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IL2生物学活性检测(MTT)原理材料和方法

(一)原理白细胞介素-2(IL-2)是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子,具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检测。本实验采用MTT分析法,通过测定CTLL-2细胞的增殖量,确定IL-2生物学活性单位。检测IL-2的生物学活性,可以间接了解辅助性T细胞的功能。(二)材料(1)1)10%FCS-RPMI-1640培养液,含2mmol/L谷氨酰胺、25mmol/LHEPES、10U/ml青霉素、100ug/ml链霉素。(2)MTT(4,5-dimethythiazoyl-zyl2,5-diphenylterrajolium bromiole)用PBSA缓冲液配制成1mg/ml浓度工作液,4℃避光保存。(3)IL-2标准品。(4)PHA(200ug/ml)。(三) 方法(1)人外周血T细胞分泌IL-2的诱生:①人PBMC分离:采用常规淋巴细胞分层液浓度梯度......阅读全文

IL-2生物学活性检测(MTT)原理材料和方法

(一)原理白细胞介素-2(IL-2)是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子,具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检测。本实验采用MTT分析法,通过测定CTLL-2细胞的增殖量,确定IL-2生物学活性单位。检测IL-2的生物

IL-2生物学活性检测实验

白细胞介素-2(IL-2)是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子,具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检测。本实验采用MTT分析法,通过测定CTLL-2细胞的增殖量,确定IL-2生物学活性单位。检测IL-2的生物学活性,可

IL-2生物学活性检测实验

实验方法原理实验材料 人外周血T细胞试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 一、人外周血T细胞分泌IL-2的诱生1.  人PBMC分离:采用常规淋巴细胞分层液浓度梯度离心法分离PBMC,用10%FC

IL-4生物学活性检测

实验材料 IL-4诱生试剂、试剂盒 生理盐水淋巴细胞分层液FCS-IMDM培养液PHA仪器、耗材 细胞培养板培养箱实验步骤 一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲

IL-10生物学活性检测

实验材料 小鼠IL-4试剂、试剂盒 FCS-IMDM培养液rh IL-10标准品3H-TdR仪器、耗材 离心机培养箱实验步骤 D36细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的IL-10的活性单位⑥

IL-1生物学活性检测

实验方法原理 IL-1与小鼠胸腺细胞共同培养时,IL-1可刺激小鼠胸腺细胞增殖。进一步通过3H-TdR掺入法或染料摄入法判定小鼠胸腺细胞增殖量,推定IL-1的生物学活性。通过检测IL-1的生物学活性,可了解单核-巨噬细胞等的功能。实验材料 小鼠胸腺细胞试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液L

IL-8生物学活性检测

(一)原理IL-8对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。 (二)材料 (1)6%右旋糖酐生理盐水溶液。 (2)淋巴细胞分层液比重为1.077+(-)0.001。 (3)2%琼脂糖:称取2g琼脂糖,加入到10

IL-4生物学活性检测实验

实验材料IL-4诱生试剂、试剂盒生理盐水淋巴细胞分层液FCS-IMDM培养液PHA仪器、耗材细胞培养板培养箱实验步骤一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算

IL-10生物学活性检测实验

实验材料小鼠IL-4试剂、试剂盒FCS-IMDM培养液rh IL-10标准品3H-TdR仪器、耗材离心机培养箱实验步骤D36细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的IL-10的活性单位⑥展开&n

IL-8生物学活性检测实验

IL-8中对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。实验材料IL-8的诱生试剂、试剂盒右旋糖酐生理盐水琼脂糖淋巴细胞分层液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液仪器、耗材洁净载玻片打孔器离心机培养箱实验步骤一、IL-