算出药物与蛋白的结合常数。色谱系统良好的精密度和重现性可提供大量结合作用的对比研究,并易于与MS等技术联用。该方法允许多种药物同时进样,并可同时测定多种药物与蛋白的结合常数,对立体选择性蛋白结合的研究非常有用。  高效亲

亲和层析技术

亲和层析     (一)原理    亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在液相中的相应抗体(或抗原)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。    

根据配体特异性的分离方法-亲和色谱法

亲和层析法(aflinity chromatography)是分离蛋白质的一种极为有效的方法,它经常只需经过一步处理即可使某种待提纯的蛋白质从很复杂的蛋白质混合物中分离出来,而且纯度很高。这种方法是根据某些蛋白质与另一种称为配体(Ligand)的分子能特异而非共价地结合。其基本原理:蛋白质在组织或细

制备色谱法的技术特点及操作方法

1.样品的前处理:制备色谱柱子由于处理的样品多,比分析柱子更容易受污染,所以,必要的前处理就显得非常的必要。萃取、过滤、结晶、固相萃取等简单的分离方法,如果用得上,而且还不是很麻烦,就要尽可能多的采用以去掉杂质。 2.色谱柱的选择:各种规格的玻璃柱子在实验室里头很容易得到,而且价格低廉,但玻璃柱子致

毛细管电泳色谱法的技术特点

毛细管电泳色谱法(capillary electrochromatography; CEC)是毛细管电泳与液相色谱相结合形成的一种高效、快速微分离分析技术。毛细管电泳色谱法可以分离离子和中性分子。它是利用缓冲溶液的电渗流作为泵,使被分析的分子通过对其具有不同保留程度的第二相,达到分离的目的。

DNA亲和层析的技术方法

DNA亲和层析是利用亲和层析的原理与技术分离能与特定DNA序列相互作用的技术方法。总的过程包括两步,即:一、将某一类细胞中所有的蛋白质过含有该类细胞各种片段的DNA层析柱,用低浓度盐溶液洗去不与DNA作用的绝大多数蛋白,用中浓度盐溶液洗脱大部分与能DNA相互作用的蛋白。二、将第一步得到的能与DNA相

色谱法的特点

色谱法的特点就是利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。而且不仅分离效率高,分析速度快,样品用量少,灵敏度高,分离和测定可一次完成,操作简单,应用的范围广。

色谱法的特点

色谱法的特点:  (1)分离效率高,复杂混合物,有机同系物、异构体。(2)灵敏度高,可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。(3)分析速度快,一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。(4)应用范围广,气相色谱:沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。液

亲和层析技术简介

  将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液,改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来,这种分离纯化蛋白质

亲和层析技术介绍

在一对有专一的相互作用的物质中,把其中之一联结在支持物上,用于纯化相对的另一物质。常见的亲和对如:酶和抑制剂,抗原和抗体,激素和受体等。支持物为琼脂糖或纤维素等。

亲和层析实验技术方法

INTRODUCTIONThis protocol describes a method for removing antibodies that react with bacterially encoded proteins by passing a crude preparation of im

免疫亲和色谱技术是什么

亲和色谱固定相上键合配位体与被分离的生物活性分子之间的相互作用,可用锁匙结构的络合物的生成而表示这个过程。

亲和层析(affinity-chromatography)技术

(一)原理亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在液相中的相应抗体(或抗原)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。此法具有高效、快速、简便等优点。(

实验室分析方法亲和色谱法概念介绍

亲和色谱法(affinity chromatography)用连接在基体上的配位体作为固定相,使与蛋白质或其他大分子发生可逆的高选择性的相互作用,利用不同亲和力进行分离的液相色谱法。

抗体的亲和层析法纯化技术

实验概要本实验介绍了抗体亲和层析法纯化的操作流程。实验原理亲和层析的高度选择性使得从某一初始材料中纯化,富集某一含量较低的目的蛋白成为可能,因此亲和层析是蛋白质分离纯化过程中最有效的方法之一。另外,如果配基与蛋白质的亲和能力很强,也可同时进行样品的浓缩。虽然多数情况下不需要将抗体与其他血清蛋白分开,

