NatCommun:体外细胞培养系统促进慢性乙肝药物的研发
最近,来自普林斯顿大学分子生物学系的研究者们成功地建立了HBV慢性感染的细胞培养模型,这将为HBV感染相关的研究提供有力的工具。相关文章发表在最近一期的《Nature communications》杂志上。这一工具的问世将促进HBV病毒学的研究以及加快临床上抗病毒药物的开发进程。 HBV是一类引发异性肝炎的病毒,目前世界上有超过2.5亿人感染HBV,严重者可引起肝功能紊乱以及肝癌等。HBV能够通过与肝脏细胞细胞表面特异性表达的一类叫做NTCP的多肽结合而造成感染。一旦进入细胞内部,HBV将破坏宿主的细胞机能,并将病毒的遗传物质整合形成相对稳定的"迷你染色体"。这一机制使得病毒能够建立长期的感染,并最终导致肝纤维化、肝硬化以及肝癌。根据WHO的报告,每年有60万人会受到HBV的感染。 到目前为止,研究者们仍未能开发出彻底治愈HBV感染的药物,这一方面是由于他们难以在实验室条件下建立长期的感染模型。由于肝......阅读全文
Nat-Commun:体外细胞培养系统促进慢性乙肝药物的研发
最近,来自普林斯顿大学分子生物学系的研究者们成功地建立了HBV慢性感染的细胞培养模型,这将为HBV感染相关的研究提供有力的工具。相关文章发表在最近一期的《Nature communications》杂志上。这一工具的问世将促进HBV病毒学的研究以及加快临床上抗病毒药物的开发进程。 HBV是一类
体外培养细胞的分类
.贴附型这类肿瘤细胞在培养时,能贴附在支持物表面生长。大多数培养细胞呈贴附型生长;只赖于贴附才能生长的细胞称贴附型细胞或锚着依存型细胞。关于细胞的贴附过程和机制将另加叙述。当单细胞贴附在支持物上后,易失去它们在体内时原有的特征,细胞分化现象常变得不显著。在形态上常表现单一化的现象,并常反映其胚层起源
细胞培养体外培养的概念
体外培养(in vitro culture),就是将活体结构成分或活的个体从体内或其寄生体内取出,放在类似于体内生存环境的体外环境中,让其生长和发育的方法。 ●组织培养:是指从生物体内取出活的组织(多指组织块)在体外进行培养的方法。 ●细胞培养:是指将活细胞(尤其是分散的细胞)在体外进行培养
成骨细胞的体外培养
成骨细胞的来源主要有骨、骨膜、骨髓及骨外组织。及人的胚胎颅骨或新生动物的颅骨为成骨细胞的常用来源。Robey(1985)采用胶原酶处理松质骨骨块以除去结缔组织和骨髓造血组织,再将处理过的骨块进行培养来获得更纯净的成骨细胞。将人胚胎颅骨中所获得的成纤维样细胞通过加入β-甘油磷酸钠诱导分化后培养3周
体外培养细胞包括了什么
在这里对于体外培养细胞所有情况则包括了初代培养与各种细胞系的培养,则就是说当体外培养细胞生长达到一定的密度后,则都是需要进行传代处理的。而在这里我们所说的传代的频率与培养液体的性能性质,以及接种的细胞数量与增殖速度是相关的。这就是说接种的细胞数量越大则细胞基数就越大,而在相同的增殖速度下细胞数量增加
原代细胞体外培养现状
原代细胞自然生长有两种方式,锚定依赖或非锚定依赖,这主要取决于它们在体内的组织来源:外周血(非锚定依赖)或固体组织器官(锚定依赖)。原代细胞一旦分离后,24-48h内需要进行贴壁或起始,开始培养。 广义地说,所有的哺乳动物细胞,无论其类型或来源,都需要在与人类生理条件(即37°C,5%CO2)
体外培养细胞的形态特征
体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征,可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞,常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。1、成纤维型细胞在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时,皆可称之为成纤维细
体外培养贴壁细胞特点
贴附并伸展,是多数体外培养细胞的基本生长特点。细胞贴壁的过程使形态发生很大变化,细胞形态改变是细胞内骨架(真核细胞中的蛋白纤维网架体系,由微管、微丝及中间纤维组成的体系)本身和细胞外基质共同作用的结果。培养细胞在未贴附于底物之前一般均似球体样,当与底物贴附后,细胞将逐渐伸展而形成一定的形态,呈成纤维
细胞体外培养的污染原因
