JBC推荐论文:北大学者揭示癌基因Src促癌新机制

来自北京大学天然药物与仿生药物国家重点实验室的研究人员发表了题为“Src-mediated phosphorylation converts FHL1 from tumor suppressor to tumor promoter” 的研究论文,揭示了重要蛋白激酶Src促癌作用的新机制,并颠覆性地改变了对抑癌FHL1蛋白在肿瘤发生发展中作用的传统认识。 这一研究成果公布在Journal of Cell Biology杂志上,并被作为聚焦论文推荐,张宏权教授为该文的通讯作者,其团队的王翔及魏潇凡博士为并列第一作者。该研究工作得到军事科学院军事医学研究院叶棋浓研究员团队的协助。 FHL1蛋白属于FHL家族,含有LIM锌指蛋白结构域。FHL1通过LIM结构域介导相关转录调控因子、激酶及结构蛋白等多种蛋白质相互作用,最终影响细胞的分化与发育。FHL1蛋白在骨骼肌和心脏中高表达,与某些骨骼肌和心脏疾病相关。越来越多的研究证实FH......阅读全文

人磷酸化AKT蛋白(AKT)ELISA试剂盒使用说明

原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 AKT 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 AKT与单抗结合,加入生物素化的抗人AKT,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,A

大连化物所等对磷酸化蛋白质组分析方法研究

近日,中国科学院大连化学物理研究所生物分离分析新材料与新技术研究组(1809组)邹汉法、叶明亮等在磷酸化蛋白质组分析新方法研究方面取得新进展。该团队与加拿大西安大略大学教授李顺成研究团队利用生物分子之间的特异性识别作用建立了一种非抗体的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法,显著提高了酪氨酸磷酸化蛋白质组的分析

植物磷酸化蛋白质组学技术研发方面获进展

  蛋白质磷酸化是在激酶催化下将磷酸基团转移到底物蛋白质上的可逆过程,是能够调控蛋白质结构与功能且参与细胞内信号转导的重要翻译后修饰,在植物的生长、发育、环境适应以及作物的产量和品质调控中发挥着重要作用。深度解析磷酸化蛋白质组,是探讨磷酸化如何参与这些生物学过程以及筛选与作物重要农艺性状相关的关键磷

想检测磷酸化的蛋白,这个磷酸的位点,怎么选择

每个蛋白质磷酸化的位点各异,有的不止有一个磷酸化位点,有的在不同位点磷酸化以后获得的功能也会不同。楼主要选择的,大概是检测时所用的抗体能够识别哪个磷酸化位点的epitope。如果有相关文献表示某个磷酸化位点同楼主所感兴趣的该蛋白功能相关的话,可以据此选择。如果这些信息仍然未知,楼主只好使用较为常见的

想检测磷酸化的蛋白,这个磷酸的位点,怎么选择

每个蛋白质磷酸化的位点各异,有的不止有一个磷酸化位点,有的在不同位点磷酸化以后获得的功能也会不同。楼主要选择的,大概是检测时所用的抗体能够识别哪个磷酸化位点的epitope。如果有相关文献表示某个磷酸化位点同楼主所感兴趣的该蛋白功能相关的话,可以据此选择。如果这些信息仍然未知,楼主只好使用较为常见的

细胞外囊泡中磷酸化蛋白质组学研究

蛋白磷酸化水平的变化可指针疾病的变化,但却鲜有磷酸化蛋白被开发成为疾病诊断标记物。细胞外囊泡是由膜封闭的微环境,不受外界蛋白酶和其他酶的影响。这使得细胞外囊泡在体液中高度稳定,为开发磷酸化蛋白应用于医学诊断提供了契机。今天为大家介绍一篇细胞外囊泡中磷酸化蛋白相关的文章:Phosphoproteins

用蛋白质组学方法绘制磷酸化位点图谱

方案1 用带有 Fe(Ⅲ) 和 Ga(Ⅲ)的 IMAC 纯化磷酸化多肽 方案2 在 MALDI 分析之前或之后对磷酸化多肽进行碱性磷酸酶处理 方案3 结合固定化金属离子亲和介质和 MALDI-TOF-MS 直接分析方法对磷酸化多肽进行特征分析实验 方

