TRIzol有无毒性

TRIzol有毒性,trizol中含有苯酚,苯酚是刺激性气味。对呼吸道有伤害,闻久了会有晕的感觉。1、TRIZOL的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。2、苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase(RNA酶)。......阅读全文

TRIzol-Prep

Procedure1.  Homogenize cells (10 million) or tissue (50-100 mg) in 1 mL TRIzol Reagent (e.g. scrape and pass through 30G needle, dounce homogenize an

TRIzol-RNA提取方法

(一)试剂准备1.TRIzol试剂。2.氯仿3.异丙醇4.75%乙醇(DEPC H2O配制)5.DEPC H2O(二)操作步骤1. 样品处理:(1)培养细胞:收获细胞1-5×107,移入1.5ml离心管中,加入1ml Trizol,混匀,室温静置5min。(2)组织:取50-100mg组织(新鲜或-

TRIzol-RNA提取方法

研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。TRIzol RNA提取方法:(1)操作简单的,提取方便,回收率高; (2)提取的RNA的质量高,对cDNA库,RT-PCR和Northern Blot等分子生物学实验起着很重要的影响。实验方法原理Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,采

TRIzol-RNA提取方法

            实验方法原理 Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,采用变性剂即内含异硫氰酸胍酚和β-巯基乙醇等变性物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶。异硫氰酸胍属于解偶剂,是一类强力的蛋白质变性剂,可溶解蛋白质,并使蛋白质二级结构消失,细胞结构

RNA-extraction-using-trizol/tri

RNA extraction with TRIzol (Invitrogen product name) or the equivalent TRI (Sigma-Aldrich product name) is a common method of total RNA extraction fro

使用-Trizol-纯化-RNA-实验

实验材料 磨细的组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇,75%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水配制DEPC 处理过的水2. 细胞和组织50~100 mg 已磨细的组织二、方法1

使用-Trizol-纯化-RNA-实验

            实验材料 磨细的组织 试剂、试剂盒 Trizol 氯仿 异丙醇 乙醇

使用-Trizol-纯化-RNA-实验

RNA 分离的酚基试剂的生产以 Chomczynski 方案为基础。这些方案在从富含 RNA 酶的组织如胰腺中获取 RNA 时最有用。这里介绍的是随 Invitrogen 的 Trizol 试剂出售的方案的摘要,经 Invitrogen 允许做了修改。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:

TRIZOL提取注意事项

警告: 有毒物接触皮肤或者不慎吞服。会导致灼伤。一旦接触皮肤后立即以大量的洗涤剂和清水清洗。若感不适,看医生并寻求苯酚和其他成分(JTSRN 80100437-5000p)的正确治疗方案。)  TRIZOL在室温下能稳定保存12个月。尽管如此,为达到最佳效果,我们建议保存在2—8°C的环境下。一般描

总RNA提取(Trizol提取)

在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase 的作用。1. 提取组织RNA 时,每50~100mg 组织用1ml

DNA抽提指南(TRIZOL)

按照RNA 分离操作方案在完全移去水样层后,匀浆中的DNA 存在于中间层和苯酚层中也可以被分离出来。在沉淀和多次洗脱后,DNA 溶解在8 mM NaOH中。用TRIZOL试剂从组织和培养细胞中完全回收的DNA 可以用来做样品中DNA 含量的测定。同时抽提的基因组DNA 可以用于对Northern a

蛋白抽提指南(TRIZOL)

在用酒精沉淀出DNA(DNA抽提中的步骤一)后剩余的苯酚—乙醇上清中可以抽提出蛋白。沉淀的蛋白可通过蛋白[质]印迹法对样品中某一特殊的蛋白质进行分析。试剂所需,但没有随同提供的物品:* 异丙醇* 0.3M盐酸胍(用95%酒精配制)* 无水乙醇* 1% SDS1.蛋白质的沉淀用异丙醇从苯酚—乙醇上清中

TRIzol有无毒性

TRIzol有毒性,trizol中含有苯酚,苯酚是刺激性气味。对呼吸道有伤害,闻久了会有晕的感觉。1、TRIZOL的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。2、苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰

TRIZOL提取注意事项3

3.台式离心机最大能达到2,600×g的离心力,如果将离心时间延长到30-60分钟可以满足步骤2和步骤3中的操作。疑难解答:RNA抽提每1 mg组织或1×106培养细胞预期的RNA产量1.肝和脾,6—10μg2.肾,3—4μg3.骨骼肌和脑组织,1—1.5μg4.胎盘,1-4μg5.上皮细胞(1×1

