HBV离心分离方法(之一)

设备:日立CS150GXL超速离心机

S55A 固定角式转头

10PC厚壁管(不加盖实际容量7.3ml,最高转速55,000rpm)

样品:HBV阳性血,低速离心后,含HBV血浆

梯度:10pc管 底部:含HBV血浆+KBr 配成ρ=1.32,(约36%w/w),4ml

中部:32.3%(w/w),KBr ρ=1.28, 1ml

上部:1M Nacl ρ=1.06, 2ml

离心参数:50,000rpm(215,000xg),20℃,加速“5”,减速“5”,8小时

离心后:Ⅰ. HBV 带在中部稍偏上

Ⅱ. 终密度:近离心管表面 ρ=1.12

近离心管底部 ρ=1.29—1.30

全管ρ分布为凸指数曲线

Ⅲ. O.D.280: 近表面为25,在HBV带附近突升至130,近管底约140

Ⅳ. RPHA:离心前底部4ml为300,离心后HBV界面处≥4000,有小平台

结果点评:比较简单的阶梯梯度,很好的分离效果.