盘点:31项与免疫学有关的分子生物学实验技术

现代分子生物学和免疫学的进展加深了我们对许多疾病的了解,并且导致了免疫新策略的产生,免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。本文盘点了与免疫学有关的分子生物学实验技术汇总。 一、GST pull-down实验 GST是指谷胱甘肽巯基转移酶,GST pull-down实验是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青睐。 GST pull-down实验是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”;目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过SDS-PAGE电泳分析,从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白;“诱饵蛋白”和“捕获蛋白”均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。 二、足迹法(Footprinting) 足迹法全称为DNA footpr......阅读全文

免疫学技术专题:组织病理实验(一)

标签: 组织病理组织学技术包括、组织学制片技术、胚胎学制片技术、组织化学技术、荧光组化及免疫组化技术、组织培养技术、各种特殊显微技术、电镜组织学技术。组织学技术不但应用于组织学本学科,并且广泛应用于其他多学科,如生物学、解剖学、病理学、肿瘤学、法医学、临床诊断学等。实验方法石蜡切片法冰冻切片实验方法

分子生物学常用实验技术(page-1)

第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定 第二章DNA 酶切及凝胶电泳 第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第六章基因组DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技术 第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第九章分

分子生物学常用实验技术(page-3)

分子杂交技术    互补的核苷酸序列通过Walson-Crick 碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA 分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DN

分子生物学常用实验技术(page-2)

一、RNA 制备   模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人

免疫学实验免疫学检测介绍

免疫学检测介绍:  免疫学检测是机体识别“自身”与“非己”抗原,对自身抗体形成天然免疫耐受,对“非己”抗原产生排斥作用的一种生理功能的检测。正常情况下,这种生理功能对机体有益,可产生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和稳定的免疫保护作用。在一定条件下,当免疫功能失调时,也会对机体产生有害的反应和结果,

一些分子生物学实验小技术2

5.有关融合蛋白表达载体的克隆 在构建融含蛋白表达载体时除了要注意插入片段的方向、读码框架与载体保持一致外,注意以下问题可能会减少一些不必要的麻烦,当外源片的插入载体起始密码的后面,另一个基因的前面时,注意检查插入后基因的两端是否引入了新的终止密码,特别是用到Klenow mung bean

一些分子生物学实验小技术汇编

1.保存菌种保存菌种或长时间放置的培养板应先划板活化菌种,挑取分隔良好的单 克隆接种于2-10 ml LB中(如菌种含质粒则应加抗生素)37摄氏度快摇 8小时,按0.1%-0.5% 比例转种,培养基的量不应超过锥瓶的0.25容量,以 保证足够的通气。用O.D.600 测菌密度时,读数值在0.1-0.

一些分子生物学实验小技术1

1.保存菌种保存菌种或长时间放置的培养板应先划板活化菌种,挑取分隔良好的单 克隆接种于2-10 ml LB中(如菌种含质粒则应加抗生素)37摄氏度快摇 8小时,按0.1%-0.5% 比例转种,培养基的量不应超过锥瓶的0.25容量,以 保证足够的通气。用O.D.600 测菌密度时,读数值在0.

免疫学实验动物实验介绍

  动物实验介绍:  动物实验是在实验室内,为了获得有关生物学、医学等方面的新知识或解决具体问题而使用动物 进行的科学研究。动物实验必须由经过培训的、具备研究学位或专 业技术能力的人员进行或在其指导下进行。  动物实验正常值:  无  动物实验临床意义:  实验动物科学发展的最终目的,就是要通过对动

免疫学实验凝集实验介绍

凝集实验介绍:  凝集实验是血清学试验方法中的一种,血清学试验是抗原抗体在体外出现可见反应的总称,故又称抗原抗体反应。它可以用已知抗体(细菌抗血清)检测未知抗原(待检细菌);也可用已知抗原(已知病原菌)检测患者血清中的相应抗体及其效价,是临床诊断、实验室研究和细菌学鉴定的重要手段之一。凝集实验正常值

免疫学实验详解

使用方法:① 对光 转动转换器,将低倍镜镜头(4 倍、10 倍)转至载物台中央透光孔位置,打开透光光阑,对光,直至目镜中出现光线最明亮、最均匀的视场为止。显微镜的光源可分为内置光源和外置照明。内置光源:接通电源,按下底座的开关,电源打开即可。外置光源:将光圈放到最大位置,在用眼睛观察目镜的同时,

免疫学实验比较

免疫学三大工具,免疫组化、Western、ELISA,分别用于定位,定性和定量。 IHC(免疫组化Immunohistochemistry)是融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和组织学技术(组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等),通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、

分子生物学实验的品质选择——分子生物学实验用水

 Merck Millipore 是世界*超纯水生产品牌,生产产品具有始终如一的高品质,实验重复性优异。纯水是一种生化试剂,为了给广大实验者在日常实验中提供便利,保证无意外发生,Millipore推出了分子生物学瓶装水。该瓶装水具有以下特点可以保证您的分子生物学实验顺利进行:            

免疫学实验免疫学实验细胞免疫检查介绍介绍

  隐球菌病胶乳凝集试验介绍:   胶乳凝集试验检测新生隐球菌荚膜多糖抗原,是一种简便、快速、有效诊断隐球菌感染的实验室方法。它以胶乳颗粒为载体,表面连接有抗新生隐球菌抗体,形成致敏胶乳悬液, 如标本(血清、胸腔积液、支气管肺泡灌洗液或脑脊液)中含有一定量的隐球菌荚膜多糖抗原,则可产生肉眼可见的凝

