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TUNELassay

PROTOCOL:•Deparaffinize and rehydrate slides:3 x 3´ Xylene3 x 2´ 100% ethanol1 x 2´ 95%, 80%, 70% ethanol (each)1 x 5´ 1x PBS•Microwave antigen retrieval:4 x 5´ in microwave (600 ml of 10mM NaCitrate, pH 6)Cool 20´. Wash 3 x 5´ in water. Wash 1 x 5´ in 1x PBS (Phosphate-Buffered Saline).•Shake off/wipe off excess PBS and circle all sections with ImmunoEdge or PAP pen.•Block 10 minutes in Equilibration Buffer at room ......阅读全文

凋亡聚焦:选择合适的TUNEL分析

  DNA 片段化是凋亡的一个重要特点。提起DNA片段化的检测,大家自然会联想到TUNEL。TUNEL的全称为Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,即脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)介导的缺口末端

Caspase活化、核染色质固缩及DNA片段化

Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础,具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证,包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选,能够实现各种细胞功能的分析:细胞活性和细胞毒性细胞增殖和细胞周期细胞凋亡自噬氧化应激内吞

凋亡细胞核DNA片段检测方法进展(二)

2.3 凋亡细胞的TUNEL和ISNT鉴定的流式细胞仪分析[16]对于培养的细胞,可以将TUNEL或ISNT鉴定同流式细胞仪结合起来分析其发生凋亡的情况。待检细胞与含有TdT或DNA聚合酶I或Klenow片段及生物素标记的dUTP反应液共孵育一段时间后,加入荧光素(常用FITC)标记的链霉抗生物

流式细胞术定量检测细胞凋亡3种方法的比较研究

细胞凋亡的定性检测依赖于形态学观察及DNA电泳,其定量检测则需借助于流式细胞检查。使用碘化丙啶(PI)染色检测DNA含量是最早出现的凋亡定量检测方法[1]。进入90年代,检测DNA断裂点的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU

流式细胞术定量检测细胞凋亡的3种方法研究比较

细胞凋亡的定性检测依赖于形态学观察及DNA电泳,其定量检测则需借助于流式细胞检查。使用碘化丙啶(PI)染色检测DNA含量是最早出现的凋亡定量检测方法[1]。进入90年代,检测DNA断裂点的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU

凋亡聚焦:选择合适的TUNEL分析

  考虑检测方法   TUNEL分析一般采用显色法或荧光检测法。每一种都有其各自的优缺点,因此选择哪一种取决于您的需求。荧光检测感更为灵敏,但难以保留信号。由于成像时的光漂白,且随着时间的流逝,荧光信号会逐渐丧失。荧光信号也会有更高的背景问题,这要取决于组织类型。显色分析适用于组织切片,因为可以使

六种染色后光镜观察法检测肝癌细胞凋亡

作者:杨连君,司晓辉,王文亮,王文勇,赵一岭,方正清[摘  要] 目的:探讨简便易行的在光镜下通过形态学观察检测细胞凋亡的方法,并对其进行比较。方法:首先用6%的乙醇作用6 h诱导人肝细胞癌细胞系HCC9204细胞凋亡,然后进行未固定细胞的台盼蓝染色、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染色,

细胞凋亡的免疫检测技术-1

一、概述 细胞凋亡(apoptosis,Apo)是细胞增殖的反面,探讨的是细胞死亡的方式与机制。凋亡一词来源于希腊语。原指花瓣、叶片的脱落。自1972年Kerr首次提出细胞凋亡的概念以来,随着细胞生物学、免疫学和肿瘤学的研究发展,最近几年人们对细胞凋亡的重大理论意义和实际意义有了更深的理解。细胞

Guide to Cell Proliferation and Apoptosis Methods

Chapter 1: Cell Death - Apoptosis and Necrosis1.1Introduction21.1.1Terminology of cell death21.1.2Differences between necrosis and apoptosis31.1.3Apop

细胞凋亡检测(Annexin-V-FITC 单染法)-2

2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA 特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA 的A

DNA Ladder的测定方法是怎么一回事?