1、外源性污染外源性污染中应注意实验室内空气保持洁净,定期清扫、紫外消毒,操作者严格按照无菌操作进行。由于离体细胞对各种毒物都很敏感,所以细胞培养所用器材的清洗、消毒处理非常关键。培养所用的物品器具要彻底清洗消毒,超净台的物品摆放要井然有序,避免反复烧烤已经高温灭菌的物品以及避免因细胞株种类过多而引
简述体外培养细胞的形态特征
体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征,可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞,常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。1、成纤维型细胞在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时,皆可称之为成纤维细
NK细胞体外培养方法之纯因子培养
关于NK细胞培养,也许您还在疑惑为什么细胞培养到后期生长缓慢?为什么细胞扩增状态不理想?培养过程中补液标准判断的依据是什么?为了解决实验中遇到的种种问题,减少摸索的苦恼,我们特地为大家精心准备了NK试剂盒教学视频以及实验操作要点等,有了这篇干货,相信大家就能轻松搞定实验中的疑难杂症。视频已备好,快识
原核细胞体外翻译系统
实验材料 适用于杯状 DNA 的 S30 提取物 适用于线状 DNA 的 S30 提取物 适用于环状 DNA 的 T7S30 提取物
原核细胞体外翻译系统
实验材料 适用于杯状 DNA 的 S30 提取物 适用于线状 DNA 的 S30 提取物 适用于环状 DNA 的 T7S30 提取物试剂、试剂盒 无核酸酶的水 [35S] 标记的甲硫氨酸 1 mmol L 缺少中硫氨酸的氨基酸混合物 缺少氨基酸的 S30 反应混合液仪器、耗材 —70℃ 冰箱 微量移
原核细胞体外翻译系统
实验材料 适用于杯状 DNA 的 S30 提取物 适用于线状 DNA 的 S30 提取物 适用于环状 DNA 的 T7S30 提取物 试剂、试剂盒 无核酸酶的水 [35S] 标记的甲硫氨酸 1 mmol L 缺少中硫氨酸的氨基酸混合物 缺少氨基酸的 S30 反应混合液 仪
体内组织细胞的体外培养1
体内组织细胞在体外培养时,所需培养环境基本相似,但由于物种、个体遗传背景及所处发育阶段等的不同,各自要求条件有一定差别,所采取的培养技术措施亦不尽相同,现介绍个别组织细胞培养的要点如下:一、上皮细胞培养上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别
细胞体外培养的三大污染
细胞培养技术是离体方法中主要的一种,是从动物体内取出细胞,模拟体内的生理环境,在无菌、适温、丰富的营养条件下,使离体细胞生存、生长并维持结构和功能的一门技术。细胞实验是科学探究的基础,细胞实验服务可以提供包括细胞侵袭检测、细胞划痕检测以及细胞增殖实验等的研究。细胞体外培养实验对于科学研究至关重要,然
体内组织细胞的体外培养2
培养方法如下:1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后,仔细剥除脑膜、血管和纤维成分,置Hanks液中漂洗一、二次。2、置于30―50倍体积的Hanks液中,此时脑组织比较柔软,反复吹打即制成细胞悬液。3、把悬液注入离心管室温中直立5-10分钟后,细胞或细胞团快自然下沉,脂肪等杂物易漂浮,可吸除上层、反复
体外培养细胞培养基的基本要求
体外培养的细胞直接生活在培养基中,因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。 一、营养成分 维持细胞生长的营养条件一般包括以下几个方面: 1.氨基酸:是细胞合成蛋白质的原料。所有细胞都需要12种必须氨基酸:缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组
体外培养的原代细胞是如何进行培养的
体外培养的原代细胞是如何进行培养的,如果我们在进行体外培养,则就是一个原代细胞划细胞植株要要体外进行一个持续性的培养,则就是必须进行传代。这样方便于获得稳定的细胞植株或是大量的同种细胞,同时还可以维持细胞的种类的一个延续,传代培养的累计次数则就是细胞的代数。同时对于不同的动物与人的正常细胞在体外培养
羊水细胞培养基在体外培养制备方法
羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞,可在体外培养用以分析胎儿染色体核型。目前国内外大都采用腹腔羊膜穿刺术,妊娠12-30周的羊水细胞均可培养基成功。羊膜腔穿刺取羊水行染色体分析,最佳孕周为16周左右。因此时羊水增长快,羊水中细胞较多,细胞培养易于生长,而且不易损伤胎儿。国内多数选择的穿刺时间在妊娠的第16
4.4-原核细胞体外翻译系统
S30 提取物系列产品共分为三类:适用于对环状 DNA 进行体外翻译的大肠杆菌 S30 提取物系统、适用于对线状 DNA 进行体外翻译的大肠杆菌 S30 提取物系统和适用于对环状 DNA 进行休外翻译的大肠杆菌 T7S30 提取物系统。实验材料适用于杯状 DNA 的 S30 提取物适用于线状 DNA
体外培养肿瘤细胞生物学检测
一旦培养的肿瘤细胞生长成形态上单一的细胞群体或细胞系(或株)后,不论用于实验研究还是建立细胞系,都需要做一系列的细胞生物学测定,主要的目的在于求得证明:所培养的细胞系的确来源于原体内具有恶性的细胞,而非正常细胞或其它细胞。均具有瘤种特异性。阐明一般生物学性状。测定项目数量无明确规定,根据需要而定,以
粒系、红系祖细胞体外培养
【参考值】 粒系祖细胞体外琼脂培养: 正常骨髓:细胞丛与集落数之比为5~20:1CFU-C 约为50~70/105有核细胞。CFU-C浓度约为骨髓的1/10。CFU-E 为66/105有核细胞: BFU-E 正常外周血: 集落的产率影响因素很多,各实验室报告均不一致,所以各实验室
体内细胞培养与体外细胞培养在营养要求上有何区别
离体细胞与体内的细胞在营养代谢上是有区别的.机体内的细胞营养可受神经和激素等进行一系列的统一调节,而离体的细胞则不受其调节.离体培养细胞与体内细胞在营养要求上的主要差别如下:·体外长期培养的细胞大多需要血浆、血清或胚胎浸出液,而这类培养基都可能含有微量的激素、维生素及必要的氨基酸,足以供给细胞营养的
体外培养的概念
中文名称体外培养英文名称in vitro culture定 义将活体结构成分(如活体组织、活体细胞、活体器官等)甚至活的个体从体内或其寄生体内取出,置于类似于体内生存环境的体外环境中生长和发育的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞
试剂和材料:1. MSCs培养基;2. 6孔培养板;3. 丝裂霉素C,100μg/ml;4. 共培养的培养基:IMDM添加10%FBS,100U/ml青霉素和100μl/ml链霉素;5. 细胞因子(干细胞因子,IL-6,Flt-3配体,促血小板生成素);实验方法:1. 将脐带血来源的间充质干细胞(C
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料细胞实验步骤1. 体外培养的细胞,在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞(传代后24h,圆形发亮的细胞)时,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.3μg/ml培养液; 2. 继续培养3h; 3. 胰酶消化收集细胞至离心管; 4. 离心1000转/min,离心10min,去上清; 5. Hanks液洗,离心
牛血清对于体外培养的细胞有哪些作用
牛血清对于体外培养的细胞有哪些作用 血清的主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。其中的牛血清是细胞培养中用量zui大的天然培养基,含有丰富的细胞生长需要的营养成份,如各种血浆蛋白、多肽
传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!
在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。双抗:青霉素100u/ml; 链霉素100μl/mlPBS:KCl 0.2 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, NaCl 8.0g/L, Na2HPO4•7H
浅析细胞体外培养的三大污染原因
细胞培养技术是离体方法中主要的一种,是从动物体内取出细胞,模拟体内的生理环境,在无菌、适温、丰富的营养条件下,使离体细胞生存、生长并维持结构和功能的一门技术。细胞实验是科学探究的基础,细胞实验服务可以提供包括细胞侵袭检测、细胞划痕检测以及细胞增殖实验等的研究。细胞体外培养实验对于科学研究至关重要,然