国内首个利用端粒酶技术检测肿瘤诊断试剂批准上市
近日,浙江今复康生物科技有限公司研制的"端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)mRNA检测试剂盒(核酸扩增法)",经国家食品药品监督管理总局批准上市,这是我国首个利用端粒酶技术进行肺部肿瘤辅助诊断的检测试剂,填补了国内空白。 端粒酶逆转录酶(TERT/hTERT)是细胞内一种与癌变密切相关的逆转录酶,除生殖干细胞和造血干细胞之外,人体正常细胞不表达hTERT。痰液等源于肺呼吸道的样品若检测出hTERT mRNA,则表明存在癌变细胞。本产品首次采用具有完全自主知识产权的WFTR-PCR技术,整合了一步裂解、探针杂交、酶切/PCR体系,在提取患者的痰液后,利用荧光定量PCR的扩增放大,进行肺癌的辅助诊断,灵敏度比痰液细胞学、RT-PCR等方法有了几何级数的大幅提高。 该产品在浙江、上海等3家知名医疗机构进行了临床试验,结果具有较高的灵敏度和特异性,为肺癌辅助诊断提供了一种无创、快速、便捷的检测手段,具有较大的潜......阅读全文
实时荧光定量PCR仪简介及技术原理
实时荧光定量PCR仪适用于临床及科研以聚合酶链式反应为特征的、以实时荧光定量检测分析DNA/RNA为目的的病原体检测及基因分析。临床疾病诊断：各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价；地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测；肿瘤标志物及瘤基因检
荧光定量PCR技术特点、原理及其应用2
3 应用由于FQ-PCR具有高灵敏性，高特异性和高精确性的特点，目前，该项技术已被应用于病原体测定、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变及其多态性的研究等多个领域。3.1 病原体测定由于PCR技术的问世，使得病原体检测能够快速而方便的进行。但由于其高灵敏性，实验操作很容易受到污染而出现假阳性。只要
荧光定量PCR技术检测沙门氏菌
随着分子生物学及分子细菌学发展，荧光定量PCR技术应用为致病菌检测提供一种新的手段。沙门氏菌所引起中毒在世界各地食物中毒病例所占比例非常高。有资料显示，我国 70%——80%细菌菌性食物中毒事件系由沙门氏菌引起 。目前正致病菌检测在进行食品质量安全监控的中国计量认证（Chinametrolog
实时荧光定量PCR仪简介及技术原理
实时荧光定量PCR仪适用于临床及科研以聚合酶链式反应为特征的、以实时荧光定量检测分析DNA/RNA为目的的病原体检测及基因分析。临床疾病诊断：各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价；地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测；肿瘤标志物及瘤基因检测实
实时荧光定量－PCR技术原理与应用（一）
实时荧光定量 PCR技术原理与应用聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 。在扩增反应结束之后，我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析，也可以通过 放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析 。无论定性还是定量分析，分析的都是 PCR 终产物。但是
荧光定量PCR技术的检测原理和方法
1.SYBRGreenⅠ法：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR定量PCR扩增荧光曲线图PCR产物熔解曲线图（单一峰图表明P
科研中的“新星”技术——MicroRNA荧光定量PCR
Micro RNA简介微小RNA(microRNA，简称miRNA)是生物体内源长度约为20－23个核苷酸的非编码单链小分子RNA，通过与靶mRNA的互补配对而在转录后水平上对基因的表达进行负调控，导致mRNA的降解或翻译抑制。是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶
实时荧光定量PCR技术的优缺点汇总
qPCR的优点 方法成熟，配套仪器试剂齐全 试剂成本中等 操作简单 检测敏感性高，特异性高 qPCR的缺点 1.目的基因发生突变导致漏检 2.低浓度模板检测结果无法确定 3.使用标准曲线进行定量检测时误差较大。
荧光定量PCR技术特点、原理及其应用1
荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ- PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及
实时荧光定量－PCR技术原理与应用（二）
SYBR Green I 在核酸的实时检测方面有很多优点，由于它与所有的双链 DNA 相结合，不必因为模板不同而特别定制，因此设计的程序通用性好，且价格相对较低。利用荧光染料可以指示双链 DNA 熔点的性质，通过熔点曲线分析可以识别扩增产物和引物二聚体，因而可以、区分非特异扩增，进一步地还可
实时荧光定量pcr仪医疗应用
⑴ 病原体检测 目前，采用荧光定量PCR检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、结核分枝杆菌、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测方法相比具有灵敏度高、取样少、快速简便等优点。 如：结核菌基因诊断的意
PCR技术应用二：－骨肿瘤诊断
骨肿瘤较罕见，恶性骨肿瘤只占全身恶性肿瘤的1%，男多于女，性别比约为1.6 ∶1，均好发于10-30岁间，良性者以骨软骨瘤最多，依次为骨巨细胞瘤、内生软骨瘤 等，恶性者以骨肉瘤最多，依次为软骨肉瘤、纤维肉瘤等.骨恶性肿瘤的发生机理目 前认为是癌基因显性作用与抗癌基因失活的结果，是多种癌基因多阶段
基于AIE分子的双探针系统应用于细胞内的端粒酶活性检测
端粒酶在大部分肿瘤组织中大量表达且活性增强，而在正常组织中活性通常极低，因此已成为一种广为人知的肿瘤标志物。组织细胞内端粒酶活性的准确、灵敏检测对肿瘤诊断与治疗具有极其重要的意义。近日，华中科技大学夏帆教授与娄筱叮副教授课题组结合两种具有聚集诱导发光效应（AIE）的荧光染料，构筑了双荧光信号输出
端粒酶活性TRAP实时定量检测试剂盒
主要用途 端粒酶活性TRAP实时定量检测试剂是一种旨在运用SYBR绿色荧光染料作为标记信号，结合端粒重复序列扩增方法（TRAP），既方便、快速地进行各种DNA模板的扩增，又实时检测和定量分析扩增产物，即端粒酶活性的经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。广泛应用于肿瘤、衰老等
荧光定量pcr仪定量方法之绝对定量
在做qPCR实验时，我们经常会问：“你是做绝对定量还是相对定量呢？”，而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数，但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线，常用于确定病毒滴度。 使用标准曲线进行绝对定量 绝对定量是通
