常见的4大HPLC故障你能搞定几个？内附解决方案！
一、压力持续偏高 1、流速设定过高。 将流速调整到适当数值。 2、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀。 更换流动相，冲洗色谱柱。 3、柱前筛板堵塞。 在允许情况下反冲色谱柱，更换筛板，更换色谱柱。 4、保护柱堵塞。 清洗或更换保护柱。 二、压力持续偏低 1、流速设定过低。 将流速适当调高。 2、系统漏液。 检查色谱柱接口、泵等位置，确定漏液位置并维修。 3、色谱柱选择不当。 更换合适的色谱柱。 三、压力波动较大 1、管道中有气体，流动相脱气不充分。 流动相继续脱气或改变脱气方法（如在线脱气等）。 2、单向阀、泵密封损坏。 更换单向阀和泵。 3、流动相粘度变化引起压力波动。 改用溶剂梯度洗脱。 四、漏液 通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题，就必须将接头取下，检查是否损坏（......阅读全文
流动相的细菌污染
流动相的细菌污染 流动相刚开始不长菌，在使用时却产生了细菌污染。这主要是在使用多元液相色谱仪时的一种不良使用习惯造成的。举最简单的例子：50%的甲醇水流动相，有两种使用方式。一种方式是在上机前就配好混合在一起，另一种方式是在流路A放纯甲醇，流路B放纯水。从单纯实验效果来说，后一种有明显的优点：
色谱柱的流动相
1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用
色谱流动相如何调整？
色谱流动相如何调整？还在模棱两可的看过来 开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况，大部分原因就是流动相没调好，那到底该怎么调，怎么选择呢？看完下文可能你就知道答案了。 秘诀1：由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水
TLC洗脱剂（流动相）
洗脱剂（流动相）以硅胶TLC片来说，洗脱剂的强度比较为：全氟烷(最弱)＜己烷＜戊烷＜四氟化碳＜苯/甲苯＜二氯甲烷＜乙醚＜乙酸乙酯＜乙腈＜丙酮＜2-丙酮/正丁醇＜水＜甲醇＜三乙胺＜乙酸＜甲酸(最强)而对于C18覆盖的TLC板，其顺序完全相反。在应用中，若使用乙酸乙酯/庚烷的混合溶剂作为流动相，乙酸乙酯
流动相的选择秘诀
秘诀1：由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。 秘诀2： 三倍规则：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。这是一个聪明
液相流动相知识
流动相是影响液相色谱的关键因素。一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液，但是如何配制。选择配制的方法不同，分析结果特别是保留时间，是会有显著差别的。高效液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、
流动相为含缓冲盐流动相，走完样品应该怎么冲柱子
要看色谱柱C18接的是什么键，不同的键对水的耐受性不同，有的柱子是不怕纯水做流动相的含缓冲盐肯定先用10%甲醇水冲洗，含有蛋白如果是能耐纯水的色谱柱一般是用甲酸或者乙酸调PH大于2的水清洗
液相色谱（HPLC）入门（一）
什么是液相色谱?历史概述和定义液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 Mikhail S. 茨维特提出的。他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。他发现两种特殊的材料，粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。他将样品[混匀植物叶
液相色谱（HPLC）入门（二）
什么是色谱图?色谱图表示发生在高效液相色谱系统中的化学[色谱]分离。一系列从基线出现的峰以时间为坐标。每个峰代表对不同化合物的检测器反应。色谱图由计算机数据站描绘。[如图 H].Figure H: How Peaks Are Created图H中，黄色谱带完全通过了检测器流通池；产生的电信号被送到计
液相色谱（HPLC）入门（五）
正相高效液相色谱在植物提取物的分离过程中，茨维特成功运用极性固定相[玻璃柱中的粉笔末； 如图A]和弱极性[非极性]流动相。这种经典的色谱模式被称为正相。图 S -1: 正相色谱法图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极
液相色谱（HPLC）入门（四）
高效液相色谱分离模式总的来说，化合物的三种主要的性质可以用来产生高效液相色谱分离。它们是：· 极性· 电荷· 分子大小首先，让我们考虑极性和根据这一特性的两种主要分离模式：正相和反相色谱。基于极性的分离一个分子的结构、活性和物化性质由组成它的原子和化学键决定。在一个分子内部，决定了其特殊性质和可预测
液相色谱（HPLC）入门（三）
高效液相色谱量级 [分析，制备和工程]我们已经讨论了高效液相色谱如何提供分析数据，用于定性和定量样品中的化合物。然而，高效液相色谱也可以用来纯化和收集所需的每一个化合物，在流通池下游使用组分收集器。这个过程被称为制备液相[如图 K].在制备液相中，科学家可以收集每个流出色谱柱的组分[例如：在本例中，
高效液相色谱流动相如何脱气
高效液相色谱仪（HPLC）现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样，在食品分析中，无论是残留分析还是成分分析，HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样，你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据，首先你要保养好它，使它处于一个良好的待机状态，这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获
