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线粒体荧光探针大全:TMRM,Mitotracker,JC1(3)

Mitochondrion-Selective Rhodamines and RosaminesRhodamine 123Rhodamine 123 (R302; FluoroPure Grade, R22420; Figure 12.22) is a cell-permeant, cationic, fluorescent dye that is readily sequestered by active mitochondria without inducing cytotoxic effects.56 Uptake and equilibration of rhodamine 123 is rapid (a few minutes) compared with dyes such as DASPMI (4-Di-1-ASP, D288), which may take 30 minutes or longer.1......阅读全文

激光扫描共焦显微镜技术及应用(二)

五、激光扫描共焦显微镜技术的应用定位、定量三维重组动态测量¨ 活细胞或组织内游离Ca2+浓度的测量¨ 活细胞内H+浓度( pH值)的测量¨ 自由基的检测¨ 药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量 应用:细胞膜电位的测量      荧光漂白恢复(FRA

线粒体荧光探针大全:TMRM,Mitotracker,JC-1(1)

线粒体荧光探针信息大全 (Probes for Mitochondria)包括各种常用探针,如JC-1,JC-9,TMRM,TMRE等Mitochondria are found in eukaryotic cells, where they make up as much as 10% of th

激光共聚焦显微镜技术的应用

最近需要做成骨细胞培养的实验,师兄给个建议,说是可以做激光共聚焦显微镜 检测。关于这个我还真不知道该如何下手设计这个实验,网上搜集了一些资料,分享给大家,供参考。激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope LSCM )是20世纪80年代发展起

线粒体膜电位荧光探针-Cell Meter 线粒体膜电位(MMP)

人体的ATP有95%为线粒体所提供,合成的ATP通过线粒体内膜ADP/ATP载体与细胞质中的ADP交换进入细胞质,参与细胞的各种需能过程,因此线粒体与细胞维持正常功能密切相关。线粒体在呼吸氧化过程中,将所产生的能量以电化学势能储存于线粒体内膜,在内膜两侧造成质子及其他离子浓度的不对称分布而形成线粒体

共聚焦激光扫描显微镜的应用及荧光探针

一、LSCM常用的检测内容及其荧光探针 LSCM检测内容和应用范围非常广泛,以下仅简单介绍LSCM常用的检测内容及其荧光探针。 1.细胞内游离钙 共聚焦激光扫描显微镜常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等,前两者为单波长激光探针,利用其单波长激发特点可直接测量细胞内Ca

细胞凋亡检测方法

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测  根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  1 光学显微镜和倒

常用细胞凋亡检测方法(图)

一、细胞凋亡的形态学检测1、光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤介绍

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。   第一种 细胞凋亡的形态学检测   根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  

DNA Ladder的测定方法是怎么一回事?

  不同细胞不同状态是有不同死法的,具体是细胞凋亡、坏死、还是程序性坏死,需要进一步排查分析来确定。而细胞凋亡是个复杂的过程,针对凋亡时期不同,检测的方法有所不同。那如何去确定哪条途径被触发,在哪个步骤被阻断,以及抑制剂是否能够抑制呢?下面介绍几种常用的测定方法。  一:细胞凋亡的形态学检测  发生

细胞凋亡的检测方法综述-5

4、检测细胞膜成分变化的Annexin V 联合PI法原理:磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂

葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用

实验概要为了研究葡萄糖对克隆胚胎早期发育的影响,本实验检测了克隆胚胎与对照组胚胎中葡萄糖的代谢及相关代谢情况,也检测了线粒体的超微结构、分布和数量。实验步骤1. 克隆胚胎制备和胚胎培养卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HE

葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用

实验步骤1. 克隆胚胎制备和胚胎培养卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作为工作液,卵母细胞在此液中被去掉纺锤体-染色体复合体;用卵丘细胞作为核供体。用注射针反复吸入、吹出卵丘细胞,以除去

葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用

实验步骤1. 克隆胚胎制备和胚胎培养卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作为工作液,卵母细胞在此液中被去掉纺锤体-染色体复合体;用卵丘细胞作为核供体。用注射针反复吸入、吹出卵丘细胞,以除去其细

细胞凋亡检测(Annexin-V-FITC 单染法)-2

2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA 特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA 的A

检测细胞凋亡的实验方法比较-3

◆ 细胞坏死与细胞凋亡细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。 一、细胞凋亡的形态学检测   根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞

LSCM细胞亚微结构

细胞亚微结构(细胞器探针)一般的光学显微镜由于分辨率有限,在观察细胞器结构时受到一定的限制,而共聚焦激光扫描显微镜可获得较一般普通光学显微镜分辨率高的细胞内线粒体、高尔基复合体、内质网、溶酶体等细胞器图像,同时还可动态观察活细胞状态下细胞器的形态学变化情况,此外还可通过光学切片即断层扫描技术进行三维

