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实用哺乳动物细胞培养手册(六)

缓冲系统大多数细胞所需 pH 在 7.2 - 7.4。但是,细胞培养最适 pH 值随培养的细胞种类不同而 不同。成纤维细胞喜欢较高 pH (7.4 - 7.7), 而传代转化细胞系则需要偏酸 pH (7.0 - 7.4)。 由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与 CO2 体系进行缓冲,因此,气相中的 CO2 浓度 应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中 CO2 浓度设定在 5%,培养液中 NaHCO3 的加入量为 1.97g/L;如果 CO2 浓度维持在 10%,培养液中 NaHCO3 的加入量为 3.95g/L。细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换。HEPES 是一种非离子缓冲液,在 pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力,但是非 常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES 缓冲液可与低水平的碳酸钠(0.34g/L) 共用,以抵消因额外加入 HEPES 引起的渗......阅读全文

微生物细胞、植物细胞与动物细胞在培养上的主要区别

微生物细胞培养,简称微生物培养,包括原核细胞培养(细菌培养)和真核细胞培养(霉菌培养和酵母培养)。这些细胞小、且具有细胞壁,细胞周期非常短,如细菌每20-30min增殖1次。植物细胞培养指原生质体培养。未考虑分离出原生质体的植物细胞培养,无论是游离的单细胞或组织块,都称作植物组织培养。动物组织细胞培

干货|了解这些,养好细胞不是事儿!!!

  抗体药物是目前生物技术药物研究中最为活跃的领域,特别是在肿瘤和自身免疫性疾病等方面的临床应用,更是大放异彩。随着临床需求的增加,单克隆抗体药物发展迅速,FDA已批准的抗体药物多达70多个,抗体药物销售量年增长率基本在10%以上,大大高于制药行业平均水平,其市场规模已经达到千亿美元。  我国针对单

动物细胞大规模培养方法

   根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。   一、动物细胞生长特性及培养温度   1.细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素   2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差   3.需氧少,不耐受强力通风与搅拌   4.群体生

动物细胞大规模培养方法

根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素 2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差 3.需氧少,不耐受强力通风与搅拌 4.群体生长效应,贴壁生长(锚地依赖性) 5.培养过程产

细胞转瓶机简介

细胞转瓶机的结构细胞培养转瓶机是用于细胞培养的一种仪器,它的结构比较简单。主要由电动机,支架,滚轴,和细胞培养滚瓶所构成。电动机是一个电源控制系统,控制滚轴转动的速度。支架起到支撑的作用,是转瓶机的支架系统。滚轴是带动转瓶机进行转动的结构。细胞培养滚瓶用来盛装培养液,用于培养细胞。 细胞转瓶机的分类

悬浮细胞培养技术在兽用疫苗领域的应用

细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术,是当前国际上生物制品生产的主流模式,其最大优势是通过更为精确有效的工艺控制手段,在获得最大产量的同时能稳步提高产品的质量。但该技术目前在国内尚未得到广泛应用,生物制品生产仍主要采用病毒产率低、生产成本高、劳动强度大的转瓶细胞培养方

细胞培养反应器的操作模式

动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式,一般分为分批式操作(batch)、流加式操作(Fed-batch)、半连续式操作(semi-continuous)、连续式操作(continuous)和灌流式操作(perfusion)五种操作模式。 1. 批式操作(batch c

细胞培养反应器的操作模式

实验概要动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式,一般分为分批式操作(batch)、流加式操作(Fed-batch)、半连续式操作(semi-continuous)、连续式操作(continuous)和灌流式操作(perfusion)五种操作模式。实验步骤1. 批式操作(batch culture)&

哺乳动物细胞培养过程 & 培养条件

哺乳动物细胞培养过程 & 培养条件导语:哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。哺乳动物细胞培养过程哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。

智能恒温摇床的选购

恒温摇床大致可分为水浴恒温摇床和气浴恒温摇床。水浴恒温摇床可分为常温水浴恒温摇床(室温~100℃)和冷冻水浴恒温摇床(常用为0~100℃,也可定制更低温度的如:-10℃~100℃)。在运行方式上可分为往复式、回旋式和双功能水浴恒温摇床。气浴恒温摇床也可分为常温恒温摇床和冷冻恒温摇床。常温气浴恒温摇床

生物工程中的无血清细胞培养

无血清培养基的出现是培养基发展历程上的一个里程碑,其一般是在合成培养基的基础上,引入成分完全明确的或部分明确的血清替代成分,使培养基能满足动物细胞培养的要求,又可有效的克服因使用血清所引发的问题。进入20世纪80年代后,新的无血清培养基不断问世,人们经过研究发现,只要在培养基中增加某些适于细胞生长的

