霉菌的杂交育种

准性生殖是一种类似于有性生殖但比它更原始的一种生殖方式。它可使同一种生物的两个不同来源的体细胞经融合后,不经过减数分裂,不产生有性孢子,仅通过低频率的基因重组并产生重组体细胞。(1)菌丝联结 常发生在一些形态上没有区别但在遗传性上却有差别的同一菌种的两个体细胞(单倍体)间,发生联结的频率极低。(2)形成异核体两个体细胞经联结后,细胞核由一根菌丝进入另一根菌丝,使原有的两个单倍体核集中到同一个细胞中,于是就形成了双核的异核体,异核体能独立生活。(3)形成杂合二倍体异核体的两个不同遗传性状的细胞核融合在一起,产生杂合二倍体。杂合二倍体的DNA含量约为单倍体的二倍.孢子体积约比单倍体孢子大一倍,其他一些性状也有明显区别。杂合二倍体相当稳定。核融合后产生杂合二倍体的频率也是极低的,如构巢曲霉(Aspergillus nidulans)和米曲霉(A.oryzae)为10-7~10 -5某些理化因素如樟脑......阅读全文

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

分子杂交技术Northern杂交的简介

  Northern杂交与Southern杂交很相似。主要区别是被检测对象为RNA,其电泳在变性条件下进行,以去除RNA中的二级结构,保证RNA完全按分子大小分离。变性电泳主要有3种:乙二醛变性电泳、甲醛变性电泳和羟甲基汞变性电泳。电泳后的琼脂糖凝胶用与Southern转移相同的方法将RNA转移到硝

southern杂交与northern杂交的区别

研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA。Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上。

体细胞杂交的杂交实验

不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合,所产生的杂种细胞,即异核体经过培养可再生新壁,分裂形成愈伤组织,进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞,故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组,因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究

southern杂交与northern杂交的区别

研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA。Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上。

杂交育种的杂交方式介绍

单杂交即两个品种间的杂交(单交)用甲×乙表示,其杂种后代称为单交种,由于简单易行、经济,所以生产上应用最广,一般主要是利用杂种第一代。复合杂交即用两个以上的品种、经两次以上杂交的育种方法。如果单交不能实现育种所期待的性状要求时,往往采用复合杂交,其目的在于创造一些具有丰富遗传基础的杂种原始群体,才可

杂交育种的杂交类型介绍

品种内杂交同一品种不同生态型间的杂交。品种间杂交(种内杂交)品种间杂交是指两个遗传基础不同的品种间、自交系间、自交不亲和系间或雄性不育系与恢复系间的杂交。种间杂交(属内杂交)同一属不同物种间的杂交。渐渗杂交将一些基因从一个物种转移到另一个物种的基因组中被称为“渐渗杂交”  。同一属或同一科不同属的不

细胞杂交

            实验材料 PEG 试剂、试剂盒 完全培养基 无血清培养基 NaOH

细胞杂交

在悬浮或单层培养细胞体系中融合细胞,用 PEG 处理细胞的时间应很短,以减少细胞的死亡。通常,在使用选择性培养基前,需给细胞 24 h 的恢复期。实验材料PEG试剂、试剂盒完全培养基无血清培养基NaOH仪器、耗材皮氏培养皿通用容器实验步骤PEG 1000 ( Merck):(a) 髙压处理PEG,将

隔离杂交

将父、母本按一定行比种植在隔离区内,并将母本雄穗全部拔去,使其自由授粉,这种人工杂交方式,称为隔离杂交。选择自交系用来杂交的两个自交系,应该是经过测交,证实其第一子代的杂种优势明显,属于优良杂交组合。玉米自交系可向当地生产部门购买。播种父、母本在一块地里按2行母本1行父本的行比相间种植,其四周至少5

Southen杂交

Southern杂交One important thing for transfer:the weight of the object resting on top of the blotting apparatus should not exceed the weight equal to a 5

Northern杂交

Northern杂交1.在10~20 ml 预杂交液中68℃温育膜2h。2.若使用双链探针,在100℃下加热32P标记的双链DNA 5 min,使之变性,然后迅速移至冰水中冷却。3.把变性的或单链放射性标记的探针直接加到预杂交液中,在合适的温度下继续温育12~16h。4.杂交后,将膜从塑料袋中取出,

