常见的4大HPLC故障你能搞定几个？内附解决方案！
一、压力持续偏高 1、流速设定过高。 将流速调整到适当数值。 2、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀。 更换流动相，冲洗色谱柱。 3、柱前筛板堵塞。 在允许情况下反冲色谱柱，更换筛板，更换色谱柱。 4、保护柱堵塞。 清洗或更换保护柱。 二、压力持续偏低 1、流速设定过低。 将流速适当调高。 2、系统漏液。 检查色谱柱接口、泵等位置，确定漏液位置并维修。 3、色谱柱选择不当。 更换合适的色谱柱。 三、压力波动较大 1、管道中有气体，流动相脱气不充分。 流动相继续脱气或改变脱气方法（如在线脱气等）。 2、单向阀、泵密封损坏。 更换单向阀和泵。 3、流动相粘度变化引起压力波动。 改用溶剂梯度洗脱。 四、漏液 通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题，就必须将接头取下，检查是否损坏（......阅读全文
HPLC流动相如何选择
对于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时，如果得到的色谱图出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质，要选用乙腈/水作流动相。
HPLC流动相如何选择
对于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时，如果得到的色谱图出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质，要选用乙腈/水作流动相。由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲和力，并参与固定相对
HPLC流动相如何选择
对于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时，如果得到的色谱图出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质，要选用乙腈/水作流动相。由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲和力，并参与固定相对
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的，不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围）。k值太小，不利于分离；k值太大，可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气：由于流动
HPLC对流动相的要求
① 必须是HPLC级的，不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围）。k值太小，不利于分离；k值太大，可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气：由于流动
关于HPLC的流动相问题
1)PH值特别重要：一般C18柱PH小于3时，容易损坏色谱柱，但是抗酸性的柱可以使用小的PH值。 2) 注意选择试剂的截止波长：如乙腈截止波长215nm、丙酮截止波长330nm、正丁烷210nm等等(具体情况请读者参阅本文的参考文献)。 3)流速：流速要适当，否则影响峰形、浪费溶剂，一般常规
HPLC色谱流动相的脱气方法
HPLC系统的管路流体如有气泡生成，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰有的甚至影响HPLC的灵敏度.如今在使用HPLC时为防止气泡生成，主要是对色谱流动相做脱气处理，其主要的方法如下：1.吹氦脱气法使用在液体中比空气溶解度低的氦气，在0.1Mpa压力下，以约60ml/min流速通入流动相10-15min
HPLC的固定相和流动相（三）
3．流动相的pH值采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存
HPLC的固定相和流动相（二）
2．键合相的种类化学键合相按键合官能团的极性分为极性和非极性键合相两种。常用的极性键合相主要有氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二醇基(DIOL)键合相。极性键合相常用作正相色谱，混合物在极性键合相上的分离主要是基于极性键合基团与溶质分子间的氢键作用，极性强的组分保留值较大。极性键合相有时也可作反相
调整HPLC的流动相有哪些原则？
液相色谱仪的流动相调整非常重要，一般来说，应该考虑以下方面。 一 由强到弱。一般先用90%的乙腈/水进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂的比例。 二 三倍规则。每减少10%的有机溶剂的量，保留因子约增加3倍，此为3倍规则。调整过程中，注意观察各个峰的分离情况。 三
HPLC的固定相和流动相（一）
在色谱分析中，如何选择最佳的色谱条件以实现最理想分离，是色谱工作者的重要工作，也是用计算机实现HPLC分析方法建立和优化的任务之一。本章着重讨论填料基质、化学键合固定相和流动相的性质及其选择。一、基质（担体）HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质，也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝
高效液相色谱(HPLC）流动相的性质要求
高效液相色谱(HPLC)流动相溶剂具有粘度低、与检测器相容性好、产品易得、毒性低等特点。选择填料（固定相）后，强溶剂对填料表面溶质的吸附降低，相应的容量因子K降低。然而，较弱的溶剂增加了溶质在填料表面的吸附，相应的容量因子k也增加了 因此，k值是流动相组成的函数 塔板数n通常与流动相的粘度成反比
高效液相（HPLC）流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水；2.拧开排气阀，开大流速进行排气，如果泵不能吸液，可以拧开出口单向阀的出口螺丝，直至有液体流出再拧紧（建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光，免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆）；3.把柱子换成双通，不接流通池，拧紧排气阀，开大流速把系统管路里的气泡冲走
高效液相（HPLC）流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水；2.拧开排气阀，开大流速进行排气，如果泵不能吸液，可以拧开出口单向阀的出口螺丝，直至有液体流出再拧紧（建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光，免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆）；3.把柱子换成双通，不接流通池，拧紧排气阀，开大流速把系统管路里的气泡冲走
高效液相（HPLC）流动相走干了怎么办？
