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小分子的话就不要过夜转,采取100V一小时应该就可以了,注意降温。知识补充蛋白的分子量 是理论的分子量 其实还可能有一些修饰的 比如乙酰化 糖基化等那么要考虑分子量的问题 其次 你买的抗体怎么样？特异性 效价 亲和力等 是否适合做WB？ 再次 你可以用预染的蛋白marker试一试 确定你的目的蛋白没有跑到胶外去 但是这个也不是很好 因为目的蛋白的电泳的特性和marker的不完全一致 所以也是误差比较大的 最保险的方法是跑tricine电泳 在 精编分子实验指南 这本老实验书上有 那是做小分子蛋白的经典方法......阅读全文
小分子的话就不要过夜转,采取100V一小时应该就可以了,注意降温。知识补充蛋白的分子量 是理论的分子量 其实还可能有一些修饰的 比如乙酰化 糖基化等那么要考虑分子量的问题 其次 你买的抗体怎么样？特异性 效价 亲和力等 是否适合做WB？ 再次 你可以用预染的蛋白marker试一试 确定你的目的蛋白没
300mA90分钟,我们是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚胶要时间长一些,另外你做的蛋白如果超过100kd建议时间更长一些,若是小蛋白就减少转模时间,立春红确定最适时间
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0
转膜分干转和湿转，恒流转膜一般0.8mA/cm2分子量与转膜时间对应关系分离胶浓度（％） 线性分离范围 电泳时间(h)15 10~43 0.512 12~60 0.7510 20~80 1.57.5 36~94 1.5~2.0