RNA探针实时监测神经网络活动

过去十年,神经生物学家的注意力一直集中在神经网络功能研究,而非单个神经细胞。但是大脑的关键功能(信息处理、储存和传输)都需要在单细胞水平执行。 很长一段时间,神经网络研究工作者面临一些方法上的困难,旨在研究单个神经元电活动和代谢活动的传统方法无法提供神经网络结构或功能信息。常用的方法,如ELISA、PCR或经典生化方法并不适用于神经网络研究,因为这类方法不兼容活细胞(样品必须被预先固定),破坏性处理直接擦除了细胞之间的连接。 俄罗斯的科学家自主优化了德国默克公司开发的纳米金标RNA探针(SmartFlareTM,Merck),使其能够用来鉴定活细胞中mRNA表达水平。 得益于小尺寸和优异的性能,RNA探针很容易穿透细胞,并与靶mRNA特异性结合后发荧光。观察可视化的mRNA只需一台显微镜,不需要额外实验样品操作。 根据mRNA表达水平可以判断正常状态下或各种应激状态下细胞内蛋白质合成活力。生物和生物医学研究所所长Ma......阅读全文

mRNA如何变成RNA

1、mRNA携带遗传信息,在蛋白质合成时充当模板的RNA。 信使RNA从脱氧核糖核酸(DNA)转录合成的带有遗传信息的一类单链核糖核酸(RNA)。它在核糖体上作为蛋白质合成的模板,决定肽链的氨基酸排列顺序。2、cDNA就是相对于mRNA而言的单链DNA。能与rna配对的单链dna3、内含子:基因包含

遗传编码荧光RNA探针研究获新进展

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RNA病毒怎么合成mRNA

和DNA和成mRNA一样的,RNA聚合酶可以完成这一过程,只不过特殊的单股RNA病毒分为正链mRNA(即mRNA和原RNA一样)和负链mRNA(和原RNA互补)。

钙离子荧光探针:比值型荧光探针

前面我们介绍了荧光指示剂法可以将Ca2+检测的实验与其他技术结合使用,如可以与流式细胞仪、荧光分光光度计、或者荧光显微镜进行联合检测 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等,数量较少,可见光型数目较多,包括Fluo-3、钙黄绿素、Rhod-2等。荧光指示剂根据测光原理和数据

RNA探针的概念

RNA探针是一类很有前途的核酸探针,由于RNA是单链分子,所以它与靶序列的杂交反应效率极高。早期采用的RNA探针是细胞mRNA探针和病毒RNA探针,这些RNA是在细胞基因转录或病毒复制过程中得到标记的,标记效率往往不高,且受到多种因素的制约。

RNA探针技术简介

许多载体如pBluescript, pGEM等均带有来自噬菌体SP6或E.coli噬菌体T7或T3的启动子,它们能特异性地被各自噬菌体编码的依赖于DNA的RNA聚合酶所识别,合成特异性的RNA。在反应体系中若加入经标记的NTP,则可合成RNA探针。RNA探针一般都是单链,它具有单链DNA探针的优点,

RNA探针的简介

  许多载体如pBluescript, pGEM等均带有来自噬菌体SP6或E.coli噬菌体T7或T3的启动子,它们能特异性地被各自噬菌体编码的依赖于DNA的RNA聚合酶所识别,合成特异性的RNA。在反应体系中若加入经标记的NTP,则可合成RNA探针。RNA探针一般都是单链,它具有单链DNA探针的优

RNA探针的应用介绍

这类RNA探针主要用于研究目的,而不是用于检测。例如,在筛选逆转录病毒人类免疫缺陷病毒(HIV)的基因组DNA克隆时,因无DNA探针可利用,就利用HIV的全套标记mRNA作为探针,成功地筛选到多株HIV基因组DNA克隆。又如进行中的转录分析(nuclear run on transcrip-tion

常见RNA探针及其特点

常见RNA探针及其特点:RNA探针是指带有标记的能与组织内相对应的核苷酸序列互补结合的一段单链cDNA或cRNA分子。根据在RNA杂交中所使用的探针依其来源可分为三种:即特异性cDNA、cRNA探针和人工合成寡核苷酸探针。 cRNA探针:是以cDNA为模板,通过体外转录而获得的。因为它是一种单链探针

mRNA-Amplification-with-T7-RNA-Polymerase

Materials MessageAmp II aRNA Amplication Kit (Cat #1751, Ambion) 100% Ethanol RNA samples (e.g. 1 µg RNA per sample) Procedure Reverse transcription

信使RNA的mRNA提取分离纯化

真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取 ,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或寡聚(U)