1.换上足量新的流动相或超纯水；2.拧开排气阀，开大流速进行排气，如果泵不能吸液，可以拧开出口单向阀的出口螺丝，直至有液体流出再拧紧（建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光，免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆）；3.把柱子换成双通，不接流通池，拧紧排气阀，开大流速把系统管路里的气泡冲走
高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办
1、Dry Prime，呵呵，既然流动相都干了，那流路大概也干了进行dryprime的操作步骤如下1.轻轻振摇溶剂瓶中的过滤头以除去可能留存的气泡.2.在灌注排液阀出口插上一支注射器,然后打开排液阀(反时针旋转半圈).不要将注射器固定在排液阀上,而要用手将其贴紧阀的出口.3.选择DryPrime,然
高效液相（HPLC）流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水；2.拧开排气阀，开大流速进行排气，如果泵不能吸液，可以拧开出口单向阀的出口螺丝，直至有液体流出再拧紧（建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光，免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆）；3.把柱子换成双通，不接流通池，拧紧排气阀，开大流速把系统管路里的气泡冲走
高效液相（HPLC）流动相走干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水；2.拧开排气阀，开大流速进行排气，如果泵不能吸液，可以拧开出口单向阀的出口螺丝，直至有液体流出再拧紧（建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光，免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆）；3.把柱子换成双通，不接流通池，拧紧排气阀，开大流速把系统管路里的气泡冲走
HPLC分析方法开发中流动相的调整
秘诀1：由强到弱： 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验， 这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。秘诀2 三倍规则 ：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意
HPLC对流动相的一般要求
流动相就比如人体的血液，其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。 应该使用HPLC级的溶剂，不能互相混溶的溶剂不可以直接切换!一般在水相和与其不混溶的溶剂切换时，使用异丙醇作为过渡溶剂。 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的最低波长，低于该波长后，溶剂会
简介高效液相色谱(HPLC）流动相的性质要求
（1）流动不会相应地改变填料的任何性质 低交联度离子交换树脂和排斥色谱填料有时会遇到一些有机相的膨胀或收缩，从而改变色谱柱填料床的性能。碱性流动相不能用于硅胶柱体系中，酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附柱体系中。 （3）必须与探测器配套。当使用紫外检测器时，所用的流动相在检测波长上不应吸收
简述hplc级流动相使用前如何处理
一、基质（担体） HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质，也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大，在溶剂中不容易膨胀。有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩，溶剂或溶质容易渗入有机基质中，导致填料颗粒膨胀，结果减少
HPLC常见问题和解决方法－没有压力显示没有流动相流动
没有压力显示，没有流动相流动原 因解决方法1、电源问题1、接通电源，开机2、保险丝被烧坏2、更换保险丝3、控制器设定不正确或设定失败3、a、采取恰当的设定b、修理或更换控制器4、柱塞杆折断4、更换柱塞杆5、泵头内有空气5、溶剂脱气、启动泵抽出空气6、流动相不足6、a、补充流动相b、更换入口滤头7、单
液相色谱HPLC流动相的溶剂怎么选择应遵循什么原则？
流动相溶剂的选择：正确选择流动相溶剂对高效液相色谱的成功至关重要。目前还没有理想的选择模式这主要取决于经验的积累。流动相溶剂选择的一般要求是:（1）溶剂应纯度高，不溶于固定相，并能保持色谱柱的稳定性；（2）溶剂的性能应与所用的检测器相匹配；（3）溶剂应具有足够的样品溶解能力；（4）溶剂应该具有低粘度
药品研发中HPLC液相色谱柱的选择和流动相的优化
分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择和梯度的优化几个方面。目前高效液相色谱法（HPLC)多使用反相色谱法，本文主要以反相为例讲解。1.液相色谱柱的选择 原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻，要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板数，能提
药品研发中HPLC液相色谱柱的选择和流动相的优化
分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择和梯度的优化几个方面。目前高效液相色谱法（HPLC)多使用反相色谱法，本文主要以反相为例讲解。 1.液相色谱柱的选择 原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻，要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板
关于HPLC的流动相，十个你不知道的“坑”
流动相相当于液相的血液，在使用过程中会有各种需要注意的事项。其中有些“坑”千万要注意。加入有机溶剂之后测量移动相酸碱度 校准pH计，得到水溶液的正确pH回读值——您要验证的缓冲液是含水的。如果你用有机添加剂测量pH值，得到的pH值会与添加有机溶剂之前的值不同。 然而，最重要的一点是要保持一致
反相HPLC平衡柱子时每换一次流动相都会出峰
基线的稳定只是相对稳定的流动相，所以这是很正常的。
HPLC常见问题和解决方法流动相正常，但没有压力显示
流动相流动正常，但没有压力显示原 因解决方法1、仪表损坏1、更换仪表2、压力传感器损坏2、更换压力传感器
流动相脱气
流动相脱气对于避免HPLC系统出问题，顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。HPLC系统内是不能够有气泡存在的。HPLC泵在输送液体时要产生很大的压力，由于气体的压缩比与液体相比大的多，因而当气泡存在时，你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大，液相泵将不能输送任何溶剂，而且如