毛细管电泳技术发展历程
毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE),又称高效毛细管电泳,是一类以毛细管为分离通道、高压直流电场为驱动力的新型液相分离分析技术 (Fig.1)。自20世纪90年代以来,该技术迅速被各种标准 (包括中国药典、国标、美国药典,甚至是欧洲标准) 所收录,成为现代分析科学中继高效液相色谱 (High PerformanceLiquid Chromatography, HPLC) 之后的又一重大进展。Fig. 1 毛细管电泳示意图早在1807年,俄国莫斯科大学的斐迪南·弗雷德里克·罗伊斯(Ferdinand Frederic Reuss) 在湿粘土中插上带玻璃管的正负两个电极,施加电压后发现正极玻璃管中原有的水层变混浊,即带负电荷的粘土颗粒向正极移动引起,首次发现了电泳现象,并命名为 cataphoresis。这些早期发现引起了物理化学家的兴趣,他们开发了一些实验装置 (如Fig. 2所示) 来演示这些现......阅读全文
毛细管电泳展望(一)
一, 毛细管电泳的兴起与发展毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE),又称高效毛细管电泳(HPCE)是近年来发展最快的分析化学研究领域之一.1981年Jorgenson等[1]在75μm内径的毛细管内用高电压进行分离,创立了现代毛细管电泳.1984年Terabe等
毛细管电泳的分类
分离模式毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳,见表1。毛细管电泳的多种分离模式,给样品分离提供了不同的选择机会,这对复杂样品的分离分析是非常重要的。表1毛细管电泳类型 类型 缩写 说明 1 单根毛细管 毛细管区带电泳 CZE 毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液
毛细管电泳的分类
分离模式毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳,见表1。毛细管电泳的多种分离模式,给样品分离提供了不同的选择机会,这对复杂样品的分离分析是非常重要的。表1毛细管电泳类型 类型 缩写 说明 1 单根毛细管 毛细管区带电泳 CZE 毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液 毛细管等速
毛细管电泳的应用
CE具有多种分离模式(多种分离介质和原理),故具有多种功能,因此其应用十分广泛,通常能配成溶液或悬浮溶液的样品(除挥发性和不溶物外)均能用CE进行分离和分析,小到无机离子,大到生物大分子和超分子,甚至整个细胞都可进行分离检测。它广泛应用于生命科学、医药科学、临床医学、分子生物学、法庭与侦破鉴定、化学
毛细管电泳的分类
分离模式毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳,见表1。毛细管电泳的多种分离模式,给样品分离提供了不同的选择机会,这对复杂样品的分离分析是非常重要的。表1毛细管电泳类型 类型 缩写 说明 1 单根毛细管 毛细管区带电泳 CZE 毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液 毛细管等速
毛细管电泳的分类
分离模式毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳,见表1。毛细管电泳的多种分离模式,给样品分离提供了不同的选择机会,这对复杂样品的分离分析是非常重要的。表1毛细管电泳类型 类型 缩写 说明 1 单根毛细管 毛细管区带电泳 CZE 毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液 毛细管等速
毛细管电泳的分类
分离模式毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳,见表1。毛细管电泳的多种分离模式,给样品分离提供了不同的选择机会,这对复杂样品的分离分析是非常重要的。表1毛细管电泳类型类型缩写说明1 单根毛细管毛细管区带电泳CZE毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液毛细管等速电泳CITP使用两种不同
毛细管电泳展望(二)
毛细管凝胶电泳(capillary gel electrophoresis,CGE)CGE是将平板电泳的凝胶移到毛细管中作支持物进行电泳,不同体积的溶质分子在起"分子筛"作用的凝胶中得以分离.常用于蛋白质,寡聚核苷酸,核糖核酸(RNA),DNA片段分离和测序及聚合酶链反应(PCR)产物分析.CGE能
毛细管电泳缓冲试剂
缓冲液缓冲试剂的选择主要由所需的pH决定,在相同的pH下,不同缓冲试剂的分离效果不尽相同,有的可能相差甚远。CE中常用的缓冲试剂有:磷酸盐、硼砂或硼酸、醋酸盐等。缓冲盐的浓度直接影响到电泳介质的离子强度,从而影响Zeta电势,而Zeta电势的变化又会影响到电渗流。缓冲液浓度升高,离子强度增加,双电层
毛细管电泳仪毛细管电泳仪操作注意事项
注意事项7.1 长时间不使用的试剂不得存放于仪器托盘中,特别是盐酸,有可能造成仪器部件的腐蚀,和仪 器内的湿度增加 7.2 未涂层的毛细管长时间不用,要先用水清洗,再用空气吹干 7.3 长时间不使用仪器,在停机之前必须使样品及缓冲溶液托盘处于Load状态7.4 仪器要注意防尘和防潮。
毛细管电泳具备哪些优点
毛细管电泳具备如下优点: (1) 高效 塔板数目在105-106 片/m 间,当采用CGE 时,塔板数目可达107 片/m 以上; (2) 快速 一般在十几分钟内完成分离; (3) 微量 进样所需的样品体积为nL 级; (4) 多模式 可根据需要选用不同的分离模式且仅需一台仪器;
毛细管电泳的分离原理
