新装置能操控分化阶段干细胞或引发新一代基因疗法
美国西北大学开发出一种新型电穿孔微流控装置,能对分化中的干细胞进行电穿孔操作,在细胞生命的最重要阶段能够进行分子输送。这提供了研究神经元等原代细胞所必要的条件,为探索神经疾病致病机制打开了一扇门,可能会引发新一代的基因疗法。 电穿孔技术是分子生物学中强有力的技术手段。利用电脉冲在细胞膜上创建一个临时的纳米孔洞,研究人员就能将化学品、药物和DNA(脱氧核糖核酸)直接输送到单个细胞中。 但是,现有的电穿孔技术要用很高的电场强度来保持细胞悬浮在溶液中,打断了细胞通路,使敏感的原代细胞处在恶劣的环境中。因此,研究人员要在细胞持续分化和扩大过程中研究细胞的自然属性几乎没有可能。 据物理学家组织网近日报道,这个新型装置的英文缩写为LEPD,适用于在人工衬底而非自由浮动的培养基中生长的贴壁细胞,这类细胞的生长必需有可以贴附的支持物表面,细胞依靠自身分泌的活培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长和繁殖。 研究人员说:“不破坏分化却......阅读全文
原代细胞传代技术
一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或与EDTA混合液)轻轻摇动培养瓶,使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察,发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时,弃去消化液,加入培养液终止消化。4、用吸管将贴壁的细胞吹打
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
血细胞分离技术
采血 (一)材料与试剂 1.抗凝剂 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是
流式细胞技术
流式细胞技术(flow cytometry,FCM)是一项集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学以及细胞免疫荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。概括地说,流式细胞技术就是对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数的、快速的、准确的定性分析和分选的技术。该技术的
细胞学技术
概述及注意事项:细胞学检查包括有细胞的涂片与染色技术,其来源先于组织切片技术,目前是较为常用的病理检查方法之一。它所运用的范围也很广泛,如女性生殖系统、食管、胃、肺、浆膜腔积液、泌尿管道、鼻咽部等部位的脱落癌细胞,以及胸、腹腔的肿块、淋巴结、乳腺、和其它组织器官的细胞学诊断。标本采集注意事项::1、
细胞化学技术4
6、基本实验过程 用于大分子合成过程研究的放射自显影技术: 同位素标记示踪化合物→注入动物体内→ 取下器官或组织→切片→ 涂乳胶膜→自显影→显影和定影→染色→观察 用于大分子定位研究的放射自显影技术: 组织固定包埋→切片 ↓ 细胞化学反
细胞化学技术2
二、 免疫细胞化学技术 免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗原抗体特异结合的特性定位组织和细胞中特异大分子的一类技术。它包括光镜水平(简称免疫组化)和电镜水平(简称免疫电镜)的免疫细胞化学技术。应用免疫细胞化学技术可在原位检测细胞的各种大分子,
脱落细胞检查技术
一、标本采集 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部位,尽可能在病变区直接采集细胞。采集的标本必须保持新鲜,尽快制得,以免细胞自溶或腐败。尽可能避免血液、粘液等混入标本内,采集方法应简便,操作轻柔,避免病人痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散,下面介绐几种常用的标本采集方法
脱落细胞检查技术
脱落细胞检验医生除要熟练掌握细胞形态学特点外,还必须掌握各项操作和染色技术及观察方法,所以脱落细胞学检查技术是重要的学习内容之一。它包括标本采集、制片、固定和染色、镜下观察方法及诊断要领等。第一节 标本采集和涂片制作方法 一、标本采集 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部
原代细胞鉴定技术
PriCells-原代细胞鉴定技术 一、形态学鉴定1. 在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征2. 细胞染色检查 :a) 将无菌玻片置于细胞培养皿中,加细胞悬液后培养;b) 待细胞长满玻片后取出,用PBS清洗,之后放于载玻片上,待其自然干燥;c) 用PBS/甲醇(1:1)固定15分钟;d) 弃固定
细胞化学技术3
三、放射自显影技术放射自显影(radioautography)是利用放射性核素(同位素)的射线作用于感光材料的卤化银晶体,产生潜影,然后通过显影过程把“像”显示出来,以研究用放射性核素标记的物质在生物体内的定位和定量的一种技术。放射自显影技术有光镜和电镜两个层次。光镜放射自显影研究同位素标记物在组织
血细胞分离技术
实验概要血细胞是免疫学研究或临床检验常用的检测对象或试验材料,分离和纯化血细胞是实验室中的基本技术。目前分离血细胞的技术大多是根据各种细胞群特有的大小、沉降率、粘附性和吞噬能力等设计而成。实验原理外周血液中的红细胞与白细胞的比例在几百甚至上千比一,两类细胞的大小和密度不同,其沉降速度也就不同,红细胞
