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荧光显微镜标本制作原理概述

免疫荧光细胞化学的基本工具是荧光显微镜。它的主要部件是光源、滤板系统和光学系统等。荧光显微镜制作标本的原理是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。(一)光源荧光显微镜多采用200 W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作而成,中间呈球形,内充一定数量的汞,工作时由两个电极间放电,引起水银蒸发,球内气压迅速升高,当水银完全蒸发时,可达50~70个标准大气压力,这一过程一般约需5~15 min。超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。它发射很强的紫外线和蓝紫光,来激发各类荧光物质,因此,为荧光显微镜普遍采用。超高压汞灯也散发大量热能。因此,灯室必须有良好的散热条件,工作环境温度不宜太高。新型超高压汞灯在使用初期不需高电压即可引燃,使用一些时间后,则需要高压启动(约为15000 V),启动后,维持工作电压一般为50~60 V,工作电流约4 A左右。200 W超......阅读全文

显微技术(图)

显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。—、光学显微镜(一)、普通光学显微镜普通生物显微镜由3部分构成,即:①照明系统,包括光源和聚光器;②光学放大系统,由物镜和目镜组成,是显微镜的主体,为了消除

免疫荧光细胞化学技术-2

 四、荧光抗体的保存  以0~4℃或-20℃低温保存,防止抗体活性降低和蛋白变性。最好加入浓度为1:5000~10000的硫柳汞或1:1000~5000的叠氮钠防腐,小量分装如0.1~1ml,真空干燥后更易长期保存。[NextPage] 第三节 免疫荧光细胞化学染色方法  一、标本制作  可制作涂片

生物荧光显微镜的技术操作

荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。    •原理  •荧光显微镜标本制作要求  •使用荧

自动白细胞分类计数的技术现状和展望

    胡晓波,上海交通大学医学院附属第三人民医院检验科主任,副主任技师。1993年毕业于上海第二医科大学,并留校任医学检验系教师。1999年至上海市临床检验中心,担任中心副主任,负责业务和部分行政管理工作。2006年至上海交通大学医学院附属第三人民医院检验科工作,担任科副主任、

免疫细胞化学技术在肾脏疾病中的应用范围

第一节 免疫细胞化学技术在肾脏疾病中的应用范围在肾脏疾病时,免疫细胞化学技术主要应用于肾脏穿刺组织的检查,也可应用于血清或肾脏洗脱液及尿液的特殊检查,兹分述如下:一、肾脏组织的检查肾穿刺组织一般应切割为三小块,分别作冰冻切片、石蜡切片及超薄切片,进行荧光显微镜、光学显微镜及透射电镜观察。所应用的免疫

血细胞分析仪50年发展历程和未来展望

1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜,1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大,后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞,他是第一个见到红细胞的人,开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计并生产出第一

透射电子显微镜的原理与演示

实验一 透射电子显微镜 的原理与演示 解剖、观察和分析历来是生物学研究的基本手段。用于细胞解剖观察的主要工具就是显微镜,它是我们观察细胞形态最常用的工具。但其分辨率的最小数值不会小于0.2mm(紫外光显微镜的分辨率也只能达到0.1mm), 这一数值是光学显微镜分辨率的极限。限制显微镜分辨率

常用的分子生物学基本技术

核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的

尿液分析仪市场分析

内容提要:近年来,随着国产品牌产品技术日趋成熟,并且受到越来越多检验专家及终端客户的认可,导致进口品牌产品的价格体系趋于下调且市场占有率逐年下滑。本文介绍了尿液自动有形成分分析仪设备的分类,列举各类技术代表机型与对比情况,从产品价位、质量管控、销售模式、售后服务等方面分了国产品牌尿液分析仪与外资品牌

生物显微镜--激光扫描共聚焦显微镜概述

生物显微镜--激光扫描共聚焦显微镜概述激光扫描共聚焦显微镜(laser sconningconfocal microscope,LSCM)在生物医学领域的主要应用是通过一种或多种荧光探针标记后可对固定的组织或活体标本进行观察研究。当这些标本用普通荧光光学显微镜观察时,来自焦点以外的其他区域的荧光对结

UF1000i尿液管型检测的分析

 尿液管型概述:    管型是尿沉渣中有重要意义的成分,管型尿的出现往往提示有肾实质性损害。    管型尿是尿液中的蛋白质在肾小管、集合管内凝固而形成的圆柱状结构物,管型的形成必需有蛋白尿,其形成基质物为T-H糖蛋白。在病理情况下,由于肾小球基底膜的

视频显微镜也可叫做数码显微镜

视频显微镜也可叫做数码显微镜 最早的雏形应该是相机型显微镜,将显微镜下得到的图像通过小孔成象的原理,投影到感光照片上,从而得到图片。或者直接将照相机与显微镜对接,拍摄图片。随着CCD摄像机的兴起,显微镜可以通过其将实时图像转移到电视机或者监视器上,直接观察,同时也可以通过相机拍摄。80年代

POCT的相关技术

POCT 发展很快,主要得益于一些新技术的应用。 POCT 技术的基本原理大致可分为四类: (1) 把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料内 ,成为整合的干燥试剂块 ,然后将其固定于硬质型基质上 ,成为各种形式的诊断试剂条。 (2) 把传统分析仪器微型化 ,操作方法简单化 ,使之