大鼠磷酸化AKT蛋白(AKT)ELISA试剂盒使用说明

原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 AKT 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 AKT与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠AKT,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值

磷酸化蛋白质组鉴定技术路线及经典案例介绍

  今天,小编跟您聊聊磷酸化蛋白质组鉴定!    蛋白质翻译后修饰(PTMs)几乎参与了细胞所有正常生命活动的过程,并发挥十分重要的调控作用。蛋白修饰已经成为国际上蛋白质研究的一个极其重要的领域,目前研究比较成熟的有磷酸化、乙酰化、糖基化、泛素化等。    蛋白质磷酸化是生物体中最常见、最重要的

如何查看抗体是磷酸化还是非磷酸化

  磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有:  1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。  2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。  4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的

酶的磷酸化与脱磷酸化的比较

磷酸化是一种常见的修饰形式。酶蛋白中带羟基的氨基酸残基Thr、Ser与Tyr可作为磷酸化修饰位点。磷酸化是由ATP提供磷酸基,并在蛋白激酶的催化下完成的。脱磷酸反应则是由磷酸酶的催化下完成的。有的酶在磷酸化修饰后活性增高,而另一些酶则在磷酸化修饰后活性反受抑制。由上可见,酶的化学修饰调节具有以下特点

蛋白质组和磷酸化蛋白质组联合分析慢性肾病并发高血压

  慢性肾病病人一般会出现很多的并发症,其中大多数肾损伤晚期病人都患有严重的高血压。盐是慢性肾病和高血压发病的主要致病因素之一,但其中的病理机制仍然不清楚。本文利用蛋白质组和磷酸化蛋白质组联合分析的技术,对慢性肾病并发高血压的病理机制进行了全面系统性的分析。   Proteomic and p

蛋白质组和磷酸化蛋白质组联合分析慢性肾病并发高血压

  慢性肾病病人一般会出现很多的并发症,其中大多数肾损伤晚期病人都患有严重的高血压。盐是慢性肾病和高血压发病的主要致病因素之一,但其中的病理机制仍然不清楚。本文利用蛋白质组和磷酸化蛋白质组联合分析的技术,对慢性肾病并发高血压的病理机制进行了全面系统性的分析。   Proteomic and p

磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别

  磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有:  1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。  2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。  4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的

磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别

1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的多肽-〉人工体外磷酸化-〉链接半抗原-〉免疫动物-

抗体磷酸化与非磷酸化的区别与关系

非磷酸化是测该蛋白的含量,不能知道其活性状态,抗体磷酸化是测该蛋白的磷酸化水平如何,侧重于了解该蛋白的一种活性状态。很多信号通路的蛋白在受到某些刺激后都是通过改变其磷酸化水平的改变而引起细胞的一系列反应,其蛋白含量并不见得会有多大的变化。首先要说明的就是检测的蛋白质在你检测的组织或者细胞中是表达的,

人磷酸化蛋白激酶C(phosPKC)ELISA试剂盒

人磷酸化蛋白激酶C(phos-PKC)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 phos-PKC 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 phos-PKC与单抗结合,加入生物素化的抗人phos-PKC,形成免疫复合物连接

磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体的鉴定步骤

磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体的鉴定:1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制

磷酸化蛋白-WB-做不好?文献指出了你可能忽略的原因

WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法,然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做!这是因为处于不同的细胞生长状况和 / 或特定的细胞周期时,磷酸化蛋白可能仅占细胞总蛋白中的一小部分,处理不得当时,还会快速的去磷酸化。磷酸化蛋白质 WB 做不好的原因有许多,比如封闭问题,抗体问题,或所需的磷酸化

大鼠磷酸化蛋白激酶C(PPKC)酶联免疫分析

本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)水平。用纯化的大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被