抗体的亲和层析法纯化技术

实验概要本实验介绍了抗体亲和层析法纯化的操作流程。实验原理亲和层析的高度选择性使得从某一初始材料中纯化,富集某一含量较低的目的蛋白成为可能,因此亲和层析是蛋白质分离纯化过程中最有效的方法之一。另外,如果配基与蛋白质的亲和能力很强,也可同时进行样品的浓缩。虽然多数情况下不需要将抗体与其他血清蛋白分开,

亲和色谱柱产品特点及用途介绍

亲和色谱柱产品特性:1、柱身为PEEK材质,大大减少非特异性吸附。2、对IgG有很高的动态载量,比传统的Protein A柱定量范围更宽。3、色谱柱耐用性好,使用寿命长(取CHO细胞培养上清液连续进样2000次以上色谱柱性能不变)。4、填料粒径20微米,机械强度高,可用于IgG的快速分离。(标准流速

薄层色谱法的特点

薄层色谱法的特点1、不需要而精密的气相色谱仪分析仪器,分析天平除外,设置和操作简单。2、与纸色谱分析法相比,优越于可以使用腐蚀性的显色剂。3、可选择的流动相和固定相范围比纸色谱法广泛。4、展开快速,且扩散的作用小,斑点比纸色谱集中,检出灵敏度比较高。技术上多样化,不仅有多中展开方式(例如,分布展开,

纸色谱法的特点

   以纸为载体的色谱法。分离原理属于分配色谱范畴。其步骤是将试样溶液涂于滤纸一端的适当位置,然后将此端的边沿部分浸入展开剂中。展开剂顺滤纸流动。试样中各种元素因性质不同,移动速度亦不同,因而分布在滤纸的不同部位而相互分离。例如,在铌、钽纸色谱分离中,将矿样溶液涂于滤纸的一端离边沿5厘米处,然后将滤

实验室分析方法亲和色谱法原理及发展

亲和色谱(AFC)作为一种特异性分离技术,基于生物分子的活性特征,以其极高的选择性不可替代地被应用于复杂生物体系中特定组分的分离。一、原理与色谱柱推荐亲和色谱基于生物分子固有的特异性相互作用进行样品的高选择性分离。特异性相互作用包括醇能与底物、抑制物、辅酶等的结合:;抗体与抗原的结合:凝集素与细胞表

免疫亲和层析技术的应用介绍

一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。

细胞亲和层析的技术方法和步骤

DNA亲和层析是利用亲和层析的原理与技术分离能与特定DNA序列相互作用的技术方法。总的过程包括两步,即:一、将某一类细胞中所有的蛋白质过含有该类细胞各种片段的DNA层析柱,用低浓度盐溶液洗去不与DNA作用的绝大多数蛋白,用中浓度盐溶液洗脱大部分与能DNA相互作用的蛋白。二、将第一步得到的能与DNA相

免疫亲和层析技术的工作原理

亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。通常,在开始亲和层析前需要预先进行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基或血清。首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待一段时间使两相充分混合,随后将

同位素标记亲和标签(ICAT)技术的技术原理

同位素亲和标签技术是一种用于蛋白质分离分析技术,此技术是蛋白质组研究技术中的核心技术之一。该技术用具有不同质量的同位素亲和标签( ICATs) 标记处于不同状态下的细胞中的半胱氨酸,利用串联质谱技术,对混合的样品进行质谱分析。来自两个样品中的同一类蛋白质会形成易于辨识比较的两个不同的峰形,能非常准确

同位素标记亲和标签(ICAT)技术的技术原理

同位素亲和标签技术是一种用于蛋白质分离分析技术,此技术是蛋白质组研究技术中的核心技术之一。该技术用具有不同质量的同位素亲和标签(ICATs)标记处于不同状态下的细胞中的半胱氨酸,利用串联质谱技术,对混合的样品进行质谱分析。来自两个样品中的同一类蛋白质会形成易于辨识比较的两个不同的峰形,能非常准确的比

气相色谱法的特点

优点分离效率高              几十种甚至上百种性质类似的化合物可在同一根色谱柱上得到分离,能解决许多其他分析方法无能为力的复杂样品分析。分析速度快              一般而言,色谱法可在几分钟至几十分钟的时间内完成一根复杂样品的分析。检测器灵敏度高              随着