Natureasia聚焦:CRISPR/Cas研究进展Top20

CRISPR/Cas系统是目前发现存在于大多数细菌与所有的古菌中的一种后天免疫系统,其以消灭外来的质体或者噬菌体并在自身基因组中留下外来基因片段作为“记忆”。 CRISPR/Cas系统全名为常间回文重复序列丛集/常间回文重复序列丛集关联蛋白系统(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated proteins)。目前已发现三种不同类型的 CRISPR/Cas系统,存在于大约40%和90%已测序的细菌和古菌中。其中第二型的组成较为简单,以Cas9蛋白>以及向导RNA(gRNA)为核心的组成。 由于其对DNA干扰(DNAi)的特性,目前被积极地应用于遗传工程中,作为基因体剪辑工具,与锌指核酸酶(ZFN)及类转录活化因子核酸酶(TALEN)同样利用非同源性末端接合(NHEJ)的机制,于基因体中产生去氧核糖核酸的双股断裂......阅读全文

新技术操控CRISPR基因编辑系统

  深圳市第二人民医院973项目首席科学家蔡志明与黄卫人、刘宇辰对CRISPR-Cas9基因编辑系统进行改进完善,实现对Cas9的操控,可控制癌细胞胞内信号流动方向,对癌细胞多种“恶性”行为进行有效干预。相关研究成果在线发表于9月5日的英国《自然·方法学》上。   近年迅猛发展的CRISPR-Cas

新技术操控CRISPR基因编辑系统

  深圳市第二人民医院973项目首席科学家蔡志明与黄卫人、刘宇辰对CRISPR-Cas9基因编辑系统进行改进完善,实现对Cas9的操控,可控制癌细胞胞内信号流动方向,对癌细胞多种“恶性”行为进行有效干预。相关研究成果在线发表于9月5日的英国《自然·方法学》上。   近年迅猛发展的CRISPR-Cas

基因电转染系统的技术革新

经过近30年的发展革新,电转染已成为基因的功能研究领域中不可或缺的技术手段。下文不仅是一篇新上市的转染仪器的介绍,更是电转染仪技术革新的介绍,因为:                                  NEPA21高效基因转染系统     ------拥有全球领先的ZL电脉冲芯片技术和

基因芯片分析系统的技术指标

  1、扫描分辨率较高,如小于1μm。2、自动扫描获取数据,自动校正系统,扫描自动化程度高,步骤较简化。3、扫描速度较快,单位芯片的扫描时间较短。3、扫描效率高,如一次完成多个样本扫描。4、扫描自动化程度较高,人工操作步骤较少。5、扫描的质控措施更可靠,Call rate 必须达到99%以上。6、扫

转基因技术对环境及生态系统的影响

  转基因作物因为是人工制造的品种,我们可以把这些品种,看作为自然界原来不存在的外来种。一般说来,外来物种对环境或生物多样性,造成威胁或危险会有一段较长的时间。有时需10年的时间,或更长的时间。转基因作物商品化种植至今最长也就是5~6年的时间,一些潜在风险在这么短的时间内,不一定能表现出来。可是有些

病毒基因检测系统的系统特点

  1、DNA检测系统能提供诊断依据。使用基因芯片病毒检测系统,精确的诊断出导致泌尿生殖系统的致病微生物,为治疗感染疾病提供了科学的诊断依据。  2、生物基因疗法对顽固的感染症状效果不错。这种疗法特别针对病毒有极强的生物链的这个特点,从基因生物学的角度,直接破坏病毒基因生物链,达到治疗目的。

基因质谱分析系统

  基因质谱分析系统是一种用于预防医学与公共卫生学领域的分析仪器,于2012年6月19日启用  技术指标  可对4-30bp核酸片段进行分子量测定,每天分析完成>3000样本的1-36重RCR反应的检测和数据分析;一张芯片含384个孔,一次可任意选用1-384个孔,剩余孔可以分多次使用;数据读取完成

常见的自杀基因系统

常见的自杀基因系统有以下几种:(一) tk-GCV系统病毒、细菌、真核细胞中都存在胸苷激酶(HSV-tk)。甘昔洛韦(GCV)是临床上用于治疗单纯疱疹的药物。GCV在胸苷激酶的作用下生成三磷酸GCV,能阻断DNA合成产生细胞毒作用。(二) CD-5-FC系统胞嘧啶脱氨酶基因(CD)存在于许多细菌和真

甲醇酵母基因表达系统

 1 甲醇酵母表达系统的特点  1.1 宿主  七十年代巴斯德毕赤酵母曾被用于生产单细胞蛋白(SCP),有很好的发酵基础,菌体密度可达100g/L干重。其生长培养液的组分包括无机盐、微量元素、生物素、氮源和碳源,廉价而无毒。它能在以甲醇为唯一碳源的培养基中快速生长,其中醇氧化酶AOX——甲醇代谢途径

基因转移技术

  基因转移技术分为两类:第一类是将目的基因转导入体外培养的细胞或导入从体内取出的细胞,观察目的基因在细胞中的表达,这项技术称基因转染(gene transfection)技术。通常情况下,该技术转入的目的基因不与细胞染色体发生整合,而是在细胞质呈现暂时性表达,随时间推移而逐渐减弱或消失。第二类是将

基因敲除技术

一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较

基因敲除技术

一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较

基因重组应用——转基因技术

基因重组中转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因,也可以是人工合成指定序列的DNA片段。基因重组DNA片段被转入特定生物中,与其本身的基因组进行重组,再从重组体中进行数代的人工选育,从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。该技

痘苗病毒系统基因表达实验

实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质粒载体开始,然后用重组质粒通过脂质体介导转染已经被vTF7-3(可以持续表达T7 RNA聚合酶的痘苗病毒)感染的细胞。收获后,基因产物在细胞内的表达可以用脉冲标记的方法或用「重组痘苗病毒及其产物的鉴定实验」中叙述的方法分

