科学家在仿生抗冻蛋白领域取得新进展

低温冷冻保存是上个世纪70年代迅速发展起来的一种在低温或超低温条件下保存细胞、组织和器官等生物材料的技术,能够有效保证生物材料的遗传和形态稳定性,在生物学、医学、农学等领域具有广泛的应用前景。然而在低温保存过程中冰晶的不可控生长会大大损伤细胞等保存对象。目前采用的冷冻保存液,比如甘油、二甲基亚砜等,有抑制冰晶生长效率低、高毒性和使细胞脱水死亡的问题。 最近,中国科学院化学研究所绿色印刷重点实验室研究员王健君与中国科学院上海应用物理研究所副研究员石国升、研究员方海平合作,基于抗冻蛋白能使生活于寒冷地区的生物体避免冰冻造成危害的特性,深入研究了抗冻蛋白能够有效地降低结冰温度、抑制冰晶生长和重结晶的作用机制。发现这类蛋白的冰吸附面(ice binding face)上亲疏水相间官能团(甲基和羟基)的有序排列,使其表面形成类冰水,从而能够选择性吸附到冰晶表面,抑制冰晶的生长(PNAS, 2016, doi: 10.1073/pna......阅读全文

细胞冷冻保存

实验概要细胞的冷冻保存实验材料材料: 1  生长良好之培养细胞 2  新鲜培养基 3  DMSO (Sigma D-2650) 4  无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020) 5  0.4 % w/v trypan blue (GibcoBRL 15250-061) 6  血球计数盘

冷冻保存细胞方法

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃(30-60 分钟)→-20℃( 30 分钟) → -80℃(16-18 小时或隔夜)→ 液氮罐长期储存。冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80 ℃以下, 再放入液氮中长期储存。注意:-20℃不可超过1 小时,以防止冰晶过大,造

细胞的冷冻保存

1. 注意事项:1.1. 欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态,约为80 – 90 %致密度。1.2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。不宜将冻存细胞放置在0℃~-60℃这一温度范围内过久,低温损

细菌冷冻保存方法

实验概要速冻,是将样品快速用干冰或液氮保存于-70°C或更低的温度中。速冻能够达到和缓慢控速冷冻相同的目的,效果大约为  -10-1000°C/min,但达不到-1°C  /分钟。用CoolRack®液速冻样本能够保持样本体积的稳定、组织结构完整、恒定的冻结参数,快速免提样本是能避免丢失或污染的样品

病毒的保存实验——冷冻干燥保存

病毒是具有生物活性的最小微生物,由于其结构复杂,各种类型的病毒对物理、化学作用的反应有所不同(温度、 pH 、盐类等)。保存病毒首先必须了解各种病毒的性质,才能恰当的选择保存剂和保护方法。来源:《病毒学检验》实验方法原理含水物质首先经过冷冻,然后在真空中使水分升华,干燥,在这种低温、干燥和缺氧环境下

细胞冷冻保存的方法

1、材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)。2、冷冻保存方法:

冷冻保存细胞的方法

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 °C 30~60 分钟→ (-20 °C30 分钟*) → -80 °C 16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。 冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 °C 至–80 °C 以下, 再放入液氮槽vap

冷冻保存细胞的方法介绍?

冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C30-0分钟→(-20°C30分钟*)→-80°C16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vaporphase长期储存。*-20°C不可超过1小时

胚胎冷冻保存技术的发展

由于体外受精-胚胎移植的高昂费用、有限成功率和多余胚胎的存在,以及政策和伦理对胚胎移植数目的限制,从最大限度地保护患者利益出发,应尽可能提高每一取卵周期的临床妊娠率,因而胚胎冷冻技术极为重要。胚胎冷冻造成细胞损伤机制胚胎冷冻对活组织和细胞进行冷冻保存时,冷冻过程将可能对细胞造成损伤。主要的损伤机制包

细胞冷冻保存方法、注意事项

1.1. 欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态,约为80 – 90 %致密度。1.2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。1.3. 注意冷冻保护剂之品质。DMSO 应为试剂级等级,无菌且无色(以0.

器官冷冻长期保存或成现实

  “我们研发了一种给冷冻组织快速加温的独特技术,它不会损害组织细胞的活性。”明尼苏达大学生物医学工程和机械工程系教授约翰·碧绍夫接受科技日报记者采访时表示,这无疑克服了移植医学中的一个重大障碍,或使器官冷冻保存成为现实。  碧绍夫说,因无法在冰上保存超过4个小时,每年有超过60%的心脏和肺脏捐助器

纯化产品的冷冻干燥保存

纯化产品的冷冻干燥保存一、冷冻干燥的原理、优点冷冻干燥就是把含有大量水份物质预先冻结成固体,然后在真空条件下适当加热使水蒸气直接从固体中升华出来,而物质本身留在冻结时的冰架子中,因此干燥后的产品体积几乎不变。整个干燥是在较低的温度下进行的。冷冻干燥的优点:1.低温冷冻干燥对许多热敏性物质特别使用。如

纯化产品的冷冻干燥保存

纯化产品的冷冻干燥保存一、冷冻干燥的原理、优点冷冻干燥就是把含有大量水份物质预先冻结成固体,然后在真空条件下适当加热使水蒸气直接从固体中升华出来,而物质本身留在冻结时的冰架子中,因此干燥后的产品体积几乎不变。整个干燥是在较低的温度下进行的。冷冻干燥的优点:低温冷冻干燥对许多热敏性物质特别使用。如蛋白

细胞冷冻保存、冷冻细胞活化以及细胞计数与存活测试

一、细胞冷冻保存 1、材料: 生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等

ATCC细胞的冷冻保存与解冻方法!

