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如何选择凝胶

生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性,然后通过实验选择出最有效的纯化流程。 1.测定------分子量、PI 当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时,可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中,可简易地测出PI,并选择纯化用缓冲液的最佳PH。 2.选择------层析方法 若对目标蛋白的特性或样品成分不太了解,可尝试几种不同的纯化方法:一] 使用最通用的凝胶......阅读全文

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(五)

  柱床体积Vt可以通过加入一定量的水至层析柱预定标记处,然后测量水的体积来测定。外水体积Vo可以通过测定完全排阻的大分子物质的洗脱体积来测定,一般常用蓝色葡聚糖-2000作为测定外水体积的物质。因为它的分子量大(为200万),在各种型号的凝胶中都被排阻,并且它呈蓝色,易于观察和检测。&n

2-DE 蛋白质组学的 PROTICdb 数据库实验

实验步骤:3.1 PROTICdb 概述在输入或浏览数据时,每个最终用户需要一个 PROTICdb 账户(由您的管理员创建 ) 。作为一个新用户,首先要创建一个新的项目。一旦建立,该项目就属于这个用户,这个用户有权授予其他用户访问权限。为确保数据一致性的精确度,尽量不要用手动输入操作。因此,

凝胶过滤(gel filtration,GF)注意事项

1.层析柱的选择层析柱大小主要是根据样品量的多少以及对分辨率的要求来进行选择。一般来讲,主要是层析柱的长度对分辨率影响较大,长的层析柱分辨率要比短的高;但层析柱长度不能过长,否则会引起柱子不均一、流速过慢等实验上的一些困难。一般柱长度不超过100cm,为得到高分辨率,可以将柱子串联使用。层析柱的直径

2-DE 蛋白质组学的 PROTICdb 数据库实验

仪器、耗材DBMS实验步骤3.1 PROTICdb 概述在输入或浏览数据时,每个最终用户需要一个 PROTICdb 账户(由您的管理员创建 ) 。作为一个新用户,首先要创建一个新的项目。一旦建立,该项目就属于这个用户,这个用户有权授予其他用户访问权限。为确保数据一致性的精确度,尽量不要用手动输入操作

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(六)

5. 洗脱速度洗脱速度也会影响凝胶层析的分离效果,一般洗脱速度要恒定而且合适。保持洗脱速度恒定通常有两种方法,一种是使用恒流泵,另一种是恒压重力洗脱。洗脱速度取决于很多因素,包括柱长、凝胶种类、颗粒大小等,一般来讲,洗脱速度慢一些样品可以与凝胶基质充分平衡,分离效果好。但洗脱速度过慢会造成样品扩散加

凝胶成像系统在选择过程中需要注意哪些?

随着科学日新月异的发展,传统的凝胶成像系统在使用过程当中,可能它的功能比较单一,但是随着科技的不断进步和发展,凝胶成像系统的功能和使用情况也在逐步得到提高。所以大家在凝胶成像系统的选择上,需要根据自身的实际情况来做出相关的判断和选择,只要选择出来的合适的凝胶成像系统,才能够真正的为自己所用,帮助自己

凝胶层析法概述

凝胶层析法(gel chromatography)也称分子筛层析法,是指混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高,除常用于分离纯化蛋白质、核酸、多糖、激素等物质外,还可用于测定蛋白质的相对分子质量,以及样品的脱盐和浓

凝胶成像分析系统的选择趋势

    在生物学研究和生物学相关的分子生物交叉学科研究领域,凝胶成像分析系统的实际应用正在逐渐普遍化,但是绝大多数的用户在面对市场上种类繁多的品牌国产和进口的凝胶成像分析系统时,往往是不知道如何去进行选择,而从凝胶成像分析系统的选择趋势,其实用户在选择的时候只需要以自

如何选择Alpha凝胶成像?

