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Cell:肠道菌帮助机体抗击疟疾

发表在著名科学杂志Cell的一项新研究中,Miguel Soares领导的研究小组发现,人肠道菌群中特异性细菌组分可以触发自然防御机制,高度保护预防疟疾传播。在过去的几年里,科学界开始意识到人类与居住在肠道的细菌和其他微生物处于共生关系。 这些微生物作为肠道菌群,不一定会导致人体发生疾病,反而可以影响多种生理功能,对于维持健康至关重要。一些特定菌株包括大肠杆菌是人类肠道的常住菌群,其表面表达糖分子(称为碳水化合物或聚糖)。这些聚糖可被人免疫系统识别,这导致成年个体中产生高水平的循环天然抗体。据推测,天然抗体可以针对微生物所表达的糖分子,也可以识别由病原体(寄生虫可引起人类疾病)表达的类似糖分子。Bahtiyar Yilmaz博士生,发现疟原虫的寄生虫即疟疾的病原体,表达了一种糖分子叫做 alpha-gal,其也表达在大肠杆菌菌株表面,它是人类肠道菌群的一部分。 在一系列在小鼠中进行的实验中,Bahtiyar Yilmaz......阅读全文

常用生化试剂作用

1.蛋白酶K:能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白。再尿素和SDS中稳定。一般工作浓度是50—100μg/ml,推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸钠. 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中

ELISA实验所用试剂详解

在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制

ELISA的试剂-2

3.1.3  包被用抗原   用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等,须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取,一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取,蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中

免疫球蛋白标记技术_酶标记抗体

免疫标记技术是用特定的物质标记抗原或抗体进行的抗原抗体反应。可借助各种仪器观察结果或进行自动化测定,可在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上,对抗原抗体反应进行定性和定位研究;或应用各种液相和固相免疫分析方法,对液体中的抗原、半抗原或抗体进行定性和定量测定。实验方法原理酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗

免疫球蛋白标记技术

酶标记抗体 荧光素标记抗体技术 125I标记单克隆抗体技术             实验方法原理 酶标

酶标记抗体

酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(

ELISA中的试剂(2)-结合物

3.2  结合物 结合物即酶标记的抗体(或抗原),是ELISA中最关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性,也保持了抗体(或抗原)的免疫活性。结合物中酶与抗体(或抗原)之间有恰当的分子比例,在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的(未结合的)酶或游离的抗体(或抗原)。此外,结合物尚要

酶标记抗体技术方法

   酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量

酶标记抗体技术方法

   酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量

未来几年生物制药产品研发走势分析

    制药业中发展最快、活力最强和技术含量最高的领域,当属生物制药。从1982年第一个新生物技术药物基因重组人胰岛素上市至今,生物制药只有20余年历史,但其却给世人带来了两个惊奇:一是促进医疗水平的突飞猛进;二是使“生物经济”在国民经济中占据了举足轻重的地位。   

酶免疫分析技术进展与自动化

郝繁运   综述 中国误诊学杂志  2007年 第一期  第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编 摘要:本文主要介绍了酶免疫分析的发展现状,从酶免疫分析标记技术若干环节的技术进步、在方法学上与现代化技术的融合与发展、酶免疫分析技

免疫球蛋白标记技术

实验方法原理 酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前

ELISA原理与分类介绍(四)

3.1.3  包被用抗原 用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等,须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取,一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取,蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中提取等(例如A

酶标记抗体技术方法(一)

  酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。

酶联免疫吸附试验——抗体检测实验 (ELISA 试验)7

实验方法原理本检测方法可用来筛选细胞表面抗原的特异性抗体(图 1.1.6)。注意:所有步骤必须在 4°C、含有 NaN3 的生理缓冲液中进行。实验步骤一、附加材料(其他材料见基本方案)未混合的细胞样品碱性磷酸酶标记抗体或 F(ab’)(从免疫动物中获得的抗免疫球蛋白抗体)阳性对照抗体(即与实验细胞反

筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验(一)

试剂、试剂盒 封闭缓冲液氯仿IPTG抗原-抗体复合物检测试剂SMTNT 缓冲液洗涤缓冲液放射性碘标记第二抗体第一抗体LB 琼脂板LB 顶层琼脂板硝酸纤维素滤膜λ噬菌体表达文库E.coli仪器、耗材 预设 42°C 的空气培养箱培养管平头镊子装有防水黑墨水(印度墨水)并带有 18 号针头的注射器实验步

酶联免疫吸附试验——抗体检测实验 (ELISA 试验)6

实验方法原理在测定单一细胞群体的抗原表达水平时,该检测过程(图1.1.5)与流式细胞分析 一样灵敏(单元4.1、单元4. 2)。但在检测混合细胞时,敏感性不及流式细胞分析。用生物素化的抗体替代酶标抗体,就可转化为间接方法,而后加入亲和素标记的碱性磷酸 酶再次孵育可增加敏感性。实验步骤一、附加材料(其

