显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程

实验概要本实验详细介绍了显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程。实验原理转基因小鼠制备的基本原理是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射法注入供体小鼠的受精卵(或着床前胚胎细胞),然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物,通过分析转基因和实验小鼠表型的关系,研究揭示外源基因的功能,而且可进行工程动物的大量生产。主要试剂1. M16溶液:称取 0.5534 g NaCl,0.0356 g KCl,0.0162 g KH2PO4,0.0294 g MgSO4.7H2O, 0.0252 g CaCl2.2H2O,0.32 ml乳酸钠(60% 糖浆),0.0036 g丙酮酸钠, 0.1000 g D-葡萄糖,0.0010 g酚红,0.2106 g NaHCO3。溶于100ml超纯水,0.22?m滤膜过滤除菌,分装后4℃储存不超过3周,加入4 mg/mL BSA可立即......阅读全文

显微注射法技术要求

这种显微注射术的程序,需有相当精密的显微操作设备,制造长管尖时,需用微量吸管拉长器(micropipettepuller),注射时需有固定管尖位置的微量操作器。这种技术的长处为任何DNA在原则上均可传入任何种类的细胞内。此法已成功运用于包括小鼠、鱼、大鼠、兔子及许多大型家畜,如牛、羊、猪等基因转殖动

显微注射法的技术特点

显微注射法(microinjection)是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组(rearrangement)、缺失(deletion)、复制(duplication)或易位(translocatio

显微注射法的方法过程

一、采集受精卵(1)超数排卵:选取6~8周龄的雌性小鼠,先后腹腔注射5U孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonactotropin,PMSG)和2.5~5.0U人绒毛膜促性腺激素(humar chorionic gonactotropin,HCG),以促进排卵,然后与鼠龄

显微注射法方法简介

显微注射法(microinjection)是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组(rearrangement)、缺失(deletion)、复制(duplication)或易位(translocatio

显微注射法的基本介绍

  显微镜注射法是现代科学技术行业的一项新成果,利用极其精密的仪器完成。 它广泛应用于转基因技术上。  显微注射法(microinjection)是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组(rearran

简述显微注射法的技术要求

  这种显微注射术的程序,需有相当精密的显微操作设备,制造长管尖时,需用微量吸管拉长器(micropipettepuller),注射时需有固定管尖位置的微量操作器。这种技术的长处为任何DNA在原则上均可传入任何种类的细胞内。此法已成功运用于包括小鼠、鱼、大鼠、兔子及许多大型家畜,如牛、羊、猪等基因转

显微注射法应用转基因方式

最常用来生产转基因动物的方式为:直接把重组过的 DNA 注入受精卵的原核(pronuleus) 中,也就是将从胚胎提供者的输卵管中取得的受精卵移到倒置显微镜上的微量注射台上,然后利用固定吸量管 (holdingpipette) 固定住,之后注射针则依序穿过 zona pellucida,ocyte

转基因技术核显微注射法简介

  核显微注射法是动物转基因技术中最常用的方法。它是在显微镜下将外源基因注射到受精卵细胞的原核内,注射的外源基因与胚胎基因组融合,然后进行体外培养,最后移植到受体母畜子宫内发育,这样分娩的动物体内的每一个细胞都含有新的DNA片段。-这种方法的缺点是效率低、位置效应(外源基因插入位点随机性)造成的表达

显微注射法应用转基因动物

以显微注射法转外源基因没有长度上的限制,已证明数百kb之DNA片段均可以成功产制出转基因动物。其缺点是设备精密而昂贵、操作技术需要长时间的练习,以及每次只能注射有限的细胞。这些操作中所使用的微量移液管是用毛细管拉针器(pipettepuller)来制作的,先将玻璃毛细管加热到其熔化的温度,再将其拉制

