杂交扇贝技术引领产业中兴
雄性不育且雌性可育个体的发现为海湾扇贝育种提供了珍贵材料，其可用于构建动物育种中的首个杂交扇贝不育系三系配套育种方法，是动物育种技术的重大突破，不亚于植物界推动杂交水稻育种革命的雄性不育株。 从秘鲁空运回紫扇贝，找到实现雌雄同体扇贝杂交的“诀窍”，发现杂交扇贝雄性不育的材料，利用杂交后代进行种质创新，青岛农业大学教授王春德谦虚地说：“到目前为止，我也只做了一件事。” 良种是水产养殖业的基础，王春德的“这件事”实现了扇贝育种的重大技术突破，事关我国扇贝产业的中兴。近日《中国科学报》记者对王春德进行了专访，看这位育种专家是如何进行杂交扇贝的育种研发和推广的。 初见倾心 初试成功 距离第一批秘鲁紫扇贝登陆中国已经整整10年了，王春德还记得初见它时的兴奋。 紫扇贝紫红的壳非常漂亮，个体大的可达到15厘米，而且肉柱肥大、肉质鲜美，加工成半壳贝在欧美市场非常受欢迎，每磅价格接近5美元，而同期在美国市场中国产的海湾扇贝柱的价格常......阅读全文
Northern杂交
转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交，从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异，可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后，在适于探针和固定的靶 RNA 杂交的条件下将膜同探针孵育，而后广泛洗膜以去除非特异结合的探针，
Western－杂交
Western 杂交（主要内容如下）Preparing of Protein LysatesWestern BlottingFar Western BlottingSemi Dry BlottingStripping MembranesTrouble Shooting and OthersPrepa
Western杂交
Western杂交l 组织印迹的Western杂交在硝酸纤维素膜上制备组织印迹1．在塑料板上放置两层Whatman 1号滤纸，在滤纸上方放上一张普通纸，然后铺上一层硝酸纤维素膜。2．用双面刀片从植物组织如大豆的茎上切取一块切片（厚度约为1mm）。如果组织表面是湿的，则在Kimwipes纸上
细胞杂交
实验材料 PEG 试剂、试剂盒 完全培养基 无血清培养基 NaOH
Southen杂交
Southern杂交One important thing for transfer:the weight of the object resting on top of the blotting apparatus should not exceed the weight equal to a 5
分子杂交
一、杂交通过碱基对之间非共价键（主要是氢键）的形成即出现稳定的双链区，这是核酸分子杂交的基础。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链。分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的
细胞杂交
在悬浮或单层培养细胞体系中融合细胞，用 PEG 处理细胞的时间应很短，以减少细胞的死亡。通常，在使用选择性培养基前，需给细胞 24 h 的恢复期。实验材料PEG试剂、试剂盒完全培养基无血清培养基NaOH仪器、耗材皮氏培养皿通用容器实验步骤PEG 1000 ( Merck)：(a) 髙压处理PEG，将
Northern杂交
Northern杂交1．在10~20 ml 预杂交液中68℃温育膜2h。2．若使用双链探针，在100℃下加热32P标记的双链DNA 5 min，使之变性，然后迅速移至冰水中冷却。3．把变性的或单链放射性标记的探针直接加到预杂交液中，在合适的温度下继续温育12~16h。4．杂交后，将膜从塑料袋中取出，
Northern杂交
实验概要本实验介绍了Northern杂交的基本流程。主要试剂液氮，TRIzol (Invitrogen)，DEPC水，氯仿，异丙醇，70%酒精，酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)，水饱和酚(PH4.3)，无水乙醇，NaOAc，抽提缓冲液(0.02M NaOAc，1 mM EDTA，0.5% SD
Southern杂交
实验概要本实验介绍了Southern杂交的基本流程。主要试剂细菌基因组DNA抽提试剂盒，限制性内切酶，变性溶液，中和溶液，10 X SSC，杂交缓冲液(200mM磷酸钠缓冲液，PH7.2，1 mM EDTA，50%甲酞胺，1% BSA，7% SDS)，随机引物标记试剂盒，洗脱缓冲液(2 X SSC，
Southern杂交
Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤: (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。 (2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。 (3) 预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性
Northern杂交
实验方法原理 转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交，从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异，可以从多种方法中选择任意一种来标记和检测探针。用抑制非特异吸收探针的封闭试剂处理膜之后，在适于探针和固定的
长牡蛎和栉孔扇贝全基因组框架图绘制完成
日前，长牡蛎和栉孔扇贝全基因组框架图绘制完成，并筛查得到与重要性状相关的基因或信号通路，在国际上填补了冠轮动物基因组学研究空白。 这是在国家863计划支持下，由中国海洋大学、中国科学院海洋研究所、中国水产科学研究院黄海水产研究所、中国科学院南海海洋研究所、威海长青海洋科技股份有限公司、大连獐子
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛
杂交育种的杂交过程介绍