一、细胞冷冻保存1、材料生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)。2、

正确冷冻保存细胞的方法和步骤

  细胞越来越受广大科研者的喜爱,但细胞不像人们想象中那么强大,在培养复苏等过程中稍有不慎就不可能导致它的死亡。而且它必须是是在无污染的条件下培养,复苏才能保证实验效果。在此总结一下细胞的正确冷冻保存方法、保存详细步骤,相关注意事项如下:   一、保存方法(主要有两个):   (1)传统方法:冷

通用细胞冷冻保存的优点有哪些

冷冻保存细胞的优点如下:1、减少基因漂移;2、减缓细胞系的衰老;3、稳定表型;4、减少微生物污染及交叉污染机会等。细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获稀释,稀释后的细胞浓

科学家在仿生抗冻蛋白领域取得新进展

  低温冷冻保存是上个世纪70年代迅速发展起来的一种在低温或超低温条件下保存细胞、组织和器官等生物材料的技术,能够有效保证生物材料的遗传和形态稳定性,在生物学、医学、农学等领域具有广泛的应用前景。然而在低温保存过程中冰晶的不可控生长会大大损伤细胞等保存对象。目前采用的冷冻保存液,比如甘油、二甲基亚砜

细胞冷冻保存时,细胞冷冻管内的细胞浓度如何限定?

冷冻管内细胞数目一般为1x106cells/mlvial,融合瘤细胞则以5x106cells/mlvial为宜。

中科院化学所在仿生抗冻蛋白领域取得新进展

  最近,中科院化学所和中科院上海应用物理所研究者合作,基于抗冻蛋白能使生活于寒冷地区的生物体避免冰冻造成危害的特性,深入研究了抗冻蛋白能够有效地降低结冰温度、抑制冰晶生长和重结晶的作用机制。他们发现这类蛋白的冰吸附面上亲疏水相间官能团(甲基和羟基)的有序排列,使其表面形成类冰水,从而能够选择性吸附

冷冻卵子:如何保存女性的生育力?

  当人们想到女性冷冻卵子时,通常会认为是一个女人想要在事业上获得成功而推迟做母亲的一种方式,有些公司甚至为其女性员工提供了类似这样的资助。卵子冷冻通常是对没有准备好做母亲的女性进行一项手术,从其卵巢中取出一些健康的卵子以备将来使用。这项技术的支持者指出,有数据显示,使用一种新型的卵子冷冻技术能够有

细胞欲冷冻保存时,-细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?

冷冻管内细胞数目一般为1x106 cells/ml vial, 融合瘤细胞则以5x106 cells/ml vial 为宜。

天然的抗冻剂催生新的细菌冷冻保存技术

  华威大学化学系和华威医学院的研究人员近日开发出一种新方法,利用极地生物中的天然抗冻蛋白来冷冻保存各种细菌。他们发现这种蛋白模拟物能够减慢冰晶的形成,并防止冰晶破坏细菌细胞。  这种新颖的方法前不久发表在《Biomacromolecules》杂志上。它有望应用于生命科学研究中各种细菌的保存以及食品

动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是什么?

动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethylsulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成。

实验室模板DNA低温冷冻保存与DNA室温保存系统优劣性能...

实验室模板DNA低温冷冻保存与DNA室温保存系统优劣性能对比低温冷冻保存占用空间大、保存不安全模板DNA的保存是法医DNA结果溯源的根本,模板DNA保存的普遍方式是低温冷冻保存,但是低温冷冻保存并不像人们理解的那样简单、有效。低温冷冻保存不仅占用的空间大,需要购置超大的低温装置,而且样品量大时需要配

关于抗冻蛋白质的简介

  这些多肽能保证这些物种在零下温度环境下生存。AFP结合到小的冰晶上,阻止冰的结晶化和晶体的生长,不然,将会对那些生命物种是致命的。越来越多的证据表明,AFP与哺乳动物细胞膜相互作用保护细胞膜不会被冻坏。关于不冻蛋白的研究提示ATF参与生物体对冷气候的适应过程。  不像广泛使用的汽车抗冻剂,乙二醇

人体冷冻保存技术正在实现中-安全解冻仍是问题

  当一个人被宣布死亡时,人体冷冻保存公司会派遣一个快速反应团队来对死者的尸体进行处理。一旦人体进入冷冻设备,就会被降温到冰点,而且血液会被取出并用保存器官的溶液进行替代。身体的血管会注入一种冷冻保护液来防止器官和组织内形成冰晶,而且尸体会被降温到零下130摄氏度并装入一个容器中,然后保存在一个零下

抗冻蛋白质的结合机制介绍

  根据鱼类美洲拟鲽中的不冻蛋白质的结构和功能的研究,展示出I型AFP分子的抗冻机制是由于AFP是通过它的四个苏氨酸残基的羟基与沿着冰的晶格方向的氧之间形成的氢键以拉链式样结合到冰的成核结构上。因而,停止或抑制冰的金字塔表面的生长,这样降低冰点。上述机制可以用来阐明具有下列两个共同的特性的其他抗冻蛋

关于抗冻蛋白质的进化介绍

  APF显著的多样性和分布提示进化成不同类型是相应1-2百万年前在北半球发生和1千万-3千万年前在南极发生的海平面冰川作用的结果。这种独立发展的相似的适应化叫做趋同演化(进化)。为什么许多类型的AFP尽管它们具有多样性,但是却能执行相同的功能。这有两个原因:  1、尽管冰是统一由氧和氢构成的,它有

简述抗冻蛋白质的作用机制

  人们认为AFP抑制冰晶的生长是靠一种吸附–抑制机制。它们被吸附到冰的非底平面,从而,从热力学角度不利于冰的生长。在一些AFP上存在平的、刚性表面看来有利于该AFP与冰通过范德华力(Van der Waals force)发生表面互补性相互作用。