液相色谱柱的选择、使用、维护和常见故障的排除

液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等。本文重点介绍反相色谱柱的选择和使用:一、反相色谱柱的选择 1.柱子的PH值使用范围 反相柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况,色谱柱人口处会塌陷。同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。如果流动相PH较高或经常使用缓冲液时,建议选择PH范围大的柱子,例如戴安公司的Acclaim柱PH 2-9或Zorbax的PH 2-1......阅读全文

液相色谱柱的填料有哪些

常见色谱柱中的填料分类1、液相a、反相(与离子对)方法C18(十八烷基或ODS)----------- 普适性好;保留性强,用途广C8(辛基) -----------与C18相似,但保留值稍小C3,C4 -----------保留值小;大多用于肽类与蛋白质C1【三甲基硅烷(TMS)】------保留

液相色谱柱的填料有哪些

液相色谱柱的填料基质:1、硅胶基质- pH 2-8:高或低pH下,硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14:化学修饰困难。3、聚合物基质 - pH1-14:孔结构复杂,孔径不均匀导致柱效不够高,有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。

液相色谱柱的填料有哪些

液相色谱柱的填料基质:1、硅胶基质- pH 2-8:高或低pH下,硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14:化学修饰困难。3、聚合物基质 - pH1-14:孔结构复杂,孔径不均匀导致柱效不够高,有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。

液相色谱柱的填料有哪些

液相色谱柱的填料基质:1、硅胶基质- pH 2-8:高或低pH下,硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14:化学修饰困难。3、聚合物基质 - pH1-14:孔结构复杂,孔径不均匀导致柱效不够高,有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。

液相色谱柱怎样选择填料粒度

 填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小, 填充柱 的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度。如果固定相选择是真确,但是分离度不够,那么选择更小粒度的填料是很用有的,3um填料填充柱的柱数比相同条件下的5UM填料的柱效提高近30%;然而;3um的

液相色谱柱的填料有哪些

常见色谱柱中的填料分类 1、液相 a、反相(与离子对)方法 C18(十八烷基或ODS)----------- 普适性好;保留性强,用途广 C8(辛基) -----------与C18相似,但保留值稍小 C3,C4 -----------保留值小;大多用于肽类与蛋白质 C1【(TM

液相色谱柱的填料有哪些

常见色谱柱中的填料分类1、液相a、反相(与离子对)方法C18(十八烷基或ODS)----------- 普适性好;保留性强,用途广C8(辛基) -----------与C18相似,但保留值稍小C3,C4 -----------保留值小;大多用于肽类与蛋白质C1【三甲基硅烷(TMS)】------保留

液相色谱柱怎样选择填料粒度

液相色谱柱怎样选择填料粒度目前,商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3,5和10um填料,填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小, 填充柱 的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是*的因素。如果固定相选择

液相色谱柱的填料有哪些

常见色谱柱中的填料分类1、液相a、反相(与离子对)方法C18(十八烷基或ODS)----------- 普适性好;保留性强,用途广C8(辛基) -----------与C18相似,但保留值稍小C3,C4 -----------保留值小;大多用于肽类与蛋白质C1【三甲基硅烷(TMS)】------保留

液相色谱柱怎样选择填料粒度

液相色谱柱怎样选择填料粒度填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小, 填充柱 的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度。如果固定相选择是真确,但是分离度不够,那么选择更小粒度的填料是很用有的,3um填料填充柱的柱数比相同条件下的5UM填料的柱效提高

液相色谱柱的填料有哪些

液相色谱柱的填料基质:1、硅胶基质- pH 2-8:高或低pH下,硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14:化学修饰困难。3、聚合物基质 - pH1-14:孔结构复杂,孔径不均匀导致柱效不够高,有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。

液相色谱柱的填料有哪些

液相色谱柱的填料基质:1、硅胶基质- pH 2-8:高或低pH下,硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14:化学修饰困难。3、聚合物基质 - pH1-14:孔结构复杂,孔径不均匀导致柱效不够高,有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。

液相色谱柱的填料有哪些

常见色谱柱中的填料分类1、液相a、反相(与离子对)方法C18(十八烷基或ODS)----------- 普适性好;保留性强,用途广C8(辛基) -----------与C18相似,但保留值稍小C3,C4 -----------保留值小;大多用于肽类与蛋白质C1【三甲基硅烷(TMS)】------保留

