反向PCR（inversePCR）
实验方法原理 反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。 1. 选择合适的限制性内切酶位点。并在T-DNA的边界（左边界、右边界均可）和酶切位点附近设计引物P1、P2；2. 回收DNA，T4连接酶连接，使酶切后的DNA片段环化；3. 回收连接后的DNA，用引物P1、P2做PCR，就可扩增到两端为T-DNA插入序列，中间为侧翼序列的片段。实验材料 DNA样品试剂、试剂盒 T4 DNA连接酶（T4 DNALigase）引物EcoR I ddH2O 酚氯仿无水乙醇乙酸钠仪器、耗材 电泳仪离心管离心机超净台水浴锅实验步骤一、限制性内切酶消化 1. 选择合适的限制性内切酶，基因组一定要切成弥散性的条带。在酶切之前，应对基因组DNA定量。 2. 根据T-DNA的左边界序列选择合适的酶切位点EcoRI，BamHI和HindIII/P......阅读全文
反向PCR
实验方法原理 标准 PCR 技术应用于定位在两个引物之间（指向内部）的一段 DNA 片段的扩增。与此相反，反向 PCR (inverse PCR) 应用于扩增和克隆与已知 DNA 序列某一个末端相邻的侧翼的未知 DNA 序列，这种未知序列没有引物可以利用。该项技术由几个研究小组开发（Ochm
反向PCR
实验方法原理 标准 PCR 技术应用于定位在两个引物之间（指向内部）的一段 DNA 片段的扩增。与此相反，反向 PCR (inverse PCR) 应用于扩增和克隆与已知 DNA 序列某一个末端相邻的侧翼的未知 DNA 序列，这种未知
反向PCR
主要内容如下：· RT-PCR· Competitive and Quantative RT-PCR· In Situ RT-PCR· RL-PCR· DNA Contamination· RT-PCR
反向PCR
标准 PCR 技术应用于定位在两个引物之间（指向内部）的一段 DNA 片段的扩增。与此相反，反向 PCR (inverse PCR) 应用于扩增和克隆与已知 DNA 序列某一个末端相邻的侧翼的未知 DNA 序列，这种未知序列没有引物可以利用。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原
什么是反向 PCR？反向 PCR的特点
常规 PCR 是扩增两引物之间的 DNA 片段,反向 PCR(reverse PCR)是用引物来扩增两引物以外的 DNA 片段。一般先用限制性内切酶酶解 DNA(目的基因中不存在该酶的酶切位点,且片段应短于2～3kb),然后用连接酶使带有黏性末端的靶片段自身环化,最后用一对反向引物进行 PCR,得到
反向PCR （inverse-PCR）
实验方法原理 反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色体序列，因此又可称为染色体缓移或染色体步移。这时选择的引物虽然与核心DNA区两末端序列互补，但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA，然后用DNA连接
反向PCR （inverse-PCR）
利用反向PCR可对未知序列扩增后进行分析，探索邻接已知DNA片段的序列，并可将仅知部分序列的全长cDNA进行分子克隆，建立全长的DNA探针。可用于：（1）基因游走研究；（2）转位因子研究；（3）已知序列DNA旁侧病毒整合位点分析等研究。实验方法原理反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色
反向PCR （inverse-PCR）
实验方法原理 反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。 1. 选择合适的限制性内切酶位点。并在T-DNA的边界（左边界、右边界均可）和酶切位点附近设计引物P1、P2；2. 回收DNA，T4连接酶连接，使酶切后的DNA片段环化；3. 回收连接后的DNA，用引物P1、P2做
PCR技术（十四）：反向PCR
描述一种大聚合酶链反应(PCR)应用的方法，使在已知序列的核心区边侧的未知 DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA，以产生适合于PCR扩 增大小的片段，然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区 的末端序列，但其方向性，使链的延长经过环上的未知区而不是分开引
反向PCR（inverse PCR）简介
反向PCR是一种多聚合酶链式反应（PCR）应用的方法，可使已知序列的核心区边侧的未知DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA，以产生适合于PCR扩增大小的片段，然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区的末端序列，但其方向可使链的延长经过环上的未知区而不是分开