新一代CRISPRs有望成为2015年重磅技术

当人们提到所谓的使能技术(enabling technologies),类似印刷机的发明,或者麻醉药的发现就会浮现在我们脑海中。而对于科学家来说,CRISPR-Cas9 系统就是这样一种系统。 这种细菌免疫系统能通过将病毒DNA中的短重复片段整合到细菌基因组中,来抵抗病毒。当细菌(或其后代)第二次感染病毒的时候,这些重复序列就能通过一种核酸酶靶向侵入的互补DNA,并摧毁它。 2013年几个研究组就利用了这一系统编辑真核生物基因,随后看到在不少应用中CRISPRs迅速崛起,多个不同物种都实现了基因组中基因删除和插入,激活或抑制基因转录。但是随着这一系统越来越受欢迎,关于其特异性和有效性的质疑也越来越多。 如何提高导向RNA(gRNA)的特异性是一大问题,这种RNA能将Cas9 核酸酶带领到基因组目标位置,Nature Biotechnology杂志建议切断gRNAs (Nature子刊:巧解基因编辑脱靶问题),减少脱靶问......阅读全文

核酸酶的分类与发展史

分类一、核酸外切酶有些核酸酶能从DNA或RNA链的一端逐个水解下单核苷酸,所以称为核酸外切酶。只作用于DNA的核酸外切酶称为脱氧核糖核酸外切酶,只作用于RNA的核酸外切酶称为核糖核酸外切酶;也有一些核酸外切酶可以作用于DNA或RNA。核酸外切酶从3′端开始逐个水解核苷酸,称为3′→5′外切酶,例如,

“基因剪刀”助科学家开发出基因驱动系统

  根据英国《自然》杂志24日在线发表的一项遗传学最新研究成果,美国科学家利用CRISPR基因编辑技术,于实验室小鼠中成功开发出基因驱动系统。这一研究结果不但将改良小鼠模型,还有助于科学家研究复杂的遗传疾病。  基因驱动,即让特定基因有偏向性地遗传给下一代,使它们的遗传率高于随机几率,即所谓的“超孟

单碱基基因编辑系统,基因治疗又一利器

TaC9-ABE单碱基编辑技术原理。黄博纯 供图近日,中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员赖良学与五邑大学副教授邹庆剑团队合作首次将腺苷脱氨酶与转录激活因子样效应子(TALE)融合,开发了一种不会产生Cas9依赖性脱靶的新型碱基编辑系统TaC9-ABE。相关研究3月24日在线发表于《细胞发现》(

实验室塑料制品中核糖核酸酶和去氧核糖核酸酶的去除

通常RNA提取和RT-PCR实验操作失败的原因是由于器皿被核糖核酸酶(RNase)和去氧核糖核酸酶(DNase)污染。实验中应尽量使用不含 RNase的一次性塑料制品。重复使用的塑料制品可用0.1%二乙基焦碳酸(DEPC)水溶液于37℃浸泡2小时,再用去离子水冲洗,然后放入高压蒸汽灭菌器中,高压灭菌

新技术操控CRISPR基因编辑系统

  深圳市第二人民医院973项目首席科学家蔡志明与黄卫人、刘宇辰对CRISPR-Cas9基因编辑系统进行改进完善,实现对Cas9的操控,可控制癌细胞胞内信号流动方向,对癌细胞多种“恶性”行为进行有效干预。相关研究成果在线发表于9月5日的英国《自然·方法学》上。   近年迅猛发展的CRISPR-Cas

转基因动物表达系统组成

转基因动物表达系统,包括外源基因、表达载体和受体细胞等,基因组的转移则是细胞核移植和动物克隆技术,人工合成与设计基因、全基因乃至基因组的转基因技术是合成生物学。

新技术操控CRISPR基因编辑系统

  深圳市第二人民医院973项目首席科学家蔡志明与黄卫人、刘宇辰对CRISPR-Cas9基因编辑系统进行改进完善,实现对Cas9的操控,可控制癌细胞胞内信号流动方向,对癌细胞多种“恶性”行为进行有效干预。相关研究成果在线发表于9月5日的英国《自然·方法学》上。   近年迅猛发展的CRISPR-Cas