分子杂交技术(二)

四、核酸探针的标记和检测  分子杂交是核酸链间碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的分子进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法是

酶联免疫测定技术的多酶级联放大系统

一、AP底物放大系统(sutrate ampiification system)AP可催化底物NADP+脱磷酸而生成NAD+(辅酶1),以乙醇作还原剂,在醇脱氧酶催比下,乙醇脱氢,NAD+还原为NADH,NADH在黄递酶的催化下脱氢,同时四唑盐(tetrazoliim)被还原成有色的甲蜡(fo

蛋白质相互作用(protein interaction)实验方法

免疫共沉淀和亲和层析共分离:免疫共沉淀是证明蛋白质-蛋白质相互作用的最直接最经典和最有效的方法,如蛋白A能与B相互作用结合成异源二聚体,无论用抗A或抗B的抗体或与A或 B的亲和物偶联的agarose小珠都能把A和B沉淀下来。因此广泛用于蛋白质相互作用研究。常用的小珠:GST-Agarose(不需要抗

ABO血型详述

    ABO血型物质(凝集原)除存在于红细胞膜上外,还出现于唾液、胃液、精液等分泌液中。血型物质的化学本质是指构成血型抗原的糖蛋白或糖脂,而血型的特异性主要取决于血型抗原糖链的组成(即血型抗原的决定簇在糖链上),称之为凝集原。ABO的起源及发现    血液有

ELISA技术综述(六)

其他内容:酶联免疫测定技术的多酶级联放大系统: 一、AP底物放大系统substrate ampiification systemAP可催化底物NADP+脱磷酸而生成NAD+(辅酶1),以乙醇作还原剂,在醇脱氧酶催比下,乙醇脱氢,NAD+还原为NADH,NADH在黄递酶的催 化下脱氢

噬菌体展示技术

1985年,Smith G P第一次将外源基因插入丝状噬菌体f1的基因Ⅲ,使目的基因编码的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体表面,从而创建了噬菌体展示技术。该技术的主要特点是将特定分子的基因型和表型统一在同一病毒颗粒内,即在噬菌体表面展示特定蛋白质,而在噬菌体核心DNA中则含有该蛋白的结构基因。另

分子杂交技术(二)

四、核酸探针的标记和检测  分子杂交是核酸链间碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的分子进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法是

酵母双杂是什么?

   酵母双杂交技术,它是通过利用转录激活因子GAL4的特性而建立的。GAL4由两个结构域组成,一个为N端的DNA结合域(DNAbinding domain,DBD),另一个是C端的转录激活域(active domain,AD),二者可以从核酸一级结构上分开而独立表达出有功能的结构域;当二者在物理空

2020年世界科技发展回顾·生物技术

以色列 研究抗癌、抗衰老疑难杂症 超高分辨率显微镜看到活细胞 本报驻以色列记者 毛黎 特拉维夫大学率先证明,通过CRISPR基因编辑技术能有效地破坏动物癌细胞DNA,同时保持周围其他细胞组织完好无损;舍巴医学中心在全球首次试验性采用“逆向个性化药物”(RPM)治疗癌症患者;特拉维夫大学研

酶学技术在食品加工与食品质量检测中的运用

  在人类社会发展的历史中,食品加工工艺的不断改进,对于人类体力和智力的发展起到了重要的作用。从面包、奶酪、酒类、酱类等古老的食品可以看出,人类对酶的应用几乎同人类文明史一样古老。当然,在19世纪后期微生物学、生物化学,尤其是酶学诞生之前,人类所利用的酶学技术在很大程度上依赖于实践经验及朴素总结。人

病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装(一)

摘要:腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒, 因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。但是也可以通过新的辅助质粒(pH3和pH5),排除了Ad共转染的需求。辅助质

酶技术在食品加工与食品质量检测中的应用

  在人类社会发展的历史中,食品加工工艺的不断改进,对于人类体力和智力的发展起到了重要的作用。从面包、奶酪、酒类、酱类等古老的食品可以看出,人类对酶的应用几乎同人类文明史一样古老。当然,在19世纪后期微生物学、生物化学,尤其是酶学诞生之前,人类所利用的酶学技术在很大程度上依赖于实践经验及朴素总结。人

什么是酵母双杂?

   酵母双杂交技术,它是通过利用转录激活因子GAL4的特性而建立的。GAL4由两个结构域组成,一个为N端的DNA结合域(DNAbinding domain,DBD),另一个是C端的转录激活域(active domain,AD),二者可以从核酸一级结构上分开而独立表达出有功能的结构域;当二者在物理空