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各款荧光定量PCR仪的性能比较

本人从事荧光定量PCR检测试剂的开发工作,用过市场上主流的多款荧光定量PCR仪,如ABI5700,ABI7700,ABI7000,ABI7300,ABI7500,MJ opticon,MJ opticon2,bio-rad ICycler,LightCycler1.5,roter-gene3000,Stratagene Mx3000P,line-gene等等。这种仪器各有各的特点,但都存在不足之处。 ABI公司的荧光定量PCR仪产品比较多,成系列,但目前而言ABI5700和ABI7700不能实时在线地检测荧光,因而已经退出历史舞台,尤其是ABI7700,不但很贵,而且采用苹果机电脑,使用很不方便。ABI7000目前也已经淘汰,我用的这台仪器老出问题,曲线极不光滑,但同样的反应体系在国产机杭州博日line-gene上曲线非常好,在ABI7500上曲线也很光滑......阅读全文

PCR原理分类应用及国内外主要品牌汇总

PCR概念PCR,中文名是聚合酶链反应(基因扩增)基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR是模拟体内DNA复制过程,在体外特异性扩增DNA片段的一种技术。PCR的应用领域:1、遗传病和某些疑难病的诊断2、病原体的检测。某些恶性疾病一般用微生

浅析乳制品中高危害食源性致病菌——阪崎肠杆菌的快速...

浅析乳制品中高危害食源性致病菌--阪崎肠杆菌的快速检测摘   要:2006年国家出台的《婴幼儿配方乳粉生产许可证审查细则》中明确要求采用国际通行的“荧光PCR仪”作为出厂检验必备设备,此要求已成为乳品企业生产许可证核发的必要条件。本文简单综述了国际通行的保证食品安全的食

高性价比的荧光定量PCR仪选购指南

从1996年ABI公司推出了全球第一款荧光定量PCR以来,经过10几年的发展,由于荧光定量PCR仪的在科研、检测和诊断领域的广泛应用,市场规模也不断扩大。已有多家国内外生产厂商涉足研发生产,就连Eppendorf公司也于2006年底推出了自己的荧光定量PCR仪。这些产品良莠不齐,令研究人员选择是不免

QPCR常见问题及其分析

一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为10

QPCR常见问题及其分析

一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为10

各款荧光定量PCR仪的性能比较

本人从事荧光定量PCR检测试剂的开发工作,用过市场上主流的多款荧光定量PCR仪,如ABI5700,ABI7700,ABI7000,ABI7300,ABI7500,MJ opticon,MJ opticon2,bio-rad ICycler,LightCycler1.5,roter-gene3000,

RT-PCR之我见

本文讨论的范围包括RNA酶保护分析,northernblot,原位杂交,半定量RT-PCR和定量RT-PCR。本文不谈具体protocol,是因为各种书籍和kit说明书上都有,主要说一些原则,而且大部分是失败和成功的经验,还有小组讨论结果以及各种书里七零八落看的内容,希望对大家有用。 基因

QPCR常见问题及其分析

一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400

如何选择合适的定量PCR仪?(二)

2.创新概念的离心式实时定量pcr仪为了克服平板式定量pcr温度均一性差的缺点,聪明的研究人员又开发出创新概念的离心式实时定量pcr仪,以roche罗氏的lightcycle和corbett的rotor-gene为代表。pcr扩增样品槽被巧妙地设计为离心转子的模样,借助空气加热和转子在腔内旋转,转子

南通市高分辨质谱仪等进口产品专家论证意见公示

   一、申请单位:南通市食品药品监督检验中心   二、产品名称:高分辨质谱仪、三重四极杆气质联用仪、高效液相色谱仪(电喷雾检测器)、超高效液相色谱仪、离子色谱质谱联用仪、实时荧光定量PCR仪   三、项目预算:850万元   四、论证专家意见:   (一)高分辨质谱仪  市场上主流质谱仪

一文读懂分子诊断常用技术

  基于分子构象的分子诊断技术  (一)变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)与单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)  1970~1980年间,Fischer等

ABI实时定量PCR常见问题

1.      定量PCR仪的开关机顺序是怎样的?    按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率。开机顺序:先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面

一文读懂分子诊断技术、PCR技术、基因测序技术

  四、定量PCR(quantitative PCR,qPCR)  相比于其他分子诊断检测技术,qPCR具有2项优势,即核酸扩增和检测在同一个封闭体系中通过荧光信号进行,杜绝了PCR后开盖处理所带来扩增产物的污染;同时通过动态监测荧光信号,可对低拷贝模板进行定量。正是由于上述技术优势,qPCR已经成

长知识了!新冠病毒2019-nCoV实验室检测内容全都在这里

  当下我国正处于新型冠状病毒2019-nCoV疫情发展阶段,该病毒感染主要会造成的新型的急性肺炎症状(WHO已将其名为NCOVID19),疫情已在全国范围内肆虐超过20天,对我国民生健康和经济造成极大影响。目前网上涌现多篇关于新型冠状病毒2019-nCoV实验室检测技术的文章,文章质量水平千差万别

3分钟了解新冠病毒检查哪些项目

  当下我国正处于新型冠状病毒2019-nCoV疫情发展阶段,该病毒感染主要会造成的新型的急性肺炎症状(WHO已将其名为NCOVID19),疫情已在全国范围内肆虐超过20天,对我国民生健康和经济造成极大影响。目前网上涌现多篇关于新型冠状病毒2019-nCoV实验室检测技术的文章,文章质量水平千差万别

