简述液相色谱仪应用方案的建立方法
液相色谱仪检测的灵敏性较高，被广泛运用于食 品、医药等领域，其主要检测项目是食品和药物工业生产过程中的药品残留，减少对人体的伤害。相关检测、科研部门在建立药品中特定物质检测或含量测定的应用 方案时，须按照药典收载的相关药品分析方法的质量标准进行。建立完整的液相色谱仪检测方案需涵盖检测仪器、检测试剂、样品的制备、液相色谱仪检测条件、检测结果以及结果分析方法。 在建立方法时，选择仪器配置以及试剂应当注意以下事项： ①液相色谱柱填料首选十八烷基键合硅胶； ②检测器首选UV检测器；ƒ流动相首选甲醇-水系统，应尽可能少用含有缓冲液的流动相，如为碱性药物，流动相的pH值应为 7~8；如为酸性药物，流动相的pH值应为3~4； ③内标物应首选易得到的纯度较高的化学试剂或对照品，应与待测物质化学结构相似，理化性质接近，峰的响 应值相当，以及分离度应大于1.5。 待检测样品溶液的配置可直接由样品原料经搅碎、溶解、过滤、提取而来，提......阅读全文
气相色谱PK液相色谱
气相和液相是有机检测的两大基本仪器，占据着有机实验室的统治地位，虽然同做有机检测，但就两个仪器本身也有着较大区别，小析姐从以下5个方面进行了比较。 气相色谱是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术，它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。同为色谱技
液相色谱流动相的优化组合方法
液相色谱应用广泛的是反相色谱，其流动相的优化组合直接关系到分离效果。八十年代二元流动相组成优化依赖于容量因子(k’)的对数值与极性溶剂的摩尔分数关系，根据两者线性关系，可以估算溶质的保留值。曾有人确定过14种二元溶剂系统的容量因子与流动相的关系。Scott,Snyder和Soczeuinski的色谱
液相色谱柱的使用方法
色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样品的
液相色谱柱的使用方法
色谱柱在使用前，zui好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样
液相色谱柱正确使用方法
一、样品方面 1.除去微粒及杂质 2.了解样品在流动相中的溶解度 如溶样品的溶剂不是流动相，一定要用流动相试溶解度，防止其在流动相中析出 3.了解样品与色谱柱的基质/填料是否有相互作用 二、流动相方面 1.除去微粒 纯度的要求：超纯水，梯度实验时水中有机杂质含量要低;缓冲液的PH值，在
液相色谱柱正确使用方法
一、样品方面1.除去微粒及杂质2.了解样品在流动相中的溶解度如溶样品的溶剂不是流动相，一定要用流动相试溶解度，防止其在流动相中析出3.了解样品与色谱柱的基质/填料是否有相互作用二、流动相方面1.除去微粒纯度的要求：超纯水，梯度实验时水中有机杂质含量要低；缓冲液的PH值，在填料的允许范围内；缓冲液（盐
液相色谱柱保养方法及其使用
液相色谱仪由检测器、高压液体泵及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；同时也是液相色谱工作者获得正确且可靠的实验数据的必经之路。 一、液相色谱柱的安装： 1、液相色谱柱的结构： a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组
液相色谱柱的故障处理方法
气泡溢出 流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入流动相，无论打开purge键几次，都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力
液相色谱柱的使用方法
色谱柱在使用前，进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样品的前处
液相色谱柱保养方法及其使用
液相色谱仪由检测器、高压液体泵及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键;同时也是液相色谱工作者获得正确且可靠的实验数据的必经之路。 一、液相色谱柱的安装： 1、液相色谱柱的结构： a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接
高效液相色谱的使用方法
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)．打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)．进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)．有一段时间没用，或者换了
液相色谱接头故障解决方法
1管路阻塞管路完全或部分阻塞是由下列原因引起的：①没有很好过滤流动相；②样品中有微粒；③泵或进样器垫圈产生碎片；④预柱、护柱和分析柱中漏出填料；⑤毛刺和锉屑进入；⑥流动相中的结晶盐；⑦微生物⑧系统中进入了其它颗粒性物质。系统中管路阻塞的现象很少见，常见的是烧结过滤片（玻璃砂芯）阻塞。用烧结过滤器或过
高效液相色谱的使用方法
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)．打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)．进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)．有一段时间没用，或者换了
高效液相色谱有几种定量方法
峰面积法、峰高法、归一法、外标法。峰面积法是比较精确的定量方法简介：高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。高效液相色谱是色