液相色谱的流动相怎么制备
照着要求制备呀，一般都给了流动相要求，照着配就行了，配置完要用0.45的膜虑过，再脱气，方可使用。
液相色谱的流动相的特点
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：（1）流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。（2）流动相与样品不产生化学反应（3）流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的使用寿命(可运用
液相色谱流动相注意事项
一、流动相溶剂的选择1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2.溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3.在制备分离中,溶剂应当易于除去,不
液相色谱流动相选择要点
1）流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。2）纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。3）必须与检测
液相色谱的流动相的要求
流动相要求液相色谱的流动相必须符合下列要求：（1）能溶解样品，但不能与样品发生反应。（2）与固定相不互溶，也不发生不可逆反应。（3）粘度要尽可能小，这样才能有较高的渗透性和柱效。（4）应与所用检测器相匹配。例如利用紫外检测器时，溶剂要不吸收紫外光。（5）容易精制、纯化、毒性小，不易着火，价格尽量低等
液相色谱流动相注意事项
一、 流动相溶剂的选择1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2.溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3.在制备分离中, 溶剂应当易于除去
液相色谱质谱仪流动相的要求
流动相的要求 每次开机前，保证超纯水和流动相的新鲜，泵的各个管路不应余留上次残留的溶剂。 流动相需符合HPLC与LC-MS要求等级，流动相中尽量加易挥发的盐，尽量不使用表面活性剂之类； 否则容易导致离子抑制，表面活性剂产生的加合物和离子簇会干扰质谱数据。 如果遇到离子抑制，可以把样品峰往后推
高效液相色谱的流动相要点
流动相溶剂的选择1）所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2）溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3）在制备分离中，溶剂应当易于除去，不干扰
液相色谱流动相注意事项
一、 流动相溶剂的选择1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性，不与固定相和样品组分起反应，其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2.溶剂应当不干扰检测器的工作，溶剂应与检测器匹配，选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3.在制备分离中, 溶剂应当易于除去
液相色谱流动相的贮存方法
液相色谱流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因为许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑剂，导致溶剂被污染。被污染的溶剂如用于液相色谱系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成的变化，同时防止空气中的氧和二氧化碳溶入流动相中。 液相色谱
液相色谱流动相的pH值
流动相的pH值采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在；
用甲醇做流动相和用乙腈做流动相有什么区
乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色谱柱方法开发中广泛使用的两种常见溶剂。所以，除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脱能力这一事实外，色谱分析人员还应该知道其他的特性吗?让我们来讨论一些所有色谱专家都应该知道的问题。首先，对流动相溶液的准备提出几点意见。只有纯水溶液部分才能正确调整pH值。不要尝试测量
流动相的特点和应用
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。
流动相色谱柱怎么使用？
1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用
流动相的基本性质
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。
关于流动相的特点介绍
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点： （1）流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 （2）流动相与样品不产生化学反应 （3）流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的
影响流动相强度的因素
流动相的强度对色谱的保留起到非常重要的作用。今天，我们就来探讨下影响流动相强度的因素。 1. 有机相比例 2. 有机溶剂种类： 在反相色谱中，常用的有机相为乙腈、甲醇、四氢呋喃。 在反相色谱中，流动相的有机相（通常用B%表示）比例越高，流动相强度越大，组分的保留因子k越小。 在日常的方