新冠病毒检查哪些项目?这篇文章告诉你

  一、血液学检查  病毒感染相关的血液学检查主要包括血常规、血生化以及其他针对性的检测项目,相关指标为临床常用的病毒感染诊断指标,为疾病的辅助诊断提供依据。  1、血常规  血常规中的许多项具体指标都是一些常用的敏感指标,对机体内许多病理改变都有敏感反映,其中又以白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白和

实时定量PCR应用中的优化方案(二)

实践中的问题实时定量PCR已广泛地运用于分子生物学的各个领域,就目前的应用情况来看,虽然取得了很好的效果,但是其在方法学上的选择、敏感性问题、重复性问题等都一直是争论不休的,本文将就这些问题做出探讨。1. 方法的选择:研究者在实验中往往想要得到目的基因的绝对量,因为绝对定量对目的基因的表达差异有直接

基因表达之RT-PCR之我见

在论坛上看到不停地有人在问RT-PCR的问题,实际上在以前的帖子中各位香主和eeflying(我为什么总是提他们?因为还是很佩服的哦,生怕自己说错了,被他们指出来哦)都谈到了很多,鄙人也充大头答了一些问题,但是还是有各种问题,由于的基因表达还有点实战经验(但也技止此而),所以想些点东西给大家参考,计

Rotor-gene Q 一款独具创新的荧光定量PCR仪

荧光定量PCR检测在中国的应用已经有超过10年的历史,也是目前分子诊断领域最主要的技术方法。随着该项检测的广泛开展,临床对于检测的敏感性、重复性、通量和速度等都提出了更高的要求。作为该方法的重要检测平台,荧光定量PCR仪器也在不断推陈出新。过去的10年中,国内外先后有10多个品牌,推出了几十种型号的

定量PCR常见问题(二)

8.      什么是背景校正?多长时间执行一次背景校正?    背景校正程序测量定量PCR仪所使用的反应管和水的空白荧光强度。在运行校正程序期间,定量PCR仪在10分钟内连续读取背景校正板的荧光强度

盘点:分子诊断常用技术50年的沿革与进步

  一、基于分子杂交的分子诊断技术  上世纪60年代至80年代是分子杂交技术发展最为迅猛的20年,由于当时尚无法对样本中靶基因进行人为扩增,人们只能通过已知基因序列的探针对靶序列进行捕获检测。其中液相和固相杂交基础理论、探针固定包被技术与cDNA探针人工合成的出现,为基于分子杂交的体外诊断方法进行了

梯度PCR仪的概述

梯度PCR仪梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置,根据结果,一步就可以摸索出zui适反应条件。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR

梯度PCR仪的概述

梯度PCR仪梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置,根据结果,一步就可以摸索出zui适反应条件。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR

乙型肝炎病毒DNA定量检测临床应用的若干问题与思考

HBV DNA 检测技术目前已经在临床中普遍应用。但在实际工作中,不少临床医师对如何认识、评价和使用 HBV DNA 检测结果仍存在着一些困惑,甚至可能因认识不足、应用不当导致了错误的诊断和治疗。现就 HBV DNA 定量检测临床应用的基因诊断和临床治疗研究阐述如下。一、如何正确认识和评价 HBV

PCR Array——基因表达分析疾病和信号通路的利器(一)

以前只要提到基因表达分析,人们就会想到荧光定量PCR;只要提到高通量基因表达分析,人们会首先想到基因芯片。虽然荧光定量PCR仪几乎每个实验室都有,但是做芯片就不一定每个实验室都具备这个条件了。那么只有一台荧光定量PCR仪是否也能进行高通量的基因表达谱分析呢?QIAGEN 推出的RT2 Profile

Real-time qPCR手册---手把手教你从菜鸟到高手

3.3 SYBR@Green 法SYBR@Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料,与双链DNA结合后,其荧光大大增强。这一性质使其用于扩增产物的检测非常理想。SYBR@Green I 的最大吸收波长约为497nm,发射波长最大约为520nm。在PCR反应体系中,加入过量SYBR@Gre

百人杜文斌团队成功研制第三代微滴数字PCR

  数字PCR是一种用于绝对核酸定量检测方法,具有前所未有的准确度和精确度,是继实时荧光定量PCR技术之后的第三代核酸定量扩增检测技术,在液体活检、肿瘤伴随诊断、无创产前筛查、病原载量监测等方面具有重要应用前景,是科研和临床领域的平台级新技术。数字PCR市场主流产品主要为欧美跨国公司的高端仪器,在科

real-time/qPCR 常遇到的那些疑问

  通常来讲,real-time PCR( qPCR)的反应程序不需要像常规的 PCR 那样,要变性、退火、延伸 3 步。由于其产物长度在 80~150 bp 之间,所以只需要变性和退火就可以了。   SYBR@Green 等染料法,好在 PCR 扩增程序结束后,加一个溶解程序,来形成溶解曲

耶拿生命科学:新款PCR设计灵感来自中国客户

  ——访德国耶拿生命科学部中国区经理诸建  分析测试百科网讯 2016年10月10-12日,2016上海慕尼黑分析生化展(analytica China 2016)的生命科学展馆里,德国耶拿生命科学部门首次以独立展位亮相并推出了一系列生命科学新技术与新产品,如革命性的核酸纯化技术Smart Ext

李金明:解读个体化医学检测与实验室自建试剂方法

  个体化医学检测目前国内既有经CFDA批准的商品试剂,也有实验室自建试剂方法 , 但实验室对LDTs 、性能验证和性能确认等概念通常比较模糊,如何去做性能验证和性能确认,以及在什么情况下做,性能验证的合格判决断标准等,也不清楚。本文就上述方面谈一点个人的理解和思考。  个体化医学(personal