蛋白质合成实验
实验步骤 材料无菌细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要，因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定）非无菌SLS 或 SDS，1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH三氯醋酸（TCA)液闪瓶Eppendorf 管闪烁液，最小含水为 10%操作步骤1. 细胞生长至所需密度。2. 从孵箱中取出培养板，加人预温的溶于培养液或 BSS 中的放射性同位素，稀释度为 1:10 (如 l00ul/ml/孔）。3. 尽快地将细胞放回孵箱。4 . 继续培养 4～24 h。提示： 不同的蛋白质更新率不尽相同。本操作程序并不针对任何特定的一种蛋白质，而可用于快速生长细胞中的总蛋白。当第一次用来测定一个细胞系的蛋白质合成时，要核实合成率在所选的孵育时间内是否呈线性。如果氨基酸池比饱和时低，可发生延迟。5 . 从孵箱中取出......阅读全文
蛋白质合成实验
实验步骤 材料 无菌 细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板 3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要
蛋白质合成实验
实验步骤材料无菌细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要，因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定）非无菌SLS 或 SDS，1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH三
蛋白质合成实验
实验步骤 材料无菌细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要，因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定）非无菌SLS 或 SDS，1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH
蛋白质合成实验
实验步骤 材料 无菌 细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板 3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要，因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定） 非无菌 SLS 或
蛋白质的生物合成标记实验
实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒 甲硫氨酸PBS 仪器、耗材 培养箱离心管 实验步骤 1. 培养悬浮细胞至对数增长期，室温300 g 离心5 min。回收107~108细胞。 2. 每2×107细胞用约10 ml 37℃的短时间标记培养基在圆锥型试管中洗涤，于室温300
蛋白质的生物合成标记实验
甲硫氨酸短时间标记悬液中的细胞 甲硫氨酸短时间标记贴壁培养细胞 甲硫氨酸对细胞进行脉冲追踪标记 实验材料 蛋白质
蛋白质的生物合成标记实验
甲硫氨酸短时间标记悬液中的细胞 甲硫氨酸短时间标记贴壁培养细胞 甲硫氨酸对细胞进行脉冲追踪标记 实验材料 蛋白质
蛋白质的生物合成标记实验（二）
实验材料细胞试剂、试剂盒PBS甲硫氨酸仪器、耗材培养箱离心机实验步骤1. 在100 mm 直径的培养皿上培养贴壁细胞（0.5~2×107）至70%~90%汇片，吸去培养液，用10 ml 于37℃短时间标记培养基轻轻搖晃冼两次细胞。2. 加入5 ml 于37℃短时间标记培养基，在5%CO2的加湿培
蛋白质的生物合成标记实验（三）
实验材料细胞试剂、试剂盒甲硫氨酸PBS仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1. 准备和用［35S］甲硫氨酸标记细胞，用0.2~1 mCi/ml 的［35S］甲疏氨酸脉冲标记细胞5~30 min。 2. 脉冲标记后，除去［35S］甲硫氨酸培养基，用10 ml 于37℃追加培养基冼细胞1次，加入10 ml
蛋白质的生物合成标记实验（一）
甲硫氨酸短时间标记悬液中的细胞生物按照从脱氧核糖核酸 (DNA)转录得到的信使核糖核酸（mRNA）上的遗传信息合成蛋白质的过程。由于mRNA上的遗传信息是以密码（见遗传密码）形式存在的，只有合成为蛋白质才能表达出生物性状，因此将蛋白质生物合成比拟为转译或翻译。实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲硫氨酸PBS