细胞化学技术1
细胞化学技术(cytochemistry)是在保持细胞结构完整的条件下,通过细胞化学反应研究细胞内各种成分(主要是生物大分子)的分布情况以及这些成分在细胞活动过程中的动态变化的技术,可以通俗地说,这类技术让人们在显微镜下看到细胞内大分子的位置。这类技术包括光镜和电镜水平的酶细胞化学技术、免疫细胞化学
细胞融合技术
细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以
细胞分离纯化技术
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(
原代细胞分离技术
取人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用的如下方法进行分离培养:一、悬浮细胞的分离方法1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。2、去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。3、用培养基
单细胞分离技术
单细胞测序日趋火爆的原因很大程度上得益于单细胞分离技术的不断完善。这一讲,我们将跟大家一起回顾传统的单细胞分离技术,并重点介绍单细胞分离技术的新宠微孔芯片技术及微流控技术。图1为目前常见单细胞分离设备。图1:目前常见单细胞分离设备传统单细胞分离技术相信许多实验人员,都见过下面我们要介绍的传统的单细胞
细胞培养技术
实验概要细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。主要设备细胞培养设施和基本条件 1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染
细胞分离纯化技术
实验方法原理 常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,水性高,平均分子量为400000,当密度为1.2 g/ml仍未超出正常生理性
细胞培养技术的技术分类
动物细胞培养高速冷冻离心机在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯
单细胞测序技术的技术特点
单细胞测序技术是一种在单个细胞水平上对基因组、转录组、表观遗传组等进行高通量测序分析的技术。 它具有以下几个重要特点和优势: 1. 揭示细胞异质性:能够发现细胞群体中不同细胞之间的细微差异,识别罕见细胞类型和细胞的不同状态。 2. 深入了解细胞发育和分化:追踪细胞从干细胞到成熟细胞的发育轨迹,揭
人类的细胞研究
为了感染我们的细胞,引起COV-ID-19的病毒SARS-CoV-2首先在我们的细胞表面附着一个分子,但随后必须与人类细胞融合。在大流行之前,Gorgun正在研究粘附并插入细胞膜的分子之间的相互作用,当CO-VID-19开始传播时,Gorgun迅速开展了研究,以了解SARS-CoV-2如何与细胞融合
体细胞突变研究
体细胞突变发生在体细胞中的突变,即在体细胞发生了基因突变或染色体畸变。体细胞突变率一般为 0.1~1×10-6/代。其突变性状一般不能传给下一代个体,除非突变部分可以由无性繁殖方式传给后代或者突变部分以后能产生生殖细胞。但突变细胞的突变性状能通过有丝分裂传给子细胞。例如许多芽变就是体细胞突变,若发现
细胞的进展研究
就在上推出了一些阳离子聚合物基因转染技术,以其适用宿主范围广,操作简便,对细胞毒性小,转染效 转染试剂率高受到研究者们的青睐。 在这其中,树枝状聚合物和聚乙烯亚胺的转染性能*佳,但树枝状聚合物的结构不易于进一步改性,且其合成工艺复杂。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有
细胞的研究历史
细胞(Cells)是由英国科学家罗伯特·胡克(Robert Hooke,1635~1703)于1665年发现的。当时他用自制的光学显微镜观察软木塞的薄切片,放大后发现一格一格的小空间,就以英文的cell命名之,而这个英文单字的意义本身就有小房间一格一格的用法,所以并非另创的字汇。而这样观察到的细
细胞的研究历史
细胞(Cells)是由英国科学家罗伯特·胡克(Robert Hooke,1635~1703)于1665年发现的。当时他用自制的光学显微镜观察软木塞的薄切片,放大后发现一格一格的小空间,就以英文的cell命名之,而这个英文单字的意义本身就有小房间一格一格的用法,所以并非另创的字汇。而这样观察到的细
细胞的研究历史
细胞(Cells)是由英国科学家罗伯特·胡克(Robert Hooke,1635~1703)于1665年发现的。当时他用自制的光学显微镜观察软木塞的薄切片,放大后发现一格一格的小空间,就以英文的cell命名之,而这个英文单字的意义本身就有小房间一格一格的用法,所以并非另创的字汇。而这样观察到的细
青岛能源所单细胞拉曼流式分选技术研究获进展
日前,中国科学院青岛生物能源与过程研究所单细胞研究中心在基于微流控的单细胞拉曼流式分选技术研究中取得新进展,相关成果于2月5日在线发表在Analytical Chemistry (Zhang PR, et al, Anal Chem, 2015)。 单细胞拉曼分选(RACS)是一种极具潜力的活
时空分辨单细胞测序技术如何提高肿瘤研究的准确性?
时空分辨单细胞测序技术可以通过以下几种方式提高肿瘤研究的准确性:精确描绘肿瘤细胞的空间分布能够清晰地展示肿瘤组织中不同类型细胞(如肿瘤细胞、免疫细胞、基质细胞等)在特定区域的分布情况。这有助于了解肿瘤细胞与周围微环境的相互作用,以及它们如何影响肿瘤的生长、侵袭和转移。揭示肿瘤细胞的异质性在不同的空间