显微注射法的技术优势和缺陷

以显微注射法转外源基因没有长度上的限制,已证明数百kb之DNA片段均可以成功产制出转基因动物。其缺点是设备精密而昂贵、操作技术需要长时间的练习,以及每次只能注射有限的细胞。这些操作中所使用的微量移液管是用毛细管拉针器(pipettepuller)来制作的,先将玻璃毛细管加热到其融化的温度,再将其拉制

透射法和散射法区别

通过气溶胶的透射光为橙红色,侧面散射光为淡兰色。透射光: 光源光穿过透明或半透明物体后再进入视觉的光线,称为透射光,透射光的亮度和颜色取决于入射光穿过被透射物体之后所达到的光透射率及波长特征。摄像上用来制造透明感和立体感。散射是指由传播介质的不均匀性引起的光线向四周射去的现象。如一束光通过稀释后的牛

显微注射法在转基因方式上的应用介绍

  最常用来生产转基因动物的方式为:直接把重组过的 DNA 注入受精卵的原核(pronuleus) 中,也就是将从胚胎提供者的输卵管中取得的受精卵移到倒置显微镜上的微量注射台上,然后利用固定吸量管 (holdingpipette) 固定住,之后注射针则依序穿过 zona pellucida,ocyt

显微注射法在转基因动物上的应用

  以显微注射法转外源基因没有长度上的限制,已证明数百kb之DNA片段均可以成功产制出转基因动物。其缺点是设备精密而昂贵、操作技术需要长时间的练习,以及每次只能注射有限的细胞。这些操作中所使用的微量移液管是用毛细管拉针器(pipettepuller)来制作的,先将玻璃毛细管加热到其熔化的温度,再将其

显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程

实验概要本实验详细介绍了显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程。实验原理转基因小鼠制备的基本原理是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射法注入供体小鼠的受精卵(或着床前胚胎细胞),然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物,通过分

天津注胶虾事件真相调查:仅注胶还注化学物质

  网言网语   日前,多个网站热传“注胶虾”充斥天津水产市场。据传,不法商贩在冻虾的虾头和虾身注入明胶,以增加重量、改善卖相。该消息随即被大量转载, “注胶虾”迅速成为目前食品安全领域的焦点话题。对此,有商贩竟称“注胶虾吃不死人的”,引起网民愤慨。天津“注胶虾”究竟有多泛滥?是谁往虾身上注胶

辐射法分离细胞集落

实验方法原理 将培养瓶倒置放于 X 射线机或 60Co 源下,用铅块遮蔽需要的集落。 实验材料 D-PBS                                                                  0.25%胰蛋白酶            

辐射法分离细胞集落

实验方法原理 将培养瓶倒置放于 X 射线机或 60Co 源下,用铅块遮蔽需要的集落。 实验材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶 仪器、耗材 生长培养基X射线或钴源铅块 实验步骤 1. 选择想要的集落,用毡制粗头笔或 Nikon 标记笔做记号。 2. 选出一

辐射法分离细胞集落

实验方法原理 将培养瓶倒置放于 X 射线机或 60Co 源下,用铅块遮蔽需要的集落。 实验材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶 仪器、耗材 生长培养基X射线或钴源铅块 实验步骤 1. 选择想要的集落,用毡制粗头笔或 Nikon 标记笔做记号。 2. 选出一块大小适当的铅块。

辐射法分离细胞集落

            实验方法原理 将培养瓶倒置放于 X 射线机或 60Co 源下,用铅块遮蔽需要的集落。 实验材料 D-PBS 0.25%胰蛋白酶

脱敏注射法的简介

  注射脱敏,即应用会对机体造成超敏反应的药物时实行的一种尽可能减轻患者过敏反应的一种实验性药物注射治疗方案。最常见的脱敏注射法是破伤风抗毒素(TAT)脱敏注射法,将所需的TAT剂量分次少量注射进体内。TAT对于人体是一种异种蛋白,具有抗原性,注射后可引起过敏反应。主要表现为发热、速发型或迟缓型血清

热折射法的概念

中文名称热折射法英文名称thermorefractometry定  义在程序控温下,测量试样折射率与温度关系的方法。应用学科机械工程(一级学科),分析仪器(二级学科),热学式分析仪器-热学式分析仪器分析原理(三级学科)