细胞化学词汇基因系统发育

中文名称:基因系统发育英文名称:gene phylogeny定  义:通过比较DNA序列之间的差异建立的DNA分子之间的一种进化关系。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

体内系统转基因新方法

中文摘要:      蛋白质分子间相互作用与识别是21世纪生命科学研究的前沿和热点. 分子对接方法是研究这一课题有效的计算机模拟手段. 通常,蛋白质-蛋白质分子对接包括四个阶段:搜索受体与配体分子间的结合模式,过滤对接结构以排除不合理的结合模式,优化结构,用精细的打分函数评价、排序对接模式并挑选近天

痘苗病毒系统基因表达实验(二)

实验方法原理含有 pT7 控制的外源基因(本实验「重组痘苗病毒(VTF7-3)感染后的脂质体转染」)的重组质粒,通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞,在培养过程中,外源基因被高效的 T7 RNA 聚合酶转录,并在感染细胞的细胞质完成

痘苗病毒系统基因表达实验(一)

本节介绍依赖于在哺乳动物细胞质合成噬菌体 T7 RNA 聚合酶的瞬时细胞质表达系统。首先,将感兴趣的基因插入质粒中,使其位于 T7 RNA 聚合酶启动子(PT7)的控制下。应用脂质体转染,重组质粒进入感染了 vTF7-3 的细胞质中,而 vTF7-3 是一种能编码噬菌体T7 RNA聚合酶的重组痘苗病

PNAS描述新型基因表达调控系统

  报道:科学家们开发了一个调控基因表达的新系统,该系统只需将特定DNA序列简单插入到基因的任意一侧,就可以实现剂量依赖性的基因表达抑制。这项成果发表在美国国家科学院院刊PNAS杂志上,文章认为这一系统有望替代Tet基因表达调控系统。   这是首次采用适体酶核糖开关有条件地knockdown病毒基

BioMark™基因分析系统介绍

美国Fluidigm公司www.fluidigm.com创立于1999年,总部设在美国加州。其创始人是Steve Quake和Gajus Worthington(公司CEO)。Steve Quake是美国斯坦福大学教授,是微液流领域(Microfluidic Technology)的权威专家http

什么是Luciferase报告基因系统

  Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)

目前在基因治疗中常用的自杀基因系统介绍

  (一) tk-GCV系统  病毒、细菌、真核细胞中都存在胸苷激酶(HSV-tk)。甘昔洛韦(GCV)是临床上用于治疗单纯疱疹的药物。GCV在胸苷激酶的作用下生成三磷酸GCV,能阻断DNA合成产生细胞毒作用。  (二) CD-5-FC系统  胞嘧啶脱氨酶基因(CD)存在于许多细菌和真菌中,5-氟胞

新技术显著提高CRISPR系统精确性

  麻省总医院的研究人员开发了新一代的基因组编辑系统,可大大降低生成不必要的、脱靶基因突变的风险。在发表于《自然生物技术》(Nature Biotechnology)杂志上的一篇论文中,作者们报告称,一种新型的基于CRISPR的RNA引导性核酸酶技术通过利用两条引导RNAs,大大降低了在错误的位

内切核糖核酸酶的基本信息

中文名称内切核糖核酸酶英文名称endoribonuclease定  义催化核糖核酸内部磷酸二酯键水解的酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

金葡菌核酸酶的基本信息

中文名称金葡菌核酸酶英文名称staphylococcal nuclease定  义编号:EC 3.1.31.1。一种存在于金黄色葡萄球菌﹑依赖Ca2+离子的酶,可将DNA或RNA水解成单核苷酸或双核苷酸。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

微球菌核酸酶的基本信息

中文名微球菌核酸酶外文名Micrococcal Nuclease微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease) 是只降解核小体连接区DNA的核酸酶,由于核小体处的DNA被组蛋白1保护而不被降解。只降解核小体连接区DNA的核酸酶,由于核小体处的DNA被组蛋白1保护而不被降解。

