色谱及质谱常用定量方法
色谱及质谱检测中往往需要对目标物质进行定量,目前使用较多的定量方法有面积归一化法、外标法、内标法、标准加入法等。 定量分析基本要求: 1、纯物质做标准 2、被定量组分峰要与其它峰达到基线分离(质谱可不满足) 3、符合定性参数要求 4、选择合适的定量方法 定量分析基本公式: 在某些条件限定下,被测组分浓度与检测器的响应值成正比关系。(蒸发光散射检测器浓度与峰面积不成线性,分别取对数后成线性) Ci=fiAi或Ci=fiHi Ci:组分浓度 fi:响应因子(与组分的理化性质和检测器的性质有关) Ai:组分响应面积 Hi:组分响应高度 实际修饰公式:Y=aX+b 一、面积归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法。当样品中所有组分均能流出色谱柱,—并在检测器上都能产生信号的样品,可用归一化法定量,其中组分i的质量分数可按式计算: 归一化法定量的主要问题是质量校正因子的测定......阅读全文
色谱及质谱常用定量方法
色谱及质谱检测中往往需要对目标物质进行定量,目前使用较多的定量方法有面积归一化法、外标法、内标法、标准加入法等。 定量分析基本要求: 1、纯物质做标准 2、被定量组分峰要与其它峰达到基线分离(质谱可不满足) 3、符合定性参数要求 4、选择合适的定量方法 定量分析基本公式: 在某些条
质谱定量方法
外标法1.单点校正法单点校正法实际上是利用原点作为标准曲线上的另一个点,当方法存在系统误差时(即,标准工作曲线不通过原点),单点校正法的误差较大。☞以纯溶剂配制标准工作溶液GB/T21317-2007动物源性食品中四环素类兽药残留量检测方法“根据样液中被测四环素类兽药残留的含量情况,选定峰高相近的标
色谱定量方法:标准加入法内标法外标法
色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是:组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。 以内标法为例,选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组
高效液相色谱法常用的定量方法内标法
内标法 按品种正文项下的规定,精密称(量)取对照品和内标物质,分别配成溶液,各精密量取适量,混合配成校正因子测定用的对照溶液。取一定量进样,记录色谱图。测量对照品和内标物质的峰面积或峰高,按下式计算校正因子: 式中 AS为内标物质的峰面积或峰高; AR为对照品的峰面积或峰高; cs为内标
质谱定量的两种方法
说过了为什么质谱可以定量,下面我们来看看具体的定量方法。常用的定量方法有两种,外标法与内标法。外标法用已知量的标准样品A和未知量的待测样品A分别进行实验;我们会得到以下三个信息:标准样品的量(已知);标准样品的信号强度;待测样品的信号强度。(假设样品的响应=常数*浓度,从这三个信息即可算出待测样品的
色谱定量分析之内标法
内标法是色谱定量分析中是一种重要技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。 内标物的选择 采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作
气相色谱的内标法定量时,内标物需具备什么条件
色谱分析常用的定量方法:归一化法、内标法和内加(增量)内标法、外标法。 1、面积归一化法优点是简便、准确,当操作条件变化时对结果影响较小,宜于分析多组分试样中各组分的含量。但是试样中所有组分必须全部出峰,因此,此法在使用中受到一定限制。 2、外标法是用纯物质配成一系列不同浓度的标准溶液(或直接购
气相色谱和质谱联哪个定性哪个定量
气相色谱既可定性也可以定量,质谱仪是定性的,但是气相色谱-质谱联用仪就可以两用
气相色谱的内标法定量分析
内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积(或峰高)及相对校正因子,按下列公式和方法即可求出被测组分在样品中的百分含量:校正因子(f):f= (As/ms)/(Ar/mr)其中As和Ar分别为内标物和对照品
高效液相色谱法定量测定介绍内标法
采用不加校正因子的峰面积法。取供试品,按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图Ⅰ;再配制含有内标物质的供试品溶液,在同样的条件下注样,记录色谱图Ⅱ。记录的时间除另有规定外,应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数,色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30%以上,否则应调
色谱仪定量分析之内标法
色谱仪定量分析的内标法是利用被测组分与内标物的的相对校正因子的比值不变进行定量的方法。一、计算方法: mi/ms =(fi′Ai)/(fs′As) Ci% =(mi/m)×100% =(fi′Aims)/(fs′Asm)×100% =(fi′/fs′)×(Ai/As)×(
液相色谱质谱联用分类方法
液相色谱质谱联用仪类型有多种。1、按分析目的可分:实验室液相色谱质谱联用仪和工业液相色谱质谱联用仪。2、按分析规模可分:小型液相色谱质谱联用仪和大型液相色谱质谱联用仪。3、按质量分析器的时空属性可分:时间型液相色谱质谱联用仪和空间液相色谱质谱联用仪。4、按分辨率可分:低分辨液相色谱质谱联用仪、中分辨
色谱质谱联用
色谱质谱联用中最典型的应用为气相色谱质谱法(Gas Chromatography-Mass Spectrometry, GC-MS)以及液相色谱质谱法(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry)。 其优势在于通过色谱质谱的联用,解决了质谱中如果离子之间质量
色谱质谱联用
(1)气相色谱-质谱联用在色谱联用仪中,气相色谱-质谱(GC-MS)联用仪是开发最早的色谱联用仪器。由于从气相色谱柱分离后的样品呈气态,流动相也是气体,与质谱的进样要求相匹配,最容易将这两种仪器联用。因此最早实现商品化的色谱联用仪器就是气相色谱-质谱联用仪。现在小型台式GC-MS已成为很多实验室的常
核酸定量内标与外标
众所周知,在实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)中模板的浓度对数值与结果Ct值呈线性关系,Ct值越小,浓度越高。根据所选取定量数学模型的差别,主要有外标定量法(外标法)和内标定量法(内标法)两种定量方法。这些数学模型就像特殊标记的尺子,把得到的Ct值测量为浓度值
质谱是怎样做到定量的?