TRIZOL提取注意事项2

实验所需但试剂未提供的物品:* 氯仿 *异丙醇* 75%乙醇(用DEPC处理过的水配制)*无RNA酶的水或0.5% SDS溶液[配无RNA酶的水,将水加入无RNA酶的玻璃瓶中,加入DEPC至0.01% (v/v)。放置过夜并高压灭菌。SDS溶液必须用DEPC处理过并经高压灭菌的水配制。]1.匀浆化作

RNA抽提指南(TRIZOL法)

RNA抽提指南(TRIZOL法)注意事项:* 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌,可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。* 使用灭菌的,一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA,避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。例如,使用RNA探针的实验室

TRIZOL提取RNA的详细步骤

1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞。2、将组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟;在EP管中,

采用Trizol-溶液提取细菌总RNA

实验概要了解用Trizol 溶液提取细菌总 RNA的方法。实验原理Trizol主要物质是异硫氰酸胍,它可以破坏细胞使RNA释放出来的同时,保护RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA  可以通过异丙醇沉淀来还原。无论是人、动物、植物还

Trizol法提取总RNA的原理

Trizol试剂的主要成分是苯/酚。苯/酚的主要作用是对细胞进行裂解,从而使细胞当中的蛋白质以及核酸物质解聚而得以释放。苯/酚虽然可以有效的使蛋白质变性,但它不能完全抑制RNA酶的活性,因此Trizol中还加入了8-羟基喹/啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase(即RNA酶)。Tr

总RNA的提取(Trizol法提取)

在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase的作用。1.      提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml

Trizol法提取总RNA的纯化要求

1.纯化后不应存在对酶(如逆转录酶)有抑制作用的物质。2.排除有机溶剂和金属离子的污染。3.蛋白质、多糖和脂类分子等的污染降到最低程度。4.排除DNA分子的污染。

trizol试剂提取细胞内总RNA

最好在4度下离心。因为在4度下,RNA酶的活性低,总RNA降解的也就越少。在常温下离心RNA比4度更容易降解。

TRIzol影响实验结果?miRNA文章被撤回

  韩国首尔大学的科学家Narry Kim(金娜蕊)及其研究小组近日撤回了一篇关于microRNA(miRNA)衰减的文章,因为她们发现,所用的TRIzol试剂会对富含GC的miRNA或具二级结构的miRNA产生不同影响。   这篇文章去年发表于《Molecular Cell》杂志上。研究

实验室检验检测工具TRIZOL

TRIZOL是一种新型总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。TRIZOL的主要成分是苯酚。TRIZOL在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性,因此对纯化RNA及标准化RNA的生产十分有用。TRIZOL的主要成分是苯

TRIzol-RNA提取试剂盒操作说明

TRIzol RNA提取试剂盒是由GIBCO BRL公司推出专供提取RNA的产品,其操作方便、快捷。 在TRIzol中,RNA是隔离在RNA酶污染之外的。而对样品的后续操作会要求用无RNA 酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。玻璃器皿可以在150°C 的烘箱中烘烤4小时。塑料器皿可以在0.

不用Trizol裂解细胞提取RNA的方法

1、方法一试剂:(1)变性液组成:25 g异硫氰酸胍溶于33 ml CSB中(42 mmol/L pH4.0乙酸钠、0.83%十二烷基肌氨酸钠、0.2 mmol/L β-巯基乙醇),65 ℃溶解,过滤灭菌,4 ℃预冷。(2)酸性酚配制:55 ℃时,500 g酚溶入500 ml 50 mmol/L,p

TRIzol法提取组织和细胞总RNA

(一)试剂准备1 . TRIzol 试剂。2 .氯仿3 .异丙醇4 . 75% 乙醇( DEPC H2O 配制)5 . DEPC H2O (二)操作步骤 1 . 样品处理: (1)培养细胞:收获细胞 1-5×10 7 ,移入 1.5ml 离心管中,加入 1ml Trizol ,混匀,室温

动物RNA提取实验——Trizol试剂提取法

实验方法原理Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙醇沉淀水相中的RNA,并用70

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态N2NaCl柠檬酸钠仪器、耗材 转子-定子均化器研钵和杵圆锥形管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇,70%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水配制DEPC 处

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

            实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Trizol 氯仿 异丙醇 乙醇