北大、华科研发出超灵敏结构光超高分辨率显微镜

  北京大学陈良怡团队联合华中科技大学谭山团队发明了一种超灵敏结构光超高分辨率显微镜  --海森结构光显微镜 (Hessian SIM)。此项成果近日以全文形式在线发表于Nature Biotechnology (影响因子41.67),论文题目为“Fast, long-term, supe

北大教授研发出超灵敏结构光超高分辨率显微镜

  北京大学陈良怡团队联合华中科技大学谭山团队发明了一种超灵敏结构光超高分辨率显微镜 --海森结构光显微镜 (Hessian SIM)。此项成果近日以全文形式在线发表于Nature Biotechnology (影响因子41.67),论文题目为“Fast, long-term, super-res

Molecular Devices筛选克隆和涂布工作流程也能个性化定制

一般来说,我们使用的仪器或分析系统都是标准化流程生产的 ,绝大多数情况下能符合 及满足我们的基本研究需求。但是,世界那么大,总有特殊化。当我们对研究方案和工作流程有特殊的要求时,就会希望能个性化定制一款仪器来实现新的工作流程满足研究需求。Molecular Devices的微生物克隆筛选系统QPix

利用自动细胞成像系统评价线粒体完整性和膜电位变化

简介线粒体功能作为细胞健康度评价的关键指标,可以通过检测其膜电位变化情况获得相应数据。线粒体膜电位去极化作为低氧损伤或氧化应激反应的早期重要的一种信号,阳离子荧光染料是用于线粒体膜电位评估的有效工具。我们利用两种已知的氧化磷酸化抑制剂作为化合物进行短时间 ( 60分钟 ) 的处理。抗霉素A (A

花粉管中线粒体移动的活体动态观测

实验概要在本实验中,应用Mitotracker Red染料对花粉管中线粒体进行活体标记,并结合激光共聚焦显微镜和隐失波显微镜技术,研究了花粉管细胞骨架及其相应的马达蛋白等对于线粒体分布、线粒体的移动和停泊的调节作用。主要试剂MitoTracker Red CMXRos (Molecular Prob

拟南芥根毛中线粒体和微丝双标活体实时观察

实验概要本研究用稳定表达微丝标记GFP-FABD2的拟南芥材料,结合线粒体活体标记染料Mitotracker RedCMXRos,对拟南芥根毛和线粒体作了活体动态同步观察。而且利用隐失波显微镜和spinning disc confocal显微镜比较了稳定表达标记线粒体GFP-mito和GFP

从染料细胞与滤光片等多维度解析免疫荧光实验的操作

当我们做免疫荧光的实验时,市面上会有很多的染料供我们选择,让人眼花缭乱,那到底应该如何选择呢?让我们看看以下介绍一、荧光标记是什么?荧光标记就是用荧光基团特异性来标记细胞或者组织样品中所感兴趣的区域。一般常用的荧光标记方法有表达荧光蛋白、细胞器及DNA特异性染料、抗体偶联免疫荧光染料和双光子荧光染料

Molecular Devices使用多能诱导干细胞(iPSC)来源的肝...(二)

“Find Spherical Objects”功能还可用于识别单个细胞和细胞核或利用适当的特征将不同的单细胞区别开来。此外,3D分析模块可以按照用户自定义选项“Connect by BestMatch”, “Connect byTouching”, 和 “Do NotConnect

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤(二)

第三种 线粒体膜势能的检测 线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆

浅谈如何选择合适的光源获得优质的荧光成像

荧光显微镜是利用特定波长的激发光照射被检物体产生荧光进行镜检的显微光学观测技术,已有100多年历史。在生物医学领域应用广泛,大多数实验室都有配备高端或者常规的显微成像系统,荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些

常用细胞凋亡检测方法(三)

三、线粒体膜势能的检测   线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆

细胞凋亡检测实验——线粒体膜势能的检测

实验方法原理线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA 断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt 崩溃,则细胞凋亡不可逆转。 线粒体跨膜电位

流式细胞仪和流式细胞术指南篇-2

核酸插入染料溴化乙锭(EtBr) 和碘化丙啶(PI)能够结合到DNA双螺旋的大沟。4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)和Hoechst染料(有几种常用的)则结合小沟。请注意, 一些染料 (例如碘化丙啶)也会结合到RNA发卡结构形成的沟中,因此如果要做DNA定量,需要用染料和RNA

在微流控平台下高通量研究3D神经网络的形态特征(二)

3D可视化和3D图像分析:MetaXpress软件可以将Z轴序列图像重构成3维立体结构观察细胞核及细胞网络,并进行3D水平的分析。图像应用用户自定义的3D分析中“findfibers”功能,“fibers”数值评价神经突触;同时计算了细胞个数。计算对象首先在每层中识别出,然后使用“connect