蛋白质检测－WesternBlot
蛋白质检测－Western Blot1. 把聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质电泳转移到硝酸纤维膜上。1）转移缓冲液洗涤凝胶和硝酸纤维素膜，将硝酸纤维素膜铺在凝胶上，用5ml移液管在凝胶上来回滚动去除所有的气泡。2）在凝胶/滤膜外再包一张3mm滤纸（预先用转移缓冲液浸湿），将凝胶夹在中间，保持湿润和没有气泡。3）将此滤纸/凝胶/薄膜滤纸按照厂家建议方法放入电泳装置中，凝胶面向阴极。4）将上述装置放入缓冲液槽中，并灌满转移缓冲液以淹没凝胶。5）按照厂家所示接通电源开始电泳转移。6）转移结束后，取出薄膜和凝胶，弃去凝胶。2. 将薄膜漂在氨基黑中快速染色，直至分子量标准显现时取出，记录下标准位置。3. 用100ml水洗涤纤维素膜，必要时可用脱色缓冲液。4. 膜置印迹缓冲液中于37℃保温1小时。5. 室温下，用PBS-Tween缓冲液洗涤薄膜。6. 用封口机将薄膜封入塑料袋中，尽可能不留......阅读全文
Southern Blot
1. Run gel (0.8 -1.0% agarose is best). For yeast chromosomal Southerns, digest 20 μg DNA. Use 50 ml minigel for most purposes. Photograph gel, but mi
Northern Blot
试剂、试剂盒 20XMOPS 缓冲液 20XSSC 50XDenhardt 液 杂交液 10%SDS仪器、耗材 水平电泳装置 水浴 硝酸纤维素膜或尼龙膜 3 MM 滤纸 紫外交联仪 杂交管 杂交炉 [32P] 标记的 DNA 或 RNA 探针实验步骤 一、材料与设备1) 水平电泳装置2) 水浴3)
Northern Blot
Northern Blot Northern Blot 试剂、试剂盒 20XMOPS 缓冲液 20
Detection of Glycoproteins on Blot
Detection of Glycoproteins on BlotSource: Contributed by Sharad Purohit, Paller's LabReagentsSodium acetate Buffer (200mM, pH 5.5): Prepare a 200
Northern blot实验
Northern blot技术 Northern Blot 实验方法原理 将RNA样品通过变性琼脂糖凝胶电泳进行分离，再转移至尼龙膜等固相膜载体上，
Northern blot技术
经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳 这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛－DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳， 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H＋梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率（Mill
Genomic Southern Blot
SolutionsProtocol:Digest 5-10 μg genomic DNA overnight with restriction enzyme of choice.Run digested gDNA on 0.8% TAE gel with marker (with no ethidi
Protocol of Northern blot
Protocol of Northern blot质粒的转化和扩增质粒的鉴定目的基因片段的切割3.1样品双酶切(175μl水解体系)DW 115μlBuffer B(10×) 17.5μlBaM H 15μlPst I 17μlDNA(MMP-9) 16μlBSA 4.5μl37℃水浴，3h。3.2
Northern blot实验
实验方法原理 Northern blot的基本概述是将RNA样品通过变性琼脂糖凝胶电泳进行分离，再转移至尼龙膜等固相膜载体上，用放射性或非放射性标记DNA或RNA特异性探针对固定于固相膜上的mRNA进行杂交，洗膜去除非特异性结合杂交信号，经放射自显影或现色反应，对杂交信号进行分析。将杂交的m
Western Blot (AP)
主要试剂1. Membrane Blocking buffer:5% Milk 0.05% of Tween 20 PBS2. antibody dilution buffer: PBS 0.05% of Tween20 1.0% Milk(or BSA) 3. washing buffer: