液相色谱柱的选择、使用、维护和常见故障的排除
液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等。本文重点介绍反相色谱柱的选择和使用：一、反相色谱柱的选择 1.柱子的PH值使用范围 反相柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解；当PH值大于7时硅胶易溶解；经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况，色谱柱人口处会塌陷。同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。如果流动相PH较高或经常使用缓冲液时，建议选择PH范围大的柱子，例如戴安公司的Acclaim柱PH 2-9或Zorbax的PH 2-1......阅读全文
高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分
应按各品种项下的规定，常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多，加之样品基质复杂，色谱柱极易被污染，是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一，通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物，堵在柱头筛板上，极易导致柱压高；上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题，一般有0.22和0.45um规格，根据您的需要选择合
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多，加之样品基质复杂，色谱柱极易被污染，是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一，通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物，堵在柱头筛板上，极易导致柱压高；上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题，一般有0.22和0.45um规格，根据您的需要选择合
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多，加之样品基质复杂，色谱柱极易被污染，是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一，通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物，堵在柱头筛板上，极易导致柱压高；上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题，一般有0.22和0.45um规格，根据您的需要选择合
反相液相色谱柱样品前处理
反相液相色谱柱样品前处理由于被分析样品种类繁多，加之样品基质复杂，色谱柱极易被污染，是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一，通常有下面两种情况。1、直径大于筛板孔径的颗粒物，堵在柱头筛板上，极易导致柱压高；上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题，一般有0.22和0.45um规格，根据您的需要选择合
反相色谱分离极性物质的高水流动相的色谱填料塌陷
在如今的色谱分析应用中，反相色谱无疑是应用的zui为广泛的色谱分离模式.但是当用反相色谱法分离极性化合物时，因为溶解度的因素很多极性化合物更适用于用高水流动相，有的甚至要在非常高的水流动相时色谱柱才具有保留能力，一些非常高极性的化合物甚至要用100%的水作流动相.而反相色谱柱的固定相通常疏水性很强，
高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分介绍
应按各品种项下的规定，常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检
流动相色谱柱怎么使用？
1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用
色谱柱填料贯流色谱填料
贯流色谱填料贯流色谱是20世纪80年代末至90年代初发展起来的一种色谱分离新方法。在这种填料上，既有通常的微孔或大孔，例如50~150nm的微孔，又有贯穿整个颗粒的，孔径约600~800nm超大孔存在。这种贯穿的大孔，可以允许流动相直接进入填料颗粒的内部并贯穿而过。这样，就相当于极大地降低了填料颗粒
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装：1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装：1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳
如何区分正相色谱柱和反相色谱柱
本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明：1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。 由于硅胶
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装 1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积，进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线，同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前，确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。 2、为了使色谱柱与仪器系统
色谱柱的流动相
1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用