细胞培养中常用培养基及基本特性

  1、RPMI-1640 Medium   RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以

恒温摇床的选择

细胞培养需要适宜的生长环境和生长温度,这需要选择合适的摇床或则振荡器进行辅助。 应用 大肠杆菌培养 哺乳动物细胞培养 植物细胞培养 酵母细胞培养 真菌培养 病毒培养(昆虫细胞培养) 培养特点 生长迅速,高转速条件下不易被破坏,生长期后需降温,停止细菌生长,保持活性。 易受机械力损伤,需低转速

恒温摇床的选择技巧

细胞培养需要适宜的生长环境和生长温度,这需要选择合适的摇床或则振荡器进行辅助。 应用 大肠杆菌培养 哺乳动物细胞培养 植物细胞培养 酵母细胞培养 真菌培养 病毒培养(昆虫细胞培养) 培养特点 生长迅速,高转速条件下不易被破坏,生长期后需降温,停止细菌生长,保持活性。 易受机械力损伤,需低转速

细胞培养常用培养基及基本特性

细胞培养常用培养基及基本特性1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细

细胞培养中常用培养基及基本特性

1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

  细胞培养环境   1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作

大规模培养常用方法(贴壁培养、悬浮培养与固定化培...-1

大规模培养常用方法(贴壁培养、悬浮培养与固定化培养)-1根据动物细胞的类型,可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1. 细胞生长缓慢,易污染,培养需用抗生素 2.细胞大,无细胞壁,机械强度低,环境适应性差 3.需氧少,不耐

掌握了这些细节,师姐再也不用担心我养不好细胞啦~

很多小伙伴在养细胞的时候,总是会出现这样或那样的问题,很多时候,那是因为你没有注意以下的细节问题,现在我们一起来看看:细胞培养前的准备在您带上手套开始细胞培养之前, 先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足, 以免在开始实验后再次出入操作台,这样可以降低细胞污染的风险。细胞培养基也应先预热, 选择只预热

细胞培养该选怎样的生长环境及摇床

细胞培养需要适宜的生长环境和生长温度,这需要选择合适的摇床或振荡器进行辅助。那么下面就分析一下细胞培养需要的环境生长温度,使用者可以根据细胞生长的环境温度,选择适合的摇床。    大肠杆菌培养、 哺乳动物细胞培养、 植物细胞培养、 酵母细胞培养、 真菌培养、 病毒培养(

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规

哺乳动物细胞培养过程 & 培养条件

哺乳动物细胞培养过程哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各个过程进行简述:原代培养:从动物机体取出组织后切碎,经过各种酶(常用胰蛋白酶),螯合剂(常用EDTA)结合机械方法(吸液管反复吸吹)处理,分散成单细胞,置于

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

CHO细胞无血清培养入门技术手册

CHO细胞无血清培养入门技术手册——深圳百恩维生物1、CHO细胞背景CHO细胞是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO),1957年美国科罗拉多大学Dr. Theodore T. Puck从一成年雌性仓鼠卵巢分离获得,为

三种基础培养基的分类与举例应用

培 养 基培养基是用来供给细胞营养,促使细胞增殖,也是细胞赖以生长的环境。细胞培养实验中用量最多的就是细胞培养基,虽然细胞培养实验基本技术大同小异,但是每种细胞的培养条件却相差甚远。若偏离某种细胞所需的培养条件,则会导致细胞表达不同的表型。培养基按照来源分类:在动物细胞体外培养实验中,可使用天然培养

影响细胞生长的几点因素

影响细胞生长的几点因素,摘要:细胞在体外进行培养,失去了机体的调节和控制,因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境.外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长.一、温度:一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃.温度过高或过低都会影响到细胞的生长.细

影响细胞生长的几点因素

摘要:细胞在体外进行培养,失去了机体的调节和控制,因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境.外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长.一、温度:一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃.温度过高或过低都会影响到细胞的生长.细胞耐受低温的能力比抗热的

贴壁细胞传代方法

多数细胞系和原代细胞都会以一种单层的形式生长(单层细胞)或者覆盖在玻璃或经处理的塑料物体表面。为了保持细胞的健康与活跃增殖,通常需要对细胞进行有规律的传代。最常见的传代方法是使用蛋白酶如胰酶或胶原酶破坏细胞间以及细胞与培养介质间的连接。当细胞被解离成单细胞悬液时,再将它们稀释并分发至新的培养容器中。

细胞培养基的种类与应用!

  细胞培养基的种类与应用!   经典的培养基有很多种,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是应用最广泛的培养基。其他如M199 、 IMDM 、 L15培养基等也用于某些细胞的培养。其具体的特征及应用如下:   1、BME细胞培养基   基础Eagl

一些常见培养基的基本特性

1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等