高效液相色谱有几种定量方法
色谱定量分析是根据组分检测响应讯号的大小，定量确定试样中各个组分的相对含量。其依据是：每个组分的量(重量或体积)与色谱检测器产生的检测响应值(峰高或峰面积)成正比。具体到特定方法，主要有下列方法：1.归一化法当样品中所有组分能全部流出色谱柱，并在检测器上都能产生相应信号（得到色谱峰）时，常采用归一化
液相色谱柱的使用方法
液相色谱柱的使用方法液相色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要留意： 液相色谱柱柱性能可能由于所使用的样品、活动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行（出厂测试所使用的条件是最佳条件），只有这
高效液相色谱有几种定量方法
峰面积法、峰高法、归一法、外标法。峰面积法是比较精确的定量方法
液相色谱柱的故障处理方法
气泡溢出 流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入流动相，无论打开purge键几次，都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用
液相色谱柱的故障处理方法
流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入流动相，无论打开purge键几次，都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进
液相色谱质谱联用分类方法
液相色谱质谱联用仪类型有多种。1、按分析目的可分：实验室液相色谱质谱联用仪和工业液相色谱质谱联用仪。2、按分析规模可分：小型液相色谱质谱联用仪和大型液相色谱质谱联用仪。3、按质量分析器的时空属性可分：时间型液相色谱质谱联用仪和空间液相色谱质谱联用仪。4、按分辨率可分：低分辨液相色谱质谱联用仪、中分辨
液相色谱柱的保存方法介绍
1.反向色谱柱实验后的保养： 使用缓冲液或含盐的流动相，实验完后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。 2.长期保存色谱柱： 如，色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下，对于反相柱
高效液相色谱静态噪声测试方法
高效液相色谱仪静态噪声测试方法如下：在冷状态启动高效液相色谱仪，不断测试1个小时。在这一小时，花10分钟(包括最坏的峰值)，在这10分钟内取最大值，即仪器的噪音。但10分钟的峰间值与10分钟的峰间值不同，即“10分钟的峰间值”不等于瞬时峰间值。测试的数据前面应有正负号。注：开机30分钟后，仪器调整到
液相色谱柱选择方法及保存
一、液相色谱柱选择方法液相色谱柱选择的简单思路1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操纵本钱等等。2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。液相色谱柱的保存1.反相色
高效液相色谱有几种定量方法
色谱定量分析是根据组分检测响应讯号的大小，定量确定试样中各个组分的相对含量。其依据是：每个组分的量(重量或体积)与色谱检测器产生的检测响应值(峰高或峰面积)成正比。具体到特定方法，主要有下列方法：1.归一化法当样品中所有组分能全部流出色谱柱，并在检测器上都能产生相应信号（得到色谱峰）时，常采用归一化
高效液相色谱有几种定量方法
峰面积法、峰高法、归一法、外标法。峰面积法是比较精确的定量方法简介：高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。高效液相色谱是色
高效液相色谱之高效反相液相色谱（二）
附：色谱柱操作说明，（以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例）1. 色谱柱常规参数订货号：Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如，Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col
液相色谱的分类和高效液相色谱用途
制备型加压液相色谱，按照色谱柱和样品量的大小，分为：（1）低压液相色谱；（2）中压液相色谱；（3）高压液相色谱；（4）快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠，没有统一、明确的标准。 1、快速色谱 柱压通常为2bar（或30psi）左右，对于那些容易分离的简单混
高效液相色谱之高效排阻液相色谱
高效液相色谱（High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC）又叫高压、高速、近代液相色谱，通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法，到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面，现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方
高效液相色谱之高效反相液相色谱（一）
反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色
C18液相色谱柱色谱柱液相色谱柱
分析型到制备型一套完整的填料体系，目前可提供的填料键合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和 DMB。孔径有60A、100A和300A三种，满足不同条件的分析。填料粒径可以提供3.5um、5um、7um、10um、13um和16um六种。可谓品