核糖核酸酶T1的用途

用途:去除DNA-RNA杂交体中未杂交的RNA区。

金葡菌核酸酶的基本信息

中文名称金葡菌核酸酶英文名称staphylococcal nuclease定  义编号:EC 3.1.31.1。一种存在于金黄色葡萄球菌﹑依赖Ca2+离子的酶,可将DNA或RNA水解成单核苷酸或双核苷酸。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

核糖核酸酶H的基本特征

在许多反转录病毒中与多功能酶的反转录酶有关,在病毒基因组进入DNA转录的不同阶段执行重要的功能。在真细菌中,核糖核酸酶H确信在以下方面是所必需的:从Okazaki片段去除RNA引物时、在转录子进入DNA聚合酶I启动DNA合成所用引物的转录过程时,以及在去除R-环为在大肠杆菌染色体复制起点提供不规则D

关于核糖核酸酶H的特征介绍

  在许多反转录病毒中与多功能酶的反转录酶有关,在病毒基因组进入DNA转录的不同阶段执行重要的功能。在真细菌中,核糖核酸酶H确信在以下方面是所必需的:从Okazaki片段去除RNA引物时、在转录子进入DNA聚合酶I启动DNA合成所用引物的转录过程时,以及在去除R-环为在大肠杆菌染色体复制起点提供不规

核酸酶保护分析的方法特点和应用

中文名称核酸酶保护分析英文名称nuclease protection assay定  义当核酸(DNA、RNA)中某段序列能与其他核酸(DNA、RNA)形成互补结合或与某种蛋白特异结合后,核酸酶(如S1核酸酶)就只能降解反应系统中未结合的核酸,留下被结合的核酸段落可以定性或定量检测出来的方法。此法可

核糖核酸酶-P的基本信息

核糖核酸酶 P 是一种核糖核蛋白, 含有一个单链RNA分子, 长度为375个碱基, 结合一个相对分子质量为20kDa的多肽(119个氨基酸残基)。RNA具有催化切割tRNA的能力,蛋白质则起间接的作用,可能是维持RNA结构的稳定。该酶广泛存在于原核生物和真核生物(核仁、叶绿体和线粒体)中,也参与核糖

微球菌核酸酶的基本信息

微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease) 是只降解核小体连接区DNA的核酸酶,由于核小体处的DNA被组蛋白1保护而不被降解。

关于核糖核酸酶P的基本介绍

  核糖核酸酶 P 是一种核糖核蛋白, 含有一个单链RNA分子, 长度为375个碱基, 结合一个相对分子质量为20kDa的多肽(119个氨基酸残基)。RNA具有催化切割tRNA的能力,蛋白质则起间接的作用,可能是维持RNA结构的稳定。该酶广泛存在于原核生物和真核生物(核仁、叶绿体和线粒体)中,也参与

一种与众不同的CRISPR核酸酶

   CRISPR是一种出色的基因组编辑工具,深受研究人员的欢迎。其中,大家比较熟悉的是来自化脓链球菌的Cas9(SpCas9)。不过,这并不是唯一的选择。一种新型核酸酶Cas13a(以前称为C2c2)正逐渐走进人们的视野,它具有独特的性质,进一步扩展了CRISPR工具箱。在此,我们将介绍一下Cas

核糖核酸酶H的基本信息

核糖核酸酶H是从小牛胸腺中发现而被分离的(Stein and Hausen 1969,Hausen and Stein 1970),但该酶现已知广泛存在于哺乳动物细胞、酵母、原核生物及病毒颗粒中。

核酶和核酸酶是不是一样

核酸酶是水解核酸的酶,核糖核酸酶是催化RNA水解的酶,脱氧核糖核酸酶就是催化DNA水解的酶,这就和蛋白酶是催化蛋白质水解的酶、脂肪酶是催化脂肪水解的酶以及淀粉酶是催化淀粉水解的酶是一个道理。核酶不是酶,核酶不是酶,核酶不是酶。酶(Enzyme)的化学本质是蛋白质。RNA为主要成分,有催化活性的叫做核