凝胶色谱仪常见故障断定及解决方法

凝胶色谱又称分子排阻色谱法,主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试,在生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用。以下是凝胶色谱仪在使用过程中出现的常见故障的断定及解决方法: (一)保留时间变化 1.柱温变化 柱恒温,必要时需配置恒温箱 2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱 3.缓冲液容量不够 用》25mmol/L的缓冲液 4.柱污染 每天冲洗柱 5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相 6.柱快达到寿命 采用保护柱 (二)保留时间缩短 1.流速增加 检查泵,重新设定流速 2.样品超载 降低样品量 3.键合相流失 流动相PH值保持在3"7.5检查柱的方向 4.流动相组成变化 防止流动相蒸发或沉淀 5.温度增加 柱恒温 (三)保留时间延长 1.流速下降 管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡 2.硅胶柱上活性点......阅读全文

色谱柱的流动相

1、在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用

凝胶色谱仪流动相

凝胶色谱仪流动相的作用原则上不象在其它液相色谱仪中那样重要,这是由于它的分离并不依赖于样品组分与填料和流动相之间的相互作用,因此对于流动相的选择考虑较为简单,主要要求粘度低、沸点高、能溶解多种大分子样品和能润湿填料等。为了减小溶剂粘度(以降低柱压)和增加样品的溶解度,色谱柱温度通常高于室温。流动相必

流动相色谱柱怎么使用?

1、在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用

凝胶色谱仪流动相概述

凝胶色谱仪流动相的作用原则上不象在其它液相色谱仪中那样重要,这是由于它的分离并不依赖于样品组分与填料和流动相之间的相互作用,因此对于流动相的选择考虑较为简单,主要要求粘度低、沸点高、能溶解多种大分子样品和能润湿填料等。为了减小溶剂粘度(以降低柱压)和增加样品的溶解度,色谱柱温度通常高于室温。流动相必

如何选择气相色谱柱温

参照三个标准:温度上限,检测物质沸点。出峰情况。第一个不说了,想必你也不会2到超过上限的。第二个是指看你的检测物质的最高沸点,如果你只是检测甲醇乙醇之类的低沸点物质,只需要80℃就够了。如果你的检测物质是甲苯,至少要150左右吧。第三个比较重要。如果你一台仪器要识别十几种物质的话,就要根据出峰时间划

如何选择气相色谱柱温

如何选择气相色谱柱温柱温是一个重要的操作参数,而且柱温的变化对不同组分的影响程度不是等效的。若有两类化合物在某一柱温下不能分离,当柱温改变20℃ ,就有可能完全分离。柱温主要影响分配系数、分配比、组分在流动相中的扩散系数和在固定相中的扩散系数,从而通过影响柱选择性、柱效来影响分离度和分析时间。选择柱

高效液相色谱柱温箱

在高效液相色谱分析系统中,对色谱柱温度控制的要求越来越高,药典及诸多新的分析方法,也对柱温给出条件,由于色谱柱恒温箱可以精确、稳定的控制色谱柱的使用温度,对于提高色谱柱的柱效,改善色谱峰的分离度,缩短保留时间,降低反压,保证分析样品结果的重复性,具有不可忽视的作用。使其成为高效液相色谱仪的重要配套装

如何选择气相色谱柱温

柱温是一个重要的操作参数,而且柱温的变化对不同组分的影响程度不是等效的。若有两类化合物在某一柱温下不能分离,当柱温改变20℃ ,就有可能完全分离。柱温主要影响分配系数、分配比、组分在流动相中的扩散系数和在固定相中的扩散系数,从而通过影响柱选择性、柱效来影响分离度和分析时间。选择柱温首先要考虑到每种固

凝胶色谱仪流动相的要求

        凝胶色谱仪流动相的要求:一、流动相必须能溶解样品,必须与凝胶非常相似,这样才能润湿凝胶。采用软性凝胶时,溶剂必须能溶胀凝胶。二、溶剂粘度要小,因为高粘度溶剂往往限制分子扩散作用而影响分离效果。这对于具有低扩散系数的大分子物质分离,尤需注意。三、溶剂必须与检定器相匹配。常用的流动相有四

凝胶色谱中对流动相的要求

凝胶色谱中对流动相的要求凝胶薄层常用于高分子的非离子化合物的分离,如蛋白质及核酸等,用此法可以分离不同分子量的混合样品,常用的展开剂是水或盐类的水溶液、缓冲液等。在凝胶薄层展开剂中常加入适量的盐类,以保持其离子强度,避免在离子型样品通过凝胶薄层时导致凝胶收缩及渗透率减低。

