安捷伦液相色谱仪的常见故障及解决方法

安捷伦液相色谱仪是利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比

的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。由于安捷伦液相色谱仪

HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集

等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机

分析等各种领域。但是由于人员素质 样品的性质以及仪器本身等方面的原

因, 常常出现这样那样的分析故障严重影响了正常的生产分析。所以掌握一种

准确、快速的排除仪器故障的方法非常重要。

安捷伦液相色谱仪的常见故障及解决方法：

1.柱压高

  可能原因：（1）.缓冲液盐分如（乙酸铵等）沉积于柱内；

            （2）.样品污染沉积；

    处理对于第一种情况先用40～50℃的纯水，低速正向冲洗柱子，待柱压

逐渐下降后，相应提高流速冲洗，柱压大幅度下 降后，用常温纯水冲洗，之

后用纯甲醇冲洗柱子30分钟；对于第二种情况，由样品的沉积引起污染的C18

柱，和纯水反向冲洗柱子，换成甲醇冲洗，接着用甲 醇+异丙醇（4+6）冲洗

柱子，再用换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分

钟以上。

2.指示

  可能原因：（1）.泵密封垫圈磨损；

            （2）.大量气泡进入泵体。

    处理对于第一种情况，更换密封垫圈；对于第二种情况，在泵作用的同

时，用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。

3.不稳定

  原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物，使得两者不能密封。

  处理工作中注意观察流动相的量，保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底，避免吸

入空气，流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物，拆下单向阀，

放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。

4.峰分叉

  可能原因：（1）、色谱柱被污染；

            （2）、柱头填料塌陷；

    处理对于第一种情况，先用纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着

用甲醇+异丙醇（4+6）冲洗柱子（冲洗时间的 长短由样品污染的情况而

定），再换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟

以上。如冲洗后依然出峰不佳，则考虑第二种情况。对于第 二种情况，拧开

柱头，检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分（污染的填料），装入新填

料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用与柱内径相同的顶端平滑的不锈 钢杆

压紧，再填平，滴甲醇，再压紧反复几次，直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干

净，擦净柱外壁的填料，拧紧柱头，用纯甲醇冲洗30分钟以上。

5.重复性差

  可能原因：（1）、进样阀漏液；

            （2）、加样针不到位；

            （3）、液量不足；

    处理对于第一种情况更换进样阀垫圈；对于第二种情况保证加样针插到

底，注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态 转换到INJECT状态，以保证

进样量的准确。日常工作中，液相色谱仪的保养非常重要，注意不要让空气进

入输液系统和高压泵中，储液器内的溶液如长时间未 用应清洗储液器并更换

溶液，每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净，防止无机盐析出或沉积；

样品的前处理也很重要，任何样品都要尽可能地去除杂质，完全溶解，尽量减

少对色谱柱的污染，以延长色谱柱的使用寿命，同时避免注射过浓的样品溶

液，以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞；色谱柱作好标记，用于不同分

析目的的色谱柱不要混用等。