Northern杂交

实验方法原理 转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交,从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异,可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后,在适于探针和固定的靶 RNA 杂交的条件下将膜同探针孵育,而后广泛洗

细胞杂交

            实验材料 PEG 试剂、试剂盒 完全培养基 无血清培养基 NaOH

Northern杂交

            实验方法原理 转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交,从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异,可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后,在适于探针和固定的

Southern杂交

实验概要本实验介绍了Southern杂交的基本流程。主要试剂细菌基因组DNA抽提试剂盒,限制性内切酶,变性溶液,中和溶液,10 X SSC,杂交缓冲液(200mM磷酸钠缓冲液,PH7.2,1 mM EDTA,50%甲酞胺,1% BSA,7% SDS),随机引物标记试剂盒,洗脱缓冲液(2 X SSC,

分子杂交

一、杂交通过碱基对之间非共价键(主要是氢键)的形成即出现稳定的双链区,这是核酸分子杂交的基础。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补,所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序(即某种程度的同源性)就可以形成杂交双链。分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的

Northern杂交

转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交,从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异,可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后,在适于探针和固定的靶 RNA 杂交的条件下将膜同探针孵育,而后广泛洗膜以去除非特异结合的探针,

Western杂交

Western杂交l      组织印迹的Western杂交在硝酸纤维素膜上制备组织印迹1.在塑料板上放置两层Whatman 1号滤纸,在滤纸上方放上一张普通纸,然后铺上一层硝酸纤维素膜。2.用双面刀片从植物组织如大豆的茎上切取一块切片(厚度约为1mm)。如果组织表面是湿的,则在Kimwipes纸上

Northern杂交

实验概要本实验介绍了Northern杂交的基本流程。主要试剂液氮,TRIzol  (Invitrogen),DEPC水,氯仿,异丙醇,70%酒精,酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),水饱和酚(PH4.3),无水乙醇,NaOAc,抽提缓冲液(0.02M  NaOAc,1 mM EDTA,0.5% SD

Southern杂交

   Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤:  (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。   (2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。   (3) 预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性

Western-杂交

Western 杂交(主要内容如下)Preparing of Protein LysatesWestern BlottingFar Western BlottingSemi Dry BlottingStripping MembranesTrouble Shooting and OthersPrepa

Western杂交

实验概要本实验介绍了Western杂交的基本流程。主要试剂液氮,提取缓冲液(1 x PBS,10ug/mL  Leupeptin,1 mM PMSF,5 mMBenzamidine. 2mM EDTA),转移缓冲液(39mM Glycine,48mM  Tris,0.037% SDS,20%甲醇),

Western杂交

实验概要本实验介绍了Western杂交的基本流程。主要试剂液氮,提取缓冲液(1 x PBS,10ug/mL  Leupeptin,1 mM PMSF,5 mMBenzamidine. 2mM EDTA),转移缓冲液(39mM Glycine,48mM  Tris,0.037% SDS,20%甲醇),

分子杂交技术Southern杂交的相关介绍

  Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤:  (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。  (2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。  (3)预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。 

分子杂交技术Northern杂交的操作步骤

  (1)RNA经变性电泳完毕后,可立即将乙醛酰RNA转移至硝酸纤维素滤膜上。转移方法与转移DNA的方法相似。  (2)转移完毕后 ,以6×SSC溶液于室温浸泡此膜5分钟,以除去琼脂糖碎片。  (3)将该杂交膜夹于两张滤纸中间,用真空烤箱于80℃干燥0.5-2小时。  (4) 用下列两种溶液之一进行

分子杂交技术Southern杂交的操作步骤

  (1) 约50μl体积中酶切10pg-10μg的DNA, 然后在琼脂糖凝胶中电泳12-24小时(包括DNA分子量标准物)。  (2) 500ml水中加入25μl 10mg/ml溴化乙锭,将凝胶放置其中染色30分钟, 然后照相。  (3) 依次用下列溶液处理凝胶,并轻微摇动: 500ml 0.2m

关于Southern杂交的预杂交的介绍

  将固定于膜上的DNA片段与探针进行杂交之前,必须先进行一个预杂交的过程。因为能结合DNA片段的膜同样能够结合探针DNA,在进行杂交前,必须将膜上所有能与DNA结合的位点全部封闭,这就是预杂交的目的。预杂交是将转印后的滤膜置于一个浸泡在水浴摇床的封闭塑料袋中进行,袋中装有预杂交液,使预杂交液不断在