电泳和电渗流并存,在不考虑相互作用的前提下,粒子在毛细管内电介质中的迁移速率是两种速率的矢量和,在典型的毛细管电泳分离中,溶质的分离基于溶质间电泳速率的差异。电渗流的速率绝对值一般大于粒子的电泳速率,并有效地成为毛细管电泳的驱动力。溶质从毛细管的正极端进样,带正电的粒子最先流出,中性粒子次之,带负电
毛细管电泳分离因素温度
温度温度影响分离重现性和分离效率,控制温度可以调控电渗流的大小。温度升高,缓冲液粘度降低,管壁硅轻基解离能力增强,电渗速度变大,分析时间减短,分析效率提高。但温度过高,会引起毛细管柱内径向温差增大,焦耳热效应增强,柱效降低,分离效率也会降低。
毛细管电泳仪简介
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分
毛细管电泳检测方法分类
毛细管电泳通常用到的检测方法有吸收光谱,荧光光谱,热镜,拉曼光谱,质谱和电化学方法。
毛细管电泳法的特点
【毛细管电泳】是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。【所用设备】主要部件有0~30kV可调稳压稳流电源,内径小于100μm(常用50~75μm)、长度一般为30~100cm的弹性石英毛细管、电极槽、检测器和进样装
毛细管电泳技术缺点
毛细管电泳的缺点是:(1) 由于进样量少,因而制备能力差;(2) 由于毛细管直径小,使光路太短,用一些检测方法(如紫外吸收光谱法)时,灵敏度较低;(3)电渗会因样品组成而变化,进而影响分离重现性。
毛细管电泳的技术特点
毛细管电泳通常使用内径为25-100 μm 的弹性(聚酰亚胺)涂层熔融石英管。标准毛细管的外径为375 μm,有些管的外径为160 μm。毛细管的特点是:容积小(一根100 cm×75 μm 管子的容积仅4.4 μL);侧面/截面积比大,因而散热快、可承受高电场(100-1000 V/cm);可使用
毛细管电泳的基本介绍
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内
毛细管电泳的仪器系统
毛细管电泳系统的基本结构包括进样系统、两个缓冲液槽、高压电源、检测器、控制系统和数据处理系统。1-温度控制系统;2-高压电源;3-高压电极槽;4-毛细管;5-检测器;6-低压电极槽;7-铂丝电极;8-记录/数据处理由于毛细管内径的限制,检测信号是CE系统最突出的问题。紫外可见法(UV)是CE常用的检
毛细管电泳仪分类
毛细管电泳仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室毛细管电泳仪和工业毛细管电泳仪。2、按分离原理可分:毛细管色谱电泳仪、毛细管区带电泳仪、毛细管凝胶电泳仪、毛细管胶束电动电泳仪、毛细管等电聚焦电泳仪和毛细管等速电泳仪等。3、按分离特征可分:高效毛细管电泳仪、高选择性毛细管电泳仪、高灵敏度毛细管电泳
毛细管电泳的相关介绍
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内
毛细管电泳的分离模式
毛细管区带电泳(Capillary Zone Electrophoresis, CZE)最常见的模式,用以分析带电溶质。样品中各个组分因为迁移率不同而分成不同的区带。为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁做化学修饰。毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis,CGE
芯片胶束电动毛细管电泳
胶束电动毛细管电泳是毛细管电泳与胶束增溶色谱相结合的分离技术,其原理是在装有胶束溶液的通道内,溶质组分在电场力的作用下根据其在胶束相和水相之问的分配不同而产生分离。Jin等在玻璃芯片上采用胶束电动色谱的分离模式,以Bio-Rad公司的CE·SDS缓冲液作为分离介质,成功实现了相对分子质量在14 40
毛细管电泳的基本结构
一般在一根长 40 ~ 100 cm, 内径 10 ~ 100 mm 的毛细管柱中充入缓冲溶液,柱的两端置于两个缓冲池中。在两个缓冲池之间的毛细管接有两个铂电极。试样从一端进入,而检测器则在另一端。使用的高电压可以反相,以能分析阴离子。进样系统毛细管分离通道十分细小,整个柱体积一般只有4~5μL,所
微量制备毛细管电泳实验
多次分离 单次分离 实验方法原理 实验材料 多肽:ACTH 4-10
毛细管电泳仪简介
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)是20世纪80年代初发展起来的一种新型分离分析技术,乃经典电泳技术和现代微柱分离有机结合的产物,是继gao效液相色谱(HPLC)之后,分析科学领域的又一次革命。 毛细管电泳泛指以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品
毛细管电泳影响分离因素
毛细管电泳影响分离因素 1.缓冲液 缓冲试剂的选择主要由所需的pH决定,在相同的pH下,不同缓冲试剂的分离效果不尽相同,有的可能相差甚远。CE中常用的缓冲试剂有:磷酸盐、硼砂或硼酸、醋酸盐等。 缓冲盐的浓度直接影响到电泳介质的离子强度,从而影响Zeta电势,而Zeta电势的变化又会影响到电
毛细管电泳的仪器系统
毛细管电泳系统的基本结构包括进样系统、两个缓冲液槽、高压电源、检测器、控制系统和数据处理系统。1-温度控制系统;2-高压电源;3-高压电极槽;4-毛细管;5-检测器;6-低压电极槽;7-铂丝电极;8-记录/数据处理由于毛细管内径的限制,检测信号是CE系统最突出的问题。紫外可见法(UV)是CE常用的检
毛细管电泳的优缺点
优点:操作简单,试样量少,分离效率高,成本低等。分离能力强,分离速度快,进样量小。像高效液相色谱,能够分离不带电荷的物质。像毛细管电泳法,不需要压力泵系统的情况下,提供了微量体积试样溶液的高效分离通过电渗流泵,而不是通过机械输送流动相通过固定相的。明显地简化了输送体系。电渗泵产生的是塞子式流动轮廓,