分子生物学蛋白质磷酸化分析技术

在所 有 的 翻译后修饰中,可逆的磷酸化,几乎调节着生命活动的整个过程,包括细胞的增殖、发育和分化,神经活动,肌肉收缩,新陈代谢,肿瘤发生等。据统计,哺乳动物细胞内有三分之一以上的蛋白质可以被磷酸化川,蛋白质的可逆磷酸化使得蛋白质组学研究更为复杂。 真核 生 物 细胞蛋白质中主要的磷酸化氨基酸为丝氨

Nature:高盐饮食通过促进蛋白tau磷酸化损害大脑认知功能

  在一项新的针对小鼠的研究中,来自美国威尔康乃尔医学院的研究人员发现高盐饮食可能会导致化合物一氧化氮的缺乏,从而对认知功能产生负面影响。当一氧化氮水平过低时,大脑中的蛋白tau发生磷酸化,从而导致痴呆症。相关研究结果于2019年10月23日在线发表在Nature期刊上,论文标题为“Dietary

分子生物学蛋白质磷酸化分析技术

在所 有 的 翻译后修饰中,可逆的磷酸化,几乎调节着生命活动的整个过程,包括细胞的增殖、发育和分化,神经活动,肌肉收缩,新陈代谢,肿瘤发生等。据统计,哺乳动物细胞内有三分之一以上的蛋白质可以被磷酸化川,蛋白质的可逆磷酸化使得蛋白质组学研究更为复杂。 真核 生 物 细胞蛋白质中主要的磷酸化氨基酸为丝氨

免疫荧光实验TIRF成像

  Kindlin-2和talin共同作用于桩蛋白激活整合素的表达  整合素是一种跨膜蛋白,在介导细胞黏附到细胞外基质(ECM)过程中发挥重要的作用。整合素在和配位体结合并发挥作用之前需要被激活。Kindlin和talin如何在非造血细胞中介入激活整合素这一过程的原理并不十分清晰。美国的科研人员发现

什么是磷酸化

磷酸化是将磷酸基团加在中间代谢产物上或加在蛋白质(protein)上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸(蛋白质的主要单位)上,其中以丝氨酸为多,接着是苏氨酸。除了蛋白质以外,部分核苷酸,如三磷酸腺苷(ATP)或三磷酸鸟苷(GTP)的形成,也是经由二磷酸腺苷

磷酸化的和非磷酸化的抗体有什么不同

通常来说,磷酸化抗体芯片上检测某一个磷酸化位点会设置一对抗体,即:磷酸化的和非磷酸化的抗体。说到区别,可能从制备讲起你可以更加清晰一些。首先就是多肽合成,由于磷酸化位点的保守性,对某一个磷酸化位点周边20个氨基酸左右的序列合成多肽,磷酸化多肽肯定带有磷酸基团,非磷酸化多肽就掉了这个磷酸基团。然后就是

磷酸化的和非磷酸化的抗体有什么不同

通常来说,磷酸化抗体芯片上检测某一个磷酸化位点会设置一对抗体,即:磷酸化的和非磷酸化的抗体。说到区别,可能从制备讲起你可以更加清晰一些。首先就是多肽合成,由于磷酸化位点的保守性,对某一个磷酸化位点周边20个氨基酸左右的序列合成多肽,磷酸化多肽肯定带有磷酸基团,非磷酸化多肽就掉了这个磷酸基团。然后就是

磷酸化位点分析实验磷酸化位点的确定

磷酸肽的化学测序 磷酸肽的质谱分析 源后衰变 用酶和化学方法去磷酸化             实验方法原理 磷酸化位点的确定也使用一

磷酸化位点分析实验磷酸化位点的确定

实验方法原理 磷酸化位点的确定也使用一些通用方法;磷酸化蛋白质被纯化,如果可能蛋白质要均一;磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物,其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列,定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法, 2D-PP 作图、 HPLC 或 l

透化细胞和退化细胞器中蛋白质的磷酸化实验

试剂的制备单层培养细胞的透化悬浮培养细胞的透化用分离的亚细胞组分分析蛋白质的磷酸化用分离的亚细胞组分进行激酶分析试剂、试剂盒胞外缓冲液                                                                  胞内缓冲液