选择父母本父母本的选择取决于育种的目标和目的。亲本植物必须从当地挑选，并被认为是最适合当地条件的。去雄这是植物杂交的第二个步骤。自交系材料在正常条件下生长的，需要去雄。去雄就是将雌亲本的雄蕊在其开裂并散落花粉之前去除。单性生殖的植物不需要去雄，但双性生殖或自花授粉植物需要去雄 。套袋套袋是植物杂交的
概述分子杂交技术常见的杂交分类
分子杂交是通过各种方法将核酸分子固定在固相支持物上，然后用放射性标记的探针与被固定的分子杂交，经显影后显示出目的DNA或RNA分子所处的位置。根据被测定的对象，分子杂交基本可分为以下几大类： (1) Southern杂交:DNA片段经电泳分离后,从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上,然后与探
分子杂交技术Northern杂交的操作步骤
(1)RNA经变性电泳完毕后,可立即将乙醛酰RNA转移至硝酸纤维素滤膜上。转移方法与转移DNA的方法相似。 (2)转移完毕后 ,以6×SSC溶液于室温浸泡此膜5分钟,以除去琼脂糖碎片。 (3)将该杂交膜夹于两张滤纸中间,用真空烤箱于80℃干燥0.5-2小时。 (4) 用下列两种溶液之一进行
分子杂交技术Southern杂交的操作步骤
(1) 约50μl体积中酶切10pg-10μg的DNA, 然后在琼脂糖凝胶中电泳12-24小时(包括DNA分子量标准物)。 (2) 500ml水中加入25μl 10mg/ml溴化乙锭,将凝胶放置其中染色30分钟, 然后照相。 (3) 依次用下列溶液处理凝胶,并轻微摇动: 500ml 0.2m
分子杂交技术的几种常见的杂交
分子杂交是通过各种方法将核酸分子固定在固相支持物上，然后用放射性标记的探针与被固定的分子杂交，经显影后显示出目的DNA或RNA分子所处的位置。根据被测定的对象，分子杂交基本可分为以下几大类：(1) Southern杂交:DNA片段经电泳分离后,从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上,然后与探针杂交。
分子杂交技术Southern杂交的相关介绍
Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤: (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。 (2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。 (3)预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。
关于Southern杂交的预杂交的介绍
将固定于膜上的DNA片段与探针进行杂交之前，必须先进行一个预杂交的过程。因为能结合DNA片段的膜同样能够结合探针DNA，在进行杂交前，必须将膜上所有能与DNA结合的位点全部封闭，这就是预杂交的目的。预杂交是将转印后的滤膜置于一个浸泡在水浴摇床的封闭塑料袋中进行，袋中装有预杂交液，使预杂交液不断在
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛应
荧光原位杂交的荧光原位杂交
荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术，以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。探针首先与某种介导分子（reporter molecule）结
斑点杂交的DNA斑点杂交方法
①先将膜在水中浸湿，再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE，煮沸5min，冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。④将膜烘干，密封保存备用。
原位杂交仪原位杂交的意义
原位杂交：在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段，在适宜的条件下，能过氢键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点，应用带有标记的（有放射性同位素，如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质）DNA或R
分子杂交技术斑点杂交的操作步骤
(1) 10μl样品与20μl 100%甲酰胺、 7μl 37%甲醛、2μl 20×SSC混合。混合置于68℃，15分钟后置冰浴中。 (2) 用0.1mol/L NaOH清洗点样器,再用无菌水充分冲洗。将一张经20×SSC浸润的滤纸铺在点样器上,上面再铺上一张经20×SSC浸润1小时的硝酸纤维
原位杂交仪—原位杂交试验（一）
收集斑马鱼的胚胎，在Holfretor水中培养，到达所需要的发育时期时，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，二十四小时后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗，然后换成甲醇，在-20C 保存，待用（两天和两天以上的胚胎需要用双氧水处理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养，可阻断色素的形成）
原位杂交仪—原位杂交实验（三）
原位杂交第三天 1） 用1ml含10%热灭活血清的MABT溶液置换抗体溶液，放置摇床上25分钟，然后用1mlMABT置换，25分钟，再用1mlMABT溶液置换，一小时以上，最后用1mlMABT溶液置换，25分钟。 2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置
分子杂交技术菌落原位杂交的介绍
(1) 盛有2×SSC的塑料盘同，将干烤的滤膜飘浮在液面上,彻底浸湿5分钟。 (2) 将滤膜转到200ml预洗液的玻璃皿中。滤膜何叠在一起,放于溶液中。用保鲜膜盖住玻璃皿,放到位于培养箱内的旋转平台上。于50℃处理30分钟。在这一步及以后的所有步骤中,应缓缓摇动滤膜,防止它们粘在一起。 (3