如何选择Alpha凝胶成像,Alpha公司是一家专注于凝胶成像的研发,特别是高端产品的开发和生产的公司。其化学发光成像、多色荧光凝胶成像产品在高端凝胶成像市场一直深的用户青睐。目前是美国ProteinSimple公司的一部分,但产品与品牌仍保持一定的独立性,被收购后在高端产品部分又陆续推出几款很好的

实验室常用成像设备选购要点

  成像设备是生物实验室最为常用的仪器之一,直接为您的论文提供影像依据。而这些影像质量的好坏,有时候甚至决定着您的论文能否发表。拥有一台好的、运行稳定的设备也是导师和技术主管的心愿。那么,如何从纷繁的市场上选择到一款好的成像设备呢?很多号称“王牌”的设备是否真的能够打满分呢?本文教您

实验室常用成像设备选购要点

成像设备是生物实验室最为常用的仪器之一,直接为您的论文提供影像依据。而这些影像质量的好坏,有时候甚至决定着您的论文能否发表。拥有一台好的、运行稳定的设备也是导师和技术主管的心愿。那么,如何从纷繁的市场上选择到一款好的成像设备呢?很多号称“王牌”的设备是否真的能够打满分呢?本文教您选择成像系统的三大要

凝胶成像分析仪的相机区分

   在组成凝胶成像分析仪的配件中,相机绝对是其中最重要的一个部件,因为凝胶成像分析的基础,首先就是要获取图像,而获取图像的部件就是相机。而随着影像技术的发展,在相机的选择上,已经有了较大的选择余地,那么凝胶成像分析仪的相机有哪些区分呢?    一般来说凝胶

凝胶成像系统的基本选购原则(一)

  如何从纷繁的市场上选择到一款好的成像设备呢?很多号称-的设备是否真的能够打满分呢?拥有一台好的、运行稳定的设备是实验者的心愿。下面的文章就向您介绍选择成像系统的“四个基本选购原则”。   原则一:   “只选对的,不选贵的”市场上各品牌、各型号的成像仪林林种种,但是从成像原理上可以分成两

凝胶成像系统的基本选购原则(一)

如何从纷繁的市场上选择到一款好的成像设备呢?很多号称-的设备是否真的能够打满分呢?拥有一台好的、运行稳定的设备是实验者的心愿。下面的文章就向您介绍选择成像系统的“四个基本选购原则”。原则一:“只选对的,不选贵的”市场上各品牌、各型号的成像仪林林种种,但是从成像原理上可以分成两大类,分别是拍照成像和扫

凝胶成像系统的四个基本选购原则

如何从纷繁的市场上选择到一款好的成像设备呢?很多号称“王牌”的设备是否真的能够打满分呢?拥有一台好的、运行稳定的设备是实验者的心愿。下面的文章就向您介绍选择成像系统的“四个基本选购原则”。原则一:“只选对的,不选贵的”市场上各品牌、各型号的成像仪林林种种,但是从成像原理上可以分成两大类,分别是拍照成

凝胶色谱仪的操作使用说明

凝胶色谱仪的操作使用包括凝胶的选择与预处理、色谱柱的选择、装柱、平衡、加样、洗脱、检测、收集和凝胶的保存等。一、凝胶的选择:1、根据样品确定分离范围,选择合适的凝胶。应将大分子完全排阻而小分子完全渗透。2、颗粒度适当:颗粒小,分辨率高,但相对流速慢,有时会造成严重扩散。颗粒大,流速快,分辨率低。3

蛋白质组数据的多元分析实验

仪器、耗材扫描仪图像分析软件Excel 程序多元数据分析的软件实验步骤用 Progenesis、Excel 和 The  Unscrambler 对 2D 凝胶进行多元分析。3.1 确定研究方案后建立蛋白的 2D 凝胶在本章节中不再阐述,但要确定染色方法以便进行凝胶的定量分析(见注释 1