免疫学实验固相酶免疫测定技术介绍

  固相酶免疫测定技术介绍:   固相酶免疫测定主要是指ELISA,其基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面(包被),并保持其免疫活性;用酶标记(另一种)抗原或抗体,保留其免疫活性和酶活性;在测定时,把待测标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起

分子生物学实验设备

分子生物学实验设备 1) 温度控制系统:冰箱:4 ℃、-20℃、-70 ℃--样品、 试剂 和材料等的保存 2) 恒温培养箱:细菌平板的培养 3) 恒温空气摇床;菌体的培养 4) 灭菌器: 培养基、 试剂 、耗材等的灭菌 5) PCR仪:PCR 扩增、保温实验等 6) 恒温水浴及微量加热器:保证实验

免疫学实验基因诊断技术检测梅毒螺旋体介绍

  基因诊断技术检测梅毒螺旋体介绍:  基因诊断技术检测梅毒螺旋体是利用基因诊断技术对是否被感染梅毒进行鉴别的检查方法。  基因诊断技术检测梅毒螺旋体正常值:  试验呈阴性,即是未检出有梅毒螺旋体DNA。  基因诊断技术检测梅毒螺旋体临床意义:  非梅毒螺旋体抗原血清试验目前一般作为筛选和定量试验,

分子生物学技术都包括哪些技术

  分子生物学技术:  PCR、分子克隆、核酸电泳、琼脂糖凝胶电泳测序、DNA,  RNA  提取、转化外源DNA、体外转录、逆转录、cDNA文库构建、原位杂交、酵母双杂交、差减杂交、扣除杂交、蓝白斑筛选、抗生素筛选  、基因工程技术大部分都是依据分子生物学原理设计出来的。  分子生物学的基本含义 

免疫学实验皮肤斑贴实验介绍

  皮肤斑贴实验介绍:  皮肤斑贴实验是研究毒物对皮肤毒性的实验方法之一。把数层纱布折叠成一定大小(方形每边1cm,圆形直径1cm),将受试物原液或稀释液沾湿纱布后紧贴于皮肤上,外盖一层油纸或塑料薄膜,用绷带固定。一般12小时或24小后解开,观察局部反应。  皮肤斑贴实验正常值:  正常人为阴性(-

常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍

核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的

常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍!

  常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍!   核酸分子杂交技术   由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定

生物化学与分子生物学最常用的实验技术

分子细胞生物学研究所用的实验技术有哪些分子诊断学的研究范畴包括:利用遗传学、病理学、免疫学、生物化学、基因组学、蛋白质组学和分子生物学的理论和方法探讨疾病发生和发展的分子机制。为整个疾病过程寻求特异的分子诊断指标,以及利用分子生物学技术为这些分子诊断指标建立临床实用的检测方法。细胞培养技术指的是细胞

常用分子生物学和细胞生物学实验技术介绍!

  核酸分子杂交技术   由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成

分子生物学技术的分类

目前,常用的分子生物学技术有如下几种 : PCR- 单链构象多态性分析(PCR- single strand conformation analysis,PCR- SSCP) 是近年来在基因突变检测中运用最广泛的方法之一。PCR- SSCP 技术凭借突变可引起单链DNA三级构象改变,通过观察单链DN

分子生物学技术的应用

  分子生物学技术:可应用于遗传性疾病的研究和病原体的检测及肿瘤的病因学、发病学、诊断和治疗等方面的研究提高到了基因分子水平。  生物学定义:生物学是研究生命现象和生物活动规律的科学。  据研究对象分为动物学、植物学、微生物学、古生物学等;依研究内容,分为分类学、解剖学、生理学、细胞学、分子生物学、

分子生物学技术的分类

  目前,常用的分子生物学技术有如下几种[1]:  PCR单链构象多态性分析  PCR-单链构象多态性分析(PCR -single strand conformation analysis,PCR -SSCP) 是近年来在基因突变检测中运用最广泛的方法之一。PCR -SSCP 技术凭借突变可引起单链

口蹄疫分子生物学诊断技术

近年来,由于分子生物学技术的迅速发展及其在FMD诊断中的应用,建立了各种FMD的分子生物学诊断技术,主要包括以下几种方法,核酸杂交、等电点聚焦电泳、寡核苷酸指纹图谱分析、聚丙烯酰胺凝胶电泳、聚合酶链式反应、单克隆抗体技术等。(1)核酸探针 核酸探针即应用FMD的cDNA克隆片段,用32P或生物素等标

免疫学技术:悬浮细胞的免疫荧光标记实验

免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。实验方法基本方案实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒

免疫学实验华氏反应介绍

华氏反应介绍:   华氏反应(WT)是诊断第三期梅毒和神经性梅毒的血清学反应。机体感染梅毒螺旋体经过一定时间后,其血清中逐渐产生一种抗体,能与牛心肌中提取的"心类脂体"发生补体结合反应。 华氏反应正常值: 正常人为阴性。 华氏反应临床意义:   一般于下疳发生10天以后,梅毒血清反应逐渐呈

免疫学实验狄克试验介绍

狄克试验介绍:  狄克试验试是利用链球菌感染后机体可产生特异性抗体(抗红疹毒素抗体),抗体一旦产生即具有免疫力,此时如皮下注射红疹毒素,便不再产生皮疹的原理进行的一种试验。因此,利用皮下注射红疹毒素后局部反应,可了解受试者对链球菌的免疫能力。狄克试验正常值:  1.试验臂出现直径>10mm的红斑,对