骨源性碱性磷酸酶的测定及注意事项

血浆中骨源性碱性磷酸酶(BAP)活性测定,首先是血球和血浆的分离,这一过程是基于全血样品经血浆分离器将血球截留在分离器的血球容纳膜上,而血浆渗滤穿过转运膜到达反应膜的特定区域,血浆分离完成后,将血浆分离器从反应装置上取下。 第二步是BAP与血浆中其它组分,包括其它来源的碱性磷酸酶(ALP)分离达到特异测定BAP的目的。这一目的实现是根据小儿型BAP(NBAP)和成人BAP(ABAP)分子结构中糖基类型的不同,分别选择相应的亲和素,我们可称之为NBAP-结合蛋白和ABAP-结合蛋白,预先固相在反应膜的特定区域—反应区上。当血浆经过此区域渗滤时,BAP即被结合,而其它组成滤过或被滴加的洗涤液清洗掉,从而完成特异性亲和反应。 第三步方可进行BAP的活性测定显色反应。反应膜固定在反应滑板上,待亲和反应完成后,将反应滑板推动,使反应膜到达反应孔正中,将显色液滴加到反应孔内的反应膜上,在37℃反应一定时间,酶促反应显色的深浅与BAP......阅读全文

碱性磷酸酶的测定实验_细菌碱性磷酸酶

实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HCl磷酸硝基苯仪器、耗材分光光度计实验步骤实验混合物25℃ 时,于 405 nm 处吸收值降低,ε405=18.5×103 l/(mol·cm)。

碱性磷酸酶的测定实验_哺乳动物碱性磷酸酶

正磷酸单酯磷酸水解酶(最适碱度)。正磷酸单酯+H2O → 醇+Pi这个酶可以从各种渠道得来,如细菌和哺乳动物肠黏膜。每个酶分子有两个 Zn2+离子键。碱性的磷酸酶频繁地与抗体配位,例如在 Westernblots 中及酶联免疫鉴定(ELISA)中。细菌酶的最适 pH 是 8.0,哺乳动物的要较高一点

DAB显色,碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶显色原理是什么?

DAB显色在辣根过氧化物酶的作用能形成一种灰褐色的终末产物,该产物难溶于醇和其他有机溶剂,DAB的氧化还能引起聚合作用,导致与四氧化锇反应而增加其染色强度和电子密度。

碱性磷酸酶生化检验

  碱性磷酸酶检验参考范围及临床意义:  英文缩写:ALP;  正常参考值:30-115IU/L ;  医|学教育网临床意义:增高常见于肝癌,肝硬化,阻塞性黄疸,急慢性黄疸型肝炎,骨细胞瘤,骨折及少年儿童。

碱性磷酸酶生化检验

 碱性磷酸酶检验参考范围及临床意义:   英文缩写:ALP;   正常参考值:30-115IU/L ;   医|学教育网临床意义:增高常见于肝癌,肝硬化,阻塞性黄疸,急慢性黄疸型肝炎,骨细胞瘤,骨折及少年儿童。

碱性磷酸酶的测定

实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 甘氨酸-KOH对磷酸硝基苯仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.02 ml 酶样品25 ℃ 时于 405 nm 处吸收值降低,ε405=18.5×103 l/(mol·cm)。注意事项 其他 试剂:0.1 mol/L 甘氨酸

碱性磷酸酶标记试剂

BCIP/T是碱性磷酸酶最常使用的呈色底物,碱性磷酸酶标记的试剂应该用真核生物的碱性磷酸酶,因为这种酶容易被EDTA灭活。细菌酶难以终止其活性,易引起显色过度,导致较高背景。 BCIP/T底物在酶结合位点形成强烈的黑紫色沉淀,此反应是一个稳定进行的过程。因此,可设定一个精确的反应对照。可以

碱性磷酸酶染色实验

实验方法原理细胞组织中的碱性磷酸酶在碱性(PH9.0-9.6)环境下使作用液中的底物(a一磷酸萘酚钠)水解,产生出a萘酚,然后再与偶氮盐偶联,生成不溶性的耐晒染料(最终产物的颜色因所用偶氮盐的品种不同而有所不同).试剂、试剂盒磷酸萘酚钠偶氮盐丙二醇实验步骤一、实验试剂:底物作用液的配制:α-磷酸萘酚