凝胶色谱仪流动相的要求

凝胶色谱仪流动相的要求:一、流动相必须能溶解样品,必须与凝胶非常相似,这样才能润湿凝胶。采用软性凝胶时,溶剂必须能溶胀凝胶。二、溶剂粘度要小,因为高粘度溶剂往往限制分子扩散作用而影响分离效果。这对于具有低扩散系数的大分子物质分离,尤需注意。三、溶剂必须与检定器相匹配。常用的流动相有四氢呋喃、甲苯、氯

凝胶色谱仪流动相的要求

凝胶色谱仪流动相的要求:一、流动相必须能溶解样品,必须与凝胶非常相似,这样才能润湿凝胶。采用软性凝胶时,溶剂必须能溶胀凝胶。二、溶剂粘度要小,因为高粘度溶剂往往限制分子扩散作用而影响分离效果。这对于具有低扩散系数的大分子物质分离,尤需注意。三、溶剂必须与检定器相匹配。常用的流动相有四氢呋喃、甲苯、氯

气相色谱柱柱温的选择影响因素

聚乙二醇类(PEG)物质被广泛的作为气相色谱柱固定相使用。由于聚乙二醇的稳定性比聚硅氧烷要差一些,其作为固定相的色谱柱寿命较短,使用温度也相应的比聚硅氧烷固定相要低,过热或者暴露于氧气中易受到损坏。但聚乙二醇的极性比较强,对极性物质拥有不可替代的分离性能,所以仍是我们常用的固定相之一。气相色谱中,柱

气相色谱柱柱温的选择影响因素

 聚乙二醇类(PEG)物质被广泛的作为气相色谱柱固定相使用。由于聚乙二醇的稳定性比聚硅氧烷要差一些,其作为固定相的色谱柱寿命较短,使用温度也相应的比聚硅氧烷固定相要低,过热或者暴露于氧气中易受到损坏。但聚乙二醇的极性比较强,对极性物质拥有不可替代的分离性能,所以仍是我们常用的固定相之一。气相色谱中,

气相色谱柱柱温的选择影响因素

聚乙二醇类(PEG)物质被广泛的作为气相色谱柱固定相使用。由于聚乙二醇的稳定性比聚硅氧烷要差一些,其作为固定相的色谱柱寿命较短,使用温度也相应的比聚硅氧烷固定相要低,过热或者暴露于氧气中易受到损坏。但聚乙二醇的极性比较强,对极性物质拥有不可替代的分离性能,所以仍是我们常用的固定相之一。气相色谱中,柱

气相色谱柱柱温的选择影响因素

聚乙二醇类(PEG)物质被广泛的作为气相色谱柱固定相使用。由于聚乙二醇的稳定性比聚硅氧烷要差一些,其作为固定相的色谱柱寿命较短,使用温度也相应的比聚硅氧烷固定相要低,过热或者暴露于氧气中易受到损坏。但聚乙二醇的极性比较强,对极性物质拥有不可替代的分离性能,所以仍是我们常用的固定相之一。气相色谱中,柱

气相色谱柱柱温的选择影响因素

聚乙二醇类(PEG)物质被广泛的作为气相色谱柱固定相使用。由于聚乙二醇的稳定性比聚硅氧烷要差一些,其作为固定相的色谱柱寿命较短,使用温度也相应的比聚硅氧烷固定相要低,过热或者暴露于氧气中易受到损坏。但聚乙二醇的极性比较强,对极性物质拥有不可替代的分离性能,所以仍是我们常用的固定相之一。气相色谱中,柱

液相色谱柱流动相的流速的选择

  因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1mL/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8mL/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方

高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分

  应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。  在用紫外吸收检

气相色谱仪柱温的选择

气相色谱仪柱温直接影响气相色谱仪的分离效能和分析速度,是一个重要的操作参数。一、固定液的最高使用温度:每一种固定液都有最高使用温度,柱温不可超过这一温度,否则固定液会挥发流失。二、固定液的最低使用温度:每一种固定液都有最低使用温度,柱温不可低于这一温度,否则固定液呈固态。三、柱温升高:1、分离度降低