关于高效液相色谱法的色谱柱填料和流动相的组分介绍
应按各品种项下的规定，常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检
反相色谱柱
反相色谱柱
国产液相色谱柱的色谱填料选择解析
国产液相色谱柱的构造由柱管、填料压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70 kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管。为提高柱效，减小管壁效应，管内壁要求有很高的光洁度，不锈钢柱内壁多经过抛光。色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，孔径0
反相液相色谱柱应当怎样维护和使用
反相液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色谱条件下，流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液，并加一定比例的能与水互溶
高效液相色谱仪色谱柱的填料及正相色谱柱的使用方法
高效液相色谱仪色谱柱的填料： 在填料和流动相之间进行液相色谱柱分离。液相色谱柱的分类取决于填料的类型。 正相柱：硅胶主要用作柱填料。按形状可分为无定形和球形两种，其粒径在3-10um之间另一种正相填料是硅胶表面键合-CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶 反相柱：硅胶表面结合十八
色谱柱填料整体柱
整体柱整体柱又称整体固定相、棒柱、连续床等，是在柱管内原位聚合或固定化了的连续整体多孔结构，可根据需要对整体材料的表面作相应的衍生化，是一种新型的用于分离分析或作为反应器的多孔介质。通过控制聚合条件来得到具有理想孔径分布的整体柱。整体柱中的空间由聚合物颗粒中的孔和颗粒间的缝隙组成，分离在样品流经孔结
色谱柱填料石墨化碳填料
石墨化碳填料硅胶的化学稳定性较差，仅能在pH=2~8的环境下工作。但是，在很多场合下，需要使用极端的pH条件。为此，人们曾大力发展高分子微球、氧化铝、氧化锆等化学稳定性更好的基质材料。但是，很难有一种材料能全面地满足液相色谱基质的要求。例如，高分子微球在有机溶剂中会发生一些溶胀，因此难以应用于以含有
正相色谱柱和反相色谱柱的适用范围
反相柱用于大多数HPLC分析，主要用来做含量分析。正相柱主要用于分离手性化合物，主要用于测试ee值，dr值等。前者流动相一般为与水混溶的溶剂，如水-甲醇，乙腈，甚至加入无机盐配成缓冲溶液，而后者往往用正戊烷等憎水溶剂。正相柱对溶剂中的水有一定要求，过多的水会使其损坏。
正相色谱柱和反相色谱柱的适用范围
反相柱用于大多数HPLC分析，主要用来做含量分析。正相柱主要用于分离手性化合物，主要用于测试ee值，dr值等。前者流动相一般为与水混溶的溶剂，如水-甲醇，乙腈，甚至加入无机盐配成缓冲溶液，而后者往往用正戊烷等憎水溶剂。正相柱对溶剂中的水有一定要求，过多的水会使其损坏。
反相液相色谱中流动相pH的确定
反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定 反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中，选择正确的缓冲液PH值，对可离解的化合物分析的重现性十分重要，不恰当的PH值可能导致不对称峰，宽峰，分裂峰或肩峰，而尖锐的，对称的峰是定量分析中获得低的检测限以，两次分析之间较低的相对标准偏差（
液相色谱柱的填料有哪些
液相色谱柱的填料基质：1、硅胶基质- pH 2-8：高或低pH下，硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14：化学修饰困难。3、聚合物基质 - pH1-14：孔结构复杂，孔径不均匀导致柱效不够高，有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。
液相色谱柱的填料有哪些
液相色谱柱的填料基质：1、硅胶基质- pH 2-8：高或低pH下，硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14：化学修饰困难。3、聚合物基质 - pH1-14：孔结构复杂，孔径不均匀导致柱效不够高，有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。
液相色谱柱的填料有哪些
液相色谱柱的填料基质：1、硅胶基质- pH 2-8：高或低pH下，硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14：化学修饰困难。3、聚合物基质 - pH1-14：孔结构复杂，孔径不均匀导致柱效不够高，有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。
液相色谱柱怎样选择填料粒度
液相色谱柱怎样选择填料粒度目前，商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售，而目前分析分离主要用3,5和10um填料，填料的粒度主要影响填充柱的两个参数，即柱效和背压。粒度越小， 填充柱 的柱效越高；小于3um的填料应用，在相同选择性条件下，提高柱效可提高分离度，但不是*的因素。如果固定相选择
液相色谱柱的填料有哪些
液相色谱柱的填料基质：1、硅胶基质- pH 2-8：高或低pH下，硅胶会溶解。2、Al2O3·nH2O - pH1-14：化学修饰困难。3、聚合物基质 - pH1-14：孔结构复杂，孔径不均匀导致柱效不够高，有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损。
液相色谱柱的填料有哪些
常见色谱柱中的填料分类1、液相a、反相（与离子对）方法C18（十八烷基或ODS）----------- 普适性好；保留性强，用途广C8（辛基） -----------与C18相似，但保留值稍小C3，C4 -----------保留值小；大多用于肽类与蛋白质C1【三甲基硅烷（TMS）】------保留