【共享】POCT的相关技术

POCT 发展很快,主要得益于一些新技术的应用。 POCT 技术的基本原理大致可分为四类: (1) 把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料内 ,成为整合的干燥试剂块 ,然后将其固定于硬质型基质上 ,成为各种形式的诊断试剂条。 (2) 把传统分析仪器微型化 ,操作方法简单化

显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程

实验概要本实验详细介绍了显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程。实验原理转基因小鼠制备的基本原理是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射法注入供体小鼠的受精卵(或着床前胚胎细胞),然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物,通过分

激光共聚焦显微镜的原理与应用范围

 激光扫描共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。把光学成像的分辨率提高了30%~40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察生理信号及细

姊妹染色单体色差方法

实验概要了解姊妹染色单体(sister chromatid)差别染色技术的原理和制作SCE标本的方法。通过SCE标本的观察,掌握SCE计数方法。实验原理在DNA复制过程中,核苷的类似物5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridine简称BrdUrd)或5-碘尿嘧啶核苷(5-Iodo-2′

核酸荧光染色技术在血液分析仪的最新应用

吴俊一概述  目前,五分类血液分析仪已经为许多大中型医院实验室所使用。五分类仪器不同于三分类仪器的主要区别在于:为了精确定量地检测白细胞的五种成份,各种五分类血液分析仪开始采用多种物理学原理(电阻抗、光散射、高频波技术),甚至设置专用检测通道和化学染色方法检测数目最少的嗜酸、嗜碱性粒细胞。  而高档

血细胞分析仪的检测技术及发展

  谈到血细胞计数仪的发展史,不得不提到在这个领域首开先河的人。他是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter,最初是一位广播电台的电器工程师,后来做过X光机的销售员和维修工程师,在亚洲许多国家包括我国的上海工作过。1948年他在芝加哥一家公司工作时,在一间地下

罗氏公司TUNEL细胞凋亡检测程序

(In situ cell death detection kit-POD法)一、 原理:TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的dU

TUNEL细胞凋亡检测程序

实验概要本实验用TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒检测了组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。实验原理其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可

叶绿体的分离与荧光观察

叶绿体足植物细胞所特有的能量转换细胞器,光合作川就是在叶绿体中进行的。由于具有这一重要功能,所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器,利用低速离心即可分离集中进行各种研究。实验目的一、通过植物细胞叶绿体的分离。了解细胞器分离的一般原理和方法。二.观

叶绿体的分离与荧光观察实验方法与步骤

叶绿体  足植物细胞所特有的能量转换细胞器,光合作川就是在叶绿体中进行的。由于具有这一重要功能,所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器,利用低速离心即可分离集中进行各种研究。 实验目的 一、通过植物细胞叶绿体  的

原位杂交组织化学实验技术4

 二、生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学中的应用  (一)光敏生物素标记cRNA探针的应用  以线性质粒DNA为模板合成未加标记物的cRNA探针,使其最终浓度为0.5~1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再与等体积的光敏生物素(1μg/μl)混合。在150瓦卤素灯下,距离光源20c

微生物学检验基本技术(1)

随着现代医学及相关科学技术的发展,各学科相互交叉和渗透,医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平,许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术,准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物,并对引起感染的微生物进行耐药性监测,为临床对感

微生物学检验基本技术(1)

第一节 微生物形态学检查   细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一,它是细菌分类和鉴定的基础,可根据其形态、结构和染色反应性等,为进一步鉴定提供参考依据。 一、显微镜检查   由于细菌个体微小,肉眼不能看到,必须借助显微镜的放大才能看到。一般形态和结构可用光学显微镜观察,其内部的超微结构则需用电

组织学研究方法

(一)一般光学显微镜术应用一般光学显微镜(简称光镜)观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块,先用固定剂(fixative)固定(fixation),使组织中的蛋白质迅速凝固,防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等,一般常将几种固定剂配制成混

光学显微镜分析

  光学显微镜(英文Optical Microscope,简写OM)是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们提取微细结构信息的光学仪器。  介绍  显微镜是一种精密的光学仪器,已有300多年的发展史。自从有了显微镜,人们看到了过去看不到的许多微小生物和构成生物的基本单元——细胞。

关于显微镜你所不知道的故事

生物课上,一台显微镜、一片菜叶子加上一只青蛙或者鲫鱼,一场生物显微解剖课开场了。各自不免兴奋,显微镜是多么神奇的一个东西!它让我们能够看到流淌江水中的各种微生物,能够知晓细胞内形形色色的细胞器,能够区分出猩猩有24对染色体而人却只有23对。    这都要归功于16世纪一个叫Zacharia

免疫酶细胞化学实验技术-3

一、对照实验  1.吸收实验  应用尚无文献报告的抗血清/自己制备的抗血清进行ICC染色时,需用相应的抗原吸收抗血清后,再孵育标本,判断结果的可信性(结果应为阴性)。常用的吸收实验分固相吸收和液相吸收两种(见本书第一章 ),对于不能形成沉淀,难以用离心沉降法分离的一些小分子多肽类抗原,以固相吸收为佳