蛋白质组数据的多元分析实验

仪器、耗材 扫描仪图像分析软件Excel 程序多元数据分析的软件实验步骤 用 Progenesis、Excel 和 The  Unscrambler 对 2D 凝胶进行多元分析。3.1 确定研究方案后建立蛋白的 2D 凝胶在本章节中不再阐述,但要确定染色方法以便进行凝胶的定量分析

蛋白质组数据的多元分析实验

仪器、耗材:扫描仪                                        

凝胶成像系统的四个基本选购原则

  如何从纷繁的市场上选择到一款好的成像设备呢?很多号称“王牌”的设备是否真的能够打满分呢?拥有一台好的、运行稳定的设备是实验者的心愿。下面的文章就向您介绍选择成像系统的“四个基本选购原则”。   原则一:“只选对的,不选贵的”市场上各品牌、各型号的成像仪林林种种,但是从成像原理上可以分成两大类,

凝胶成像工作原理及使用方法

   凝胶成像系统是,样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。    样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所得到的图像上

凝胶成像工作原理及使用方法

凝胶成像系统是,样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所得到的图像上面的样品条带的光

核酸凝胶电泳-3

3、电泳:电压<10V/cm,电泳至溴酚兰移出样品槽到凝胶板的2/3距离时,关闭电源。4、取出凝胶块,置紫外透射反射分析仪上观察,即可见桔红的DNA区带。【注意事项】1、加样时枪头不要碰坏孔壁,否则DNA带型不整齐。大多情况下,加样时不必更换枪头,可在阴极槽中反复吸打电泳缓冲液清洗,但对Southe

聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel)选择指导

Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶,包括不同的成分,百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度,缓冲系统,上样孔格式以及胶的厚度,对于获得最好的结果非常重要。以下提供了帮助你选择适合你应用的正确凝胶的信息。E-PAGE™ 96 High-Throughput System是整合的

聚丙烯酰胺凝胶电泳原理特性和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电...-1

聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide,简称Acr)和交联剂又称为共聚体的N, N-甲叉双丙烯酰胺(methylene-bisacrylamide,简称Bis)在加速剂和催化剂的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGE)。与

2-DE 蛋白质组学的 PROTICdb 数据库实验(四)

4. 质谱鉴定报告文件上传PROTICdb 兼容以制表分隔的文本格式输出的 Sequest 鉴定报告(见注释 13) 。( 1 ) 为演示,访问 http: //location 一 of/your/proticdb/home/demo. php。点击  “formto  o

2-DE 蛋白质组学的 PROTICdb 数据库实验(二)

4. 梅拉尼生成的输出文件的上传( 1 ) 由梅拉尼软件生成一个检测报告,并把它输出到一制表分隔的文本格式文件 ( 见注释 9)。 文件扩展名为 “ txt.  ” 。 本演示中,使用 PROTICdb  Demo,   zip 中的 detections

多糖的分离和纯化几种方法

  经过前期对多糖的提取,去除蛋白质、色素、小分子等物质得到粗多糖,而这些粗多糖其实是由很多分子量、结构不同的多糖混合而成。为了得到纯的多糖即均一性多糖,仍需进一步对这些粗多糖进行分离纯化。  1、分步沉淀法  多糖的结构和分子量不同,其极性大小不同,在有机溶剂(如醇或酮)中的溶解度不同,根据这一原

凝胶选择指导

Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶,包括不同的成分,百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度,缓冲系统,上样孔格式以及胶的厚度,对于获得最好的结果非常重要。以下提供了帮助你选择适合你应用的正确凝胶的信息。E-PAGE™ 96 High-Throughput System是整合的

2-DE 蛋白质组学的 PROTICdb 数据库实验(五)

( 10 ) 鼠标左键点击同一个点(342 号)(见注释 20) ,激活蛋白点信息框。蛋白点的数据按以下 4 个条目排列:概要、关系、鉴定和量化。每个条目对应的信息可被不断充实。其中鉴定包括质谱的详细数据。( 11 ) 开发鉴定、质谱详细数据和下一个子目录。从质谱数据分析得到了每个匹配结果,首先得到