  不同细胞不同状态是有不同死法的,具体是细胞凋亡、坏死、还是程序性坏死,需要进一步排查分析来确定。而细胞凋亡是个复杂的过程,针对凋亡时期不同,检测的方法有所不同。那如何去确定哪条途径被触发,在哪个步骤被阻断,以及抑制剂是否能够抑制呢?下面介绍几种常用的测定方法。  一:细胞凋亡的形态学检测  发生

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤介绍

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。   第一种 细胞凋亡的形态学检测   根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  

细胞凋亡检测方法

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测  根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  1 光学显微镜和倒

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤(二)

第三种 线粒体膜势能的检测 线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆

细胞凋亡检测方法总览(早期检测、晚期检测和mRNA水平)

细胞凋亡的检测方法,从大类上还可以分为早期检测、晚期检测和mRNA水平的检测。一、早期检测1、PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测2、细胞内氧化还原状态改变的检测3、细胞色素C的定位检测4、线粒体膜电位变化的检测二、 晚期检测1、TUNEL2、LM-PCR Ladder (连接介导的PCR检测)当

A rapid, quantitative and inexpensive method for detecting apoptosis

ASTRACTWe describe a rapid and quantitative flow cytometric method for determining the apoptotic or anti-apoptotic potential of a gene in various cell

检测细胞凋亡的实验方法比较-3

◆ 细胞坏死与细胞凋亡细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。 一、细胞凋亡的形态学检测   根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞

细胞凋亡检测-Caspase半胱氨酸蛋白酶与磷脂酰丝氨酸

细胞凋亡检测-Caspase半胱氨酸蛋白酶与磷脂酰丝氨酸(PS) 细胞凋亡(apoptosis)指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。 1965年澳大利亚科学家发现,结扎鼠门静脉后,电镜观察到肝实质组织中有一些散在的死亡细胞,这些细胞的溶酶体并未被破坏,显然不同于

细胞凋亡检测方法简介

细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分

细胞凋亡检测方法介绍

细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分

A rapid, quantitative and inexpensive method for detecting apoptosis-2

Figure 1.Determination of apoptosis in transiently transfected murine [beta] tumor cells. (A) The number of apoptotic [beta]HC 13T tumor cells (%

检测细胞凋亡的实验方法比较

◆ TUNEL 与 ELISA 检测凋亡的方法比较TUNEL法   细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3

凋亡细胞核DNA片段检测方法进展(一)

摘  要:当今生物学领域的研究一个热点之一是细胞凋亡。开展对细胞凋亡的研究,首先要解决是方法学问题。作者从凋亡细胞的特征性核DNA片段检测着手,阐述了多种凋亡细胞核DNA片段检测方法以及近年来的一些新进展。细胞凋亡(apoptosis)又称细胞凋谢或称程序性细胞死亡(Programmed

用流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas

流式细胞仪在细胞凋亡检测应用

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪 检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。下面是一幅凋亡过程图。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体

用流式细胞仪检测细胞凋亡

  细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰

凋亡细胞核DNA片段检测方法进展

细胞凋亡(apoptosis)又称细胞凋谢或称程序性细胞死亡(Programmed cell death,PCD),是有别于细胞坏死而受基因控制的一种主动性细胞自杀过程。对细胞凋亡的研究已成为当今生物学领域的热点之一。开展对细胞凋亡的研究,首先要解决的是方法学问题。根据凋亡细胞的生化特征检测组织或培

流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas

常用细胞凋亡检测方法(图)

一、细胞凋亡的形态学检测1、光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋

Detection of apoptotic process in situ using immunocytochemical

1. INTRODUCTION  Apoptosis was observed from invertebrates to lower and higher verterbrates, and intervenes both in physiological and in pat