气相色谱方法柱温应该怎么选

  气相色谱法是利用气体作流动相的色层分离分析方法。汽化的试样被载气(流动相)带入色谱柱中,柱中的固定相与试样中各组份分子作用力不同,各组份从色谱柱中流出时间不同,组份彼此分离。采用适当的鉴别和记录系统,制作标出各组份流出色谱柱的时间和浓度的色谱图。  气相色谱法柱温的选择:  (1)首先应使柱温控

气相色谱法柱温的选择

柱温的选择:  (1)首先应使柱温控制在固定液的最高使用温度(超过该温度固定液易流失)和最低使用温度(低于此温度固定液以固体形式存在)范围之内。  (2)提高柱温,可以改善传质阻力,有利于提高柱效,缩短分析时间,但降低了容量因子和选择性,不利于分离。一般的原则是:在使最难分离的组分尽可能分离的前提下

气相色谱仪的柱温如何?

  气相色谱仪的柱温直接影响色谱柱的使用寿命、柱的选择性、柱效能和分析速度,是重要的操作条件。    柱温低有利于分配,有利于组分的分离。    但柱温过低,组分可能在色谱柱冷凝或传质阻力增加,使色谱峰扩张,甚至拖尾。    柱温高,虽有利于传质,但分配系数变小,不利于分离。    一般通过

怎样选择合适的气相色谱柱温

怎样选择合适的气相色谱柱温参照三个标准:温度上限,检测物质沸点。出峰情况。第一个不说了,想必你也不会2到超过上限的。第二个是指看你的检测物质的最高沸点,如果你只是检测甲醇乙醇之类的低沸点物质,只需要80℃就够了。如果你的检测物质是甲苯,至少要150左右吧。第三个比较重要。如果你一台仪器要识别十几种物

气相色谱法柱温的选择

  选择气相色谱分析的实验条件主要包括:色谱柱的选择、柱温的选择和载气的选择  (1)色谱柱的选择  主要是选择固定相和柱长。固定相选择需注意极性及最高使用温度。气一液色谱法还要注意载体的选择。高沸点样品用比表面小的载体、低固定液配比(1%-3%),以防保留时间过长,峰扩张严重。低沸点样品宜用高固定

气相色谱法柱温的选择

  选择的基本原则是:  在使最难分离的组分有符合要求的分离度的前提下,尽可能采用较低柱温。低柱温可增大分配系数,增加选择性,减少固定液流失,延长柱寿命及降低检测本底。但柱温降低,液相传质阻抗增加,而使峰扩张,柱温太低则拖尾,故以不拖尾为度。可根据样品沸点来选择柱温。  分离高沸点样品(300-40

wook500液相色谱柱流动相的配制

  wook500液相色谱柱一般的液相色谱柱由柱管、柱头螺母、死堵、筛板、还有里面的填料组成。在液相系统中起着分离的作用,是液相色谱系统的核心部件之一。柱管材质有玻璃、不锈钢、铝铜、peek以及内衬光滑的聚合材料的其他材质。一般细粒度的填料采用匀浆填充法装柱,先将填料调成匀浆,在高压泵作用下,快速将

wook500液相色谱柱流动相的配制

液相色谱柱一般的液相色谱柱由柱管、柱头螺母、死堵、筛板、还有里面的填料组成。在液相系统中起着分离的作用,是液相色谱系统的核心部件之一。柱管材质有玻璃、不锈钢、铝铜、peek以及内衬光滑的聚合材料的其他材质。一般细粒度的填料采用匀浆填充法装柱,先将填料调成匀浆,在高压泵作用下,快速将其压入装有洗脱液的

液相色谱柱流动相的使用注意事项

  (1)由于甲醇廉价,对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。  (2)对于正相柱推荐使用沸程为30-60 ℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相,没有提纯的己烷不得使用。用水最好使用超纯水(电阻率大于18兆欧),去离子水及双蒸水中含有酚类杂质,有可能影响分析结果。  (3)含水流动相最好

气相色谱中色谱柱柱温对分析结果有何影响

柱箱和色谱柱是气相色谱柱系统的重要组成部分。柱温,即色谱柱温度(或柱温箱温度),是气相色谱的三个重要温度(气化室温度、柱温箱温度和检测器温度)之一,也是最重要的一个温度。(1)问题色谱柱温度,不仅影响色谱过程的热力学因素,也影响传质过程的动力学因素。柱温变化,不仅影响柱前端压力、载气流速等,更重要的