碱性磷酸酶的简介

  碱性磷酸酶(ALP或AKP)是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。但它不是单一的酶,而是一组同功酶。目前已发现有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5与A

碱性磷酸酶染色实验

实验方法原理 细胞组织中的碱性磷酸酶在碱性(PH9.0-9.6)环境下使作用液中的底物(a一磷酸萘酚钠)水解,产生出a萘酚,然后再与偶氮盐偶联,生成不溶性的耐晒染料(最终产物的颜色因所用偶氮盐的品种不同而有所不同).试剂、试剂盒 磷酸萘酚钠偶氮盐丙二醇实验步骤 一、实验试剂:底物作用液的配制:α-磷

细胞碱性磷酸酶染色

实验概要细胞碱性磷酸酶染色实验原理胚胎干细胞中碱性磷酸酶的活性比较高, 5-溴-4-氯-3吲哚-磷酸盐(BCIP)能被碱性磷酸酶水解,形成一个中间体,这个中间体能与氯化硝基四氮唑蓝,也称氮蓝四唑(NBT)反应生成白色的中间二聚体和NBT-蓝紫色结晶物。通过染色结果可以相对得知碱性磷酸酶的活性,进

碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化染色技术

实验方法原理APAAP(Alkaline phosphatase-anti-alkaline phosphatase technique)技术的基本原理为:抗鼠IgG抗体作为桥梁,将鼠源性识别细胞抗原的第一抗体与鼠源性的抗碱性磷酸酶单克隆抗体-碱性磷酸酶复合物相连接,使之成为Ag,-Ab1-Ab2-

免疫碱性磷酸酶组织化学实验——间接免疫碱性磷酸酶法

免疫碱性磷酸酶组织化学技术是以碱性磷酸酶(AKP 或 AP)取代 HRP 来显示结果的免疫酶组织化学技术。最早出现的是间接免疫碱性磷酸酶法(IAP),1983 年 Mason 及 Moir 等建立了碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)复合物法。随后,人们建立了更为敏感的生物素-亲和素-碱性磷酸酶复合

碱性磷酸酶染色的原理

  人血液和造血细胞的碱性磷酸酶pH值为9.4,主要见于中性粒细胞系的成熟阶段或晚幼粒细胞。在不同生理状态和病理状态中均有明显的改变,具有鉴别诊断意义。

碱性磷酸酶的测定实验

哺乳动物碱性磷酸酶 细菌碱性磷酸酶             实验方法原理 实验材料 酶样品

碱性磷酸酶染色的原理

  (偶氮偶联法):血细胞内的碱性磷酸酶在pH9.4~9.6的条件下将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解,产生α-萘酚与重氮盐偶联形成不溶性灰黑色沉淀,定位于酶活性所在之处。

血清碱性磷酸酶的试剂

①0.1mol/L碳酸盐缓冲液(pH10.0):称取无水碳酸钠6.36g,碳酸氢钠3.36g,4-氨基安替比林1.5g,溶于800ml蒸馏水中,移入1000ml容量瓶内,加蒸馏水至刻度,置棕色瓶内保存。②20mmol/L磷酸苯二钠溶液:称取磷酸苯二钠(AR)2.18g,迅速加入已煮沸的500ml蒸馏

关于碱性磷酸酶的简介

  碱性磷酸酶(ALP或AKP)是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。但它不是单一的酶,而是一组同工酶 。目前已发现有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5与

碱性磷酸酶的染色检测

实验概要了解碱性磷酸酶的染色检测方法。实验原理本试验是一个酶组织化学试验,酶组织化学是在不破坏组织细胞的条件下,检测酶的存在,定位与活性的学科,即在酶的存在,分布及其用在显微镜下变成可见的。生命是有序的,包括时间的有序及其空间的有序。其中美的空间有序性在于其细胞组织结构的精确位置,各种酶的自己的位置

碱性磷酸酶检测的临床应用

ALP早在本世纪30年代就用于临床,是临床医师非常熟悉的酶之一,在70年代前ALP是世界上临床测定次数最多的酶,主要用于骨骼和肝胆系统疾病的诊断和临床鉴别诊断,可参见下表:ALP和骨化过程密切相关,很多骨骼疾病如变形性骨炎(Paget病)、副甲状旁腺功能亢进、佝偻病、软骨症、原发性和继发性骨肿瘤、骨