注:这里的定量指的是待分析物的含量质谱可以通过分子量信息定性(结构),但根据我的理解,质谱信号的強度是和离子化难易相关,并不能反应待分析物的含量(定量) 作者:胡墨 1. 质谱信号强度与待分析物含量的关系 任何定量分析方法都需要建立实验测量信号与待分析物的量的关系。很幸运的是,在质谱中,
质谱相关的特殊定量细节
同位素稀释前面内标法的介绍中我们可以发现,最理想的内标物既要和待测样相同(具有相同的响应系数)又要不同(仪器可以区分二者的信号),这对矛盾的集合体就是同位素内标。由于不同同位素的化合物具有近似相同的物理化学性质,离子化时的响应通常也是相同的,而它们具有不同的质荷比m/z,即可在质谱中被区分出来。因此
质谱是怎样做到定量的?
质谱信号的强度=粒子总数 x 离子化效率(就是你说的离子化难易程度)因此采用一系列极其蛋疼的方法测定或者至少能够固定(以LCMSMS为例,就是优化电压,喷雾角度,流动相组成比例,三气的流量,基质的组成全部固定下来)特定方式下的离子化效率,质谱是可以用于定量的。举个栗子,调谐好系统之后,你喷入1ppb
质谱联用气相色谱技术测定方法
总离子流色谱法(totalionizationchromatography,TIC)——类似于GC图谱,用于定量。反复扫描法(repetitivescanningmethod,RSM)——按一定间隔时间反复扫描,自动测量、运算,制得各个组分的质谱图,可进行定性。质量色谱法(masschromatog
质谱-色谱-光谱-波谱
质谱分析法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。被分析的样品首先要离子化,然后利用不同离子在电场或磁场的运动行为的不同,把离子按质荷比(m/z)分开而得到质谱,通过样品的质谱和相关信息,可以得到样品的定性定量结果。 色谱法,又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利
色谱质谱联用技术
色谱质谱联用技术 一、联用技术的必要性 每种分析方法都有其特长和局限性。在线联用不仅能取长补短,而且还具有协同作用,获得两种技术单独使用时所不具备的某些功能。 色谱用于分离,而光谱用于结构鉴定,两者联用,不仅可以对混合物中的各未知组分进行定性,也可用于定量分析。 二、气相色谱-质谱联用(
液质定性定量及谱图分析
液质分析 质量定量分析 1、要用目标离子的碎片定量,特征性强,排除干扰; 2、在定量分析的方法设置上,尽可能提高扫描速率,提高准确率和重复性(可以通过a减小扫描质量数的范围来提高目标峰的扫描次数,或 将一个样品全部分析时间断分成n个segments,对目标离子单独设置扫描模式); 3、一
内标对定量PCR的影响
若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标,则PCR反应变为双重PCR,双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争,尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时,这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的,所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因,传统定量方法虽然加入内标,但
外标和内标定量公式
外标:Wi=AiWs/As、内标法:f=(As/ms)/(Ar/mr)仪器分析常用的方法之一,是比较法的一种。与内标法相比,外标法不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定,把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质
实时荧光定量PCR无需内标
1.实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。1)Ct值的重现性:PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),
内标法定量有何优点
一、优点1、测定的结果较为准确,由于是通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的,因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。2、操作过程中样品和内标是混合在一起注入色谱柱,因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定,上样体积的变化不会影响影响定量结果。3、内标法抵消了上样体积
外标和内标定量公式
外标:Wi=AiWs/As、内标法:f=(As/ms)/(Ar/mr)仪器分析常用的方法之一,是比较法的一种。与内标法相比,外标法不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定,把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质
气相色谱定量分析中会用到内标法
色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是:组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见气相色谱定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法、标准曲线法等。本文小编主要说说定量分析法之一-内标法一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,将一定重量的纯物质作为内
色谱仪定量分析之内标标准曲线法
色谱仪分析中用内标法计算被测组分含量的公式为: Ci% =(fi′/fs′)×(Ai/As)×(ms/m)×100%式中:Ci%为被测组分i的百分含量。Ai为被测组分i的峰面积。As为内标物的峰面积。fi′为被测组分i的相对质量校正因子。fs′为内标物的相对质量校正因子。m为被测样品的