液相色谱柱的填料有哪些

常见色谱柱中的填料分类1、液相a、反相(与离子对)方法C18(十八烷基或ODS)----------- 普适性好;保留性强,用途广C8(辛基) -----------与C18相似,但保留值稍小C3,C4 -----------保留值小;大多用于肽类与蛋白质C1【三甲基硅烷(TMS)】------保留

液相色谱仪色谱柱柱填料

 液相色谱柱装填的固定相,其基体材料多为粒度5~10µm或3~5µm的全多孔球形或无定形硅胶。以后又发展了无机氧化物基体(如三氧化二铝、二氧化钛、二氧化皓、三氧化钨)、高分子聚合物基体(如苯乙烯-二乙烯基苯共聚微球,丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯的聚合物微球)和脲醛树脂微球,它们多为3~10µm的全多孔微球

液相色谱柱流动相的使用注意事项

  (1)由于甲醇廉价,对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。  (2)对于正相柱推荐使用沸程为30-60 ℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相,没有提纯的己烷不得使用。用水最好使用超纯水(电阻率大于18兆欧),去离子水及双蒸水中含有酚类杂质,有可能影响分析结果。  (3)含水流动相最好

反相色谱流动相的选择注意事项

  在液质联用中,一般均使用极性溶剂进行洗脱。反相色谱中洗脱强度顺序为:水

反相高效液相色谱柱使用维护注意事项

    作为基于极性流动相和非极性固定相所组成的液相色谱体系,反相高效液相色谱柱是通过表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,根据一般有机分子的结构中具有非极性的疏水部分,同时疏水部分越大,一般保留值越高的性质,反相高效液相色谱柱进行相应的工作。   为尽可能减少日常中不正确色谱操作对反向液相色谱柱的损

反相高效液相色谱柱的原理及使用维护

反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能

反相色谱柱的使用方法

反相柱主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/m

反相色谱柱的使用方法

反相柱主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/m

反相色谱色谱柱的选择

  色谱柱是HPLC系统非常关键的一部分,随着色谱技术的发展,它也不断地更新换代,长度变得越来越短,填料颗粒也越来越细。现在常用的色谱柱长度在30~250 mm,颗粒直径在1.6~5μm。颗粒类型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多键合相选择的优点,表面多孔具有反压低、峰形好的优

正相和反相色谱柱的区别

  在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流

反相键合相液相色谱仪流动相概述

反相键合相液相色谱仪流动相溶剂极性越低,洗脱能力越强。一、常用流动相:1、甲醇-水。2、乙腈-水。3、四氢呋喃-水。溶剂强度为水<甲醇<乙腈<四氢呋喃。系统2较系统1好,原因如下:系统2的粘度较系统1小,柱效好。粘度降低,柱压降低,传质阻力降低(溶质扩散阻力降低), 柱效升高。乙腈的紫外末端吸收较甲

高效液相色谱柱如何选择填料粒度

    Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。    高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢?    色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒

液相色谱柱常用的填料都有哪些

在液相色谱分离系统中,色谱填料选择的正确与否会直接影响到专业的液相色谱柱分离物质效果的好坏。由于液相色谱填料具有相当宽的选择范围,所以我们在购买液相色谱柱之前有必要对不同液相色谱填料进行一个简单的认识和了解。 *,正相色谱硅胶基质填料。正相色谱柱的固定相是由硅胶和其他具有极性官能团组成的键合相填料。

高效液相色谱柱如何选择填料粒度

   Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。    高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢?    色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒度越小

高效液相色谱柱如何选择填料粒度

   Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。    高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢?    色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒度越小,填

常见液相色谱柱中的填料分类

a、反相(与离子对)方法C18(十八烷基或ODS)----------- 普适性好;保留性强,用途广C8(辛基) -----------与C18相似,但保留值稍小C3,C4 -----------保留值小;大多用于肽类与蛋白质C1【三甲基硅烷(TMS)】------保留值zui小;zui不稳定苯基,

液相色谱柱常用的填料都有哪些

在液相色谱分离系统中,色谱填料选择的正确与否会直接影响到专业的液相色谱柱分离物质效果的好坏。由于液相色谱填料具有相当宽的选择范围,所以我们在购买液相色谱柱之前有必要对不同液相色谱填料进行一个简单的认识和了解。 *,正相色谱硅胶基质填料。正相色谱柱的固定相是由硅胶和其他具有极性官能团组成的键合相填料。