基因系统发育的定义

中文名称基因系统发育英文名称gene phylogeny定  义通过比较DNA序列之间的差异建立的DNA分子之间的一种进化关系。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

痘苗病毒系统基因表达实验

重组痘苗病毒(VTF7-3)感染后的脂质体转染 两种重组痘苗病毒共感染细胞             实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质

转基因技术的技术分类

植物转基因技术植物转基因技术是采用克隆等方式,在受体细胞中置入外源DNA,代表性的使用方式如载体介导法、DNA直接摄取法。动物转基因技术显微注射法就是利用玻璃针将DNA注入到动物胚胎细胞核,再将胚胎细胞移植到动物体,使其正常发育,是早期常用的动物转基因技术。体细胞核移植法就是先在体外培养细胞,筛选优

基因扩增技术的技术特点

特异性高首次报导的PCR所用的DNA聚合酶是大肠杆菌的DNAPolymerase I的Klenow大片段,其酶活性在90℃会变性失活,需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段,同时引物是在37℃延伸(聚合)易产生模板—引物之间的碱基错配、致特异性较差,1988年Saiki等从温泉水中分离到的水

基因敲除技术的技术应用

基因敲除技术主要应用于动物模型的建立,而最成熟的实验动物是小鼠,对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。近年来,牛、羊、猪、猴等大型哺乳动物实现了基因敲除。但由于狗的生殖生理较为特殊,基因敲除狗的培育难度大为增加,狗基因组的定点修饰一直未获成功。针对这一问题,研究团队设计了一个自体移植的策略,

基因敲除技术的技术分类

基因敲除分为完全基因敲除和条件型基因敲除(又称不完全基因敲除)两种。完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性,条件型基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除。噬菌体的Cre/LoxP系统、Gin/Gix系统、酵母细胞的FLP/FRT系统和R/RS系统是现阶

基因敲除技术的技术分类

基因敲除分为完全基因敲除和条件型基因敲除(又称不完全基因敲除)两种。完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性,条件型基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除。噬菌体的Cre/LoxP系统、Gin/Gix系统、酵母细胞的FLP/FRT系统和R/RS系统是现阶

转基因技术的技术特点

转基因技术是将高产、抗逆、抗病虫、提高营养品质等已知功能性状的基因,通过现代科技手段转入到目标生物体中,使受体生物在原有遗传特性基础上增加新的功能特性,获得新的品种,生产新的产品 。自然界中同样广泛存在自发的转基因现象,譬如植物界的异花授粉、天然杂交以及农杆菌天然转基因系统等等。

转基因技术的技术分类

植物转基因技术植物转基因技术是采用克隆等方式,在受体细胞中置入外源DNA,代表性的使用方式如载体介导法、DNA直接摄取法。动物转基因技术显微注射法就是利用玻璃针将DNA注入到动物胚胎细胞核,再将胚胎细胞移植到动物体,使其正常发育,是早期常用的动物转基因技术。体细胞核移植法就是先在体外培养细胞,筛选优

转基因技术的技术原理

转基因技术是利用现代生物技术,将人们期望的目标基因,经过人工分离、重组后,导入并整合到生物体的基因组中,从而改善生物原有的性状或赋予其新的优良性状。除了转入新的外源基因外,还可以通过转基因技术对生物体基因的加工、敲除、屏蔽等方法改变生物体的遗传特性,获得人们希望得到的性状。这一技术的主要过程包括外源

转基因技术的技术原理

转基因技术是利用现代生物技术,将人们期望的目标基因,经过人工分离、重组后,导入并整合到生物体的基因组中,从而改善生物原有的性状或赋予其新的优良性状。除了转入新的外源基因外,还可以通过转基因技术对生物体基因的加工、敲除、屏蔽等方法改变生物体的遗传特性,获得人们希望得到的性状。这一技术的主要过程包括外源

基因敲除技术的技术分类

基因敲除分为完全基因敲除和条件型基因敲除(又称不完全基因敲除)两种。完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性,条件型基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除。噬菌体的Cre/LoxP系统、Gin/Gix系统、酵母细胞的FLP/FRT系统和R/RS系统是现阶

基因敲除技术的技术分类

基因敲除分为完全基因敲除和条件型基因敲除(又称不完全基因敲除)两种。完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性,条件型基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除。噬菌体的Cre/LoxP系统、Gin/Gix系统、酵母细胞的FLP/FRT系统和R/RS系统是现阶

转基因技术的技术原理

  转基因技术的原理是将人工分离和修饰过的优质基因,导入到生物体基因组中,从而达到改造生物的目的。由于导入基因的表达,引起生物体的性状,可遗传的修饰改变,这一技术称之为人工转基因技术(Transgene technology)。  人工转基因技术就是把一个生物体的基因转移到另一个生物体DNA中的生物

基因敲除技术的技术应用

基因敲除技术主要应用于动物模型的建立,而最成熟的实验动物是小鼠,对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。近年来,牛、羊、猪、猴等大型哺乳动物实现了基因敲除。但由于狗的生殖生理较为特殊,基因敲除狗的培育难度大为增加,狗基因组的定点修饰一直未获成功。针对这一问题,研究团队设计了一个自体移植的策略,

基因枪技术技术简介

基因转移技术是一种将外源基因以在体(in vivo)或离体(in vitro)的方式导入到靶细胞核内的技术, 属于基因工程技术(亦称重组DNA 技术)的一个重要组成部分。基因工程技术以分子生物学等学科发展为基础, 使人类拥有了构造生物遗传物质新组合的能力。对在体方式而言, 基因转移技术需要跨越细胞外