什么是血清碱性磷酸酶(ALP)

  碱性磷酸酶(ALP)属磷酸单酯水解酶,是一组特异的磷酸酯酶。该酶广泛分布于人体组织和体液,以骨、肝、乳腺、小肠、肾中含量较高,其大部分由骨细胞产生,小部分来自肝,经胆汁排入肠道。ALP测定方法主要是比色法和连续监测法。

碱性磷酸酶检验临床意义

正常参考值:20-110U/L临床意义:增高:常见于肝癌,肝硬化,阻塞性黄疸,急慢性黄疸型肝炎,骨细胞瘤,骨折及少年儿童。

关于血清碱性磷酸酶的简介

  碱性磷酸酶(ALP)属磷酸单酯水解酶,是一组特异的磷酸酯酶。该酶广泛分布于人体组织和体液,以骨、肝、乳腺、小肠、肾中含量较高,其大部分由骨细胞产生,小部分来自肝,经胆汁排入肠道。ALP测定方法主要是比色法和连续监测法。

碱性磷酸酶的临床意义

  临床上测定ALP主要用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断,尤其是黄疸的鉴别诊断。对于不明原因的高ALP血清水平,可测定同工酶以协助明确其器官来源。  1.生理性增高  儿童在生理性的骨骼发育期,碱性磷酸酶活力可比正常人高1~2倍。处于生长期的青少年,以及孕妇和进食脂肪含量高的食物后均可以升高。

碱性磷酸酶(ALP)的决定水平

参考值 成人 40~160U/L(37℃) 儿童 50~400U/L决定水平 临床意义及措施60U/L此水平在参考范围以内,低于此水平时可以排除许多与ALP升高有关的病种,而考虑其它的诊断。此值可作为病人自身ALP的对照值,可与过去和(或)将来的值进行比。200U/L此水平高于成人参考值范围上限,高

牛小肠碱性磷酸酶的用途

用途:去除DNA、RNA 5′或3′末端的磷酸基团;通过去除载体或DNA片断5′末端的磷酸基团,防止载体或DNA片断自连;通过5′末端脱磷,为5′末端磷酸化放射性标记准备模板;用于蛋白质丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的去磷酸化。

碱性磷酸酶的临床意义

  临床上测定ALP主要用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断,尤其是黄疸的鉴别诊断。对于不明原因的高ALP血清水平,可测定同工酶以协助明确其器官来源。  1.生理性增高  儿童在生理性的骨骼发育期,碱性磷酸酶活力可比正常人高1~2倍。处于生长期的青少年,以及孕妇和进食脂肪含量高的食物后均可以升高。

血清碱性磷酸酶的辨别原理

  (1)比色法:ALP在碱性条件下使磷酸苯二钠水解,生成磷酸和游离酚,后者与4-氨基安替比林作用,并经铁氰化钾氧化成红色醌类化合物,其颜色的深浅与ALP活性成正比。  (2)连续监测法:ALP在碱性条件下,使磷酸对硝基苯酚(4-NPP)释放出磷酸基团,AMP参与磷酸酰基的转移,促进酶反应速率,生成

碱性磷酸酶染色的结果判断

  结果判断:阳性结果为胞质内出现灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀。  ①(-)无灰褐色沉淀,为0分。  ②(+)胞质出现灰褐色沉淀,为1分。  ③(++)胞质深褐色沉淀,为2分。  ④(+++)胞质中已基本充满棕黑色颗粒状沉淀,但密度较低,为3分。  ⑤(++++)胞质全被深黑色团块沉淀所充满,密度

碱性磷酸酶染色的方法介绍

  目前碱性磷酸酶染色法有改良Gomori法及偶氮偶联法 (Kaplow)。  改良Gomori法原理为: 细胞内碱性磷酸酶水解试剂中的甘油磷酸钠释放出无机磷酸盐,与钙离子作用生成磷酸钙,再与钴离子作用生成磷酸钴,最后与硫化铵生成黑色硫化钴颗粒,沉淀于细胞浆中。  偶氮偶联法原理为:细胞中碱性磷酸酶