荧光定量PCR技术为什么可以用来做精确定量检测？
典型的扩增曲线包括基线期，指数增长期，线性增长期和平台期；基线期虽然在进行指数扩增，但是荧光信号变化不大；指数增长期在进行指数扩增，荧光信号也在以指数增长；线性增长期虽然荧光在增长，但其增长无明确的数学关系；平台期荧光几乎无增长，说明反应体系内DNA含量基本稳定，几乎不在增加。以上4个时期是根据其扩
荧光定量PCR检查的优势
样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值（限制点的循环数）。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大，这样可以获得最准确，可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品，线性回归分析将产生一条标准曲线，可以用来计算未知样品的浓度。 ⑴病原体检测 目前，采用荧光定量PCR检测技术可以对淋球
实时荧光定量PCR检测系统的技术参数
1、样品通量:16x0.2ml，兼容单管和8联管 2、加热方式:半导体制冷片结合电性电阻热红外技术 3、温控范围:室温～85℃ 4、激发光波长:470nm±10nm 5、检测光波长:520nm±10nm 6、激发光:高亮度LED 7、检测器:新型光学检测器，结合数字电路控制，光信号稳
荧光定量PCR技术检测副溶血性弧菌
副溶血性弧菌（Vibrioparahaemolyticus）主要分布于海水、海河交界处及海产品中，是沿海地区引起食物中毒重要病原菌。副溶血性弧菌在海产品中带菌率高达45.7% ，其生长速度是一般细菌（如大肠杆菌、沙门氏菌等）两倍，因而更易于引起食物中毒。目前，对溶血性弧菌检测仍以传统培养法为主，
深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术
深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术 荧光定量PCR仪所用到的实时荧光定量PCR技术是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，而实现对起始模板定量及定性分析的目的。在实时荧光定量PCR反应中，引入了一种荧光化学物质，随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也
深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术
深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术 荧光定量PCR仪所用到的实时荧光定量PCR技术是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，而实现对起始模板定量及定性分析的目的。在实时荧光定量PCR反应中，引入了一种荧光化学物质，随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等
深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术
深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术 荧光定量PCR仪所用到的实时荧光定量PCR技术是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，而实现对起始模板定量及定性分析的目的。在实时荧光定量PCR反应中，引入了一种荧光化学物质，随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比
实时荧光定量PCR技术的基本原理
在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光基团，这些荧光物质有其特定的波长。仪器可以自动检出，利用荧光信号积累，实时监测整个PCR进程，在PCR循环中，测量的信号将作为荧光阈值的坐标。并且引入一个——Ct值（Threshold cycle）概念，Ct值是指产生可被检测到得荧光信号所需的最小循环数，是
深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术
深度解读荧光定量PCR仪所运用的技术 荧光定量PCR仪所用到的实时荧光定量PCR技术是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，而实现对起始模板定量及定性分析的目的。在实时荧光定量PCR反应中，引入了一种荧光化学物质，随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也
详细解析实时荧光定量PCR探针法技术原理
目前主流的实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）方法分为染料法和探针法，染料法以SYBR Green法为代表，SYBR Green染料游离时荧光微弱，但但一旦与双链DNA结合后，荧光大大增强，反应管中的荧光强度与反应管中双链DNA的数量成正比例关系，因此荧光定量
近红外荧光成像技术为肿瘤手术“导航”
2013年，美国哈佛医学院教授John V Frangioni提出，近红外荧光成像技术可以为临床医生提供有效帮助，未来十年将在肿瘤术中极具应用前景。在中国，MI从实验室走进手术室，已然让这一设想成为现实。 近一百年来，人类获取癌症信息的方法不断创新：从上个世纪初的X射线到70年代的CT，再到
肿瘤精准诊断新方法有望试行－荧光成像检测肿瘤标志物
复旦大学昨天发布一项最新科研重大突破成果，并引起了国际关注。该校化学系教授张凡团队经实验发现，近红外荧光寿命成像技术可运用于活体多重检测当中，有望成为一种全新的肿瘤精准诊断方法。目前，对组织进行切片仍为临床医学中诊断肿瘤的主要方法。然而在这一诊断方法的背后，却隐藏着诸多风险与隐患。切片诊断技术不得不
荧光定量pcr原理
荧光定量pcr原理如下：荧光定量PCR（Real-time PCR），是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团，通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。以探针法荧光定量PCR为例：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针两
关于荧光定量PCR
实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。 Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号
荧光定量PCR要点
一、荧光定量PCR原理荧光定量PCR（Real-time PCR），是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团，通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。以探针法荧光定量PCR为例：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针两端