单晶衍射法的概述

  单晶X 射线衍射分析的基本方法为劳埃法与周转晶体法。  劳埃法  劳埃法以光源发出连续X 射线照射置于 样品台上静止的单晶体样品,用平板底片记录产生的衍射线。根据底片位置的不同,劳埃法可以分为透射劳埃法和背射劳埃法。背射劳埃法不受样品厚度和吸收的限制,是常用的方法。劳埃法的衍射花样由若干劳埃斑组

X射线绕射法的简介

  物质结构的分析尽管可以采用中子衍射、电子衍射、红外光谱、穆斯堡尔谱等方法,但是X射线绕射是最有效的、应用最广泛的手段,而且X射线绕射是人类用来研究物质微观结构的第一种方法。X射线绕射的应用范围非常广泛,现已渗透到物理、化学、地球科学、材料科学以及各种工程技术科学中,成为一种重要的实验方法和结构分

X射线绕射法的应用

  X 射线衍射技术已经成为最基本、最重要的一种结构测试手段,其主要应用主要有以下几个方面:  物相分析  物相分析是X射线绕射在金属中用得最多的方面,分定性分析和定量分析。前者把对材料测得的点阵平面间距及衍射强度与标准物相的衍射数据相比较,确定材料中存在的物相;后者则根据衍射花样的强度,确定材料中

桩基检测的声波透射法

  与其他完整性检测方法相比,声波透射法能够进行全面、细致的检测,且基本上无其他限制条件。但由于存在漫射、透射、反射,对检测结果会造成影响。近几年涌现的多通道超声波检测仪,使得检测效率成倍的提高。该检测方法是获得一组(剖面)声学数据后,对数据进行分析,剔除异常值后计算平均值(声速和波幅),然后再将每

X射线绕射法的原理

  当一束单色X射线入射到晶体时,由于晶体是由原子规则排列成的晶胞组成,这些规则排列的原子间距离与入射X射线波长有相同数量级,故由不同原子散射的X射线相互干涉,在某些特殊方向上产生强X射线绕射,衍射线在空间分布的方位和强度,与晶体结构密切相关。这就是X射线绕射的基本原理。  布拉格方程  1913年

电子衍射法的简介

中文名称电子衍射法英文名称electron diffraction method定  义通过记录和分析入射电子束与试样物质发生相干弹性散射而形成的电子衍射图像。测定试样晶体结构的电子能谱法。应用学科机械工程(一级学科),分析仪器(二级学科),能谱和射线分析仪器-能谱和射线分析仪器分析原理(三级学科)

双晶衍射法的相关介绍

  双晶衍射仪用一束X 射线(通常用Ka1作为射线源)照射一个参考晶体的表面,使符合 布拉格条件的某一 波长的X 射线在很小角度范围内被反射,这样便得到接近单色并受到偏振化的窄 反射线,再用适当的光阑作为限制,就得到近乎准值的X射线束。把此X 射线作为第二晶体的入射线,第二晶体和 计数管在衍射位置附

x射线衍射法的原理

原理:将具有一定波长的X射线照射到结晶性物质上时,X射线因在结晶内遇到规则排列的原子或离子而发生散射,散射的X射线在某些方向上相位得到加强,从而显示与结晶结构相对应的特有的衍射现象。波长λ可用已知的X射线衍射角测定,进而求得面间隔,即结晶内原子或离子的规则排列状态。将求出的衍射X射线强度和面间隔与已

X射线粉末衍射法

  一、基本原理:当一束单色X射线投射到晶体上,晶格中原子散射的电磁波互相干涉和相互叠加,在某一方向得到加强或抵消的现象,称为衍射。相应的方向称为衍射方向。晶体衍射X射线的方向与构成晶体的晶胞大小、形状及入射的X射线波长有关。  衍射光的强度与晶体内原子的类型和晶胞内原子的位置有关,所以,从衍射光束