怎样从总RNA中提取mRNA

大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(OligoT)可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理。具体到实验手段上,现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用。磁珠法一般是用生物素标记OligoT,亲和素标记磁珠(生物素和亲和素间具有高

怎样从总RNA中提取mRNA

大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(OligoT)可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理。具体到实验手段上,现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用。磁珠法一般是用生物素标记OligoT,亲和素标记磁珠(生物素和亲和素间具有高

荧光探针有毒吗

有毒的。在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其荧光性质可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。

RNA探针技术的应用介绍

这类RNA探针主要用于研究目的,而不是用于检测。例如,在筛选逆转录病毒人类免疫缺陷病毒(HIV)的基因组DNA克隆时,因无DNA探针可利用,就利用HIV的全套标记mRNA作为探针,成功地筛选到多株HIV基因组DNA克隆。又如进行中的转录分析(nuclear run on transcrip-tion

常见RNA探针的技术特点

cRNA探针:是以cDNA为模板,通过体外转录而获得的。因为它是一种单链探针,因此也避免了应用双链cDNA探针做杂交反应时存在的两条之间的复性问题。cRNA与RNA之间形成的杂交体要比cDNA-RNA杂交体稳定。cRNA-RNA之间形成的杂交体不受RNA酶的影响。因此杂交反应后可用RNA酶处理,以除

RNA探针的概念和分类

RNA探针是指带有标记的能与组织内相对应的核苷酸序列互补结合的一段单链cDNA或cRNA分子。根据在RNA杂交中所使用的探针依其来源可分为三种:即特异性cDNA、cRNA探针和人工合成寡核苷酸探针。

荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别

  荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别  荧光原位杂交技术问世于70年代后期,其曾多用于染色体异常的研究,近年来随着FISH所应用的探针钟类的不断增多,特别是全Cosmid探针及染色体原位抑制杂交技术的出现,使FISH技术不仅在细胞遗传学方面,而且还广泛应用于肿瘤学研究,如基因诊断基因定位等 。原

植物RNA的分离(总RNA的分离和mRNA的分离)

1. 总RNA的分离总RNA分离的方法很多,常采用的是异硫氰酸胍和b-巯基乙醇这两种RNase 抑制剂来抑制RNase的活性,同时,异硫氰酸胍与十二烷基肌氨酸钠(sarcosyl)共同作用可以破坏核蛋白复合体,使RNA顺利地解脱出来溶进缓冲液。由于RNA在碱性条件下不稳定,因而在整个提取过程中体

浙大:RNA编辑阻止RISC识别靶标mRNA

  MicroRNAs(miRNAs)结合Ago形成RNA诱导沉默复合体,通过沉默靶mRNA调控基因表达。miRNA的RNA编辑可能影响miRNA的加工,Ago复合物的组装,以及靶mRNA的结合。然而,组装进Ago复合物的被编辑的miRNA的功能,还没有被深入研究过。  浙江大学生命科学学院章晓波教

如何评价总RNA或mRNA的质量?

一个细胞有很多种的RNA,如mRNA,rRNA,tRNA总RNA指的是一个细胞(一种生物)里面所有种类的RNA平时说的提取总RNA指的就是提取一个细胞里面的所有种类的RNA 。 mRNA的功能:把DNA模板链上的 碱基 序列 转录 为RNA分子上的碱基序列(mRNA),再从mRNA上

环状rna,为什么blast上标注mrna

环状RNA(circRNA)区别传统线性RNA类新型RNA具闭环结构量存于真核转录组部环状RNA由外显序列构同物种具保守性同存组织及同发育阶段表达特异性由于环状RNA核酸酶敏比线性RNA更稳定使其作新型临床诊断标记物发应用具明显优势近已新热点阅微基于2015始提供lncRNA环状RNA表达检测服务运

从RNA中提取mRNA的方法步骤

从总RNA中分离mRNA采用Promega公司的PolyATract® mRNA Isolation System III。 使用该试剂盒,mRNA产量极低,因此下述方法是以Promega公司试剂盒操作手册为基础,并采用储昭晖硕士(作物遗传改良国家重点实验室植物分子生物学水稻分室)所建议的改进方

摇核酸的荧光探针

DNA和RNA?摇核酸的荧光探针 用于共聚焦激光扫描显微镜的主要有Acridine Orange(吖啶橙,AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶,PI)。两种染料既可标记DNA又可标记RNA,如为获得单独的DNA或RNA分布,染色前可用RNA酶或DNA酶处理细胞。PI不能进入完整的细胞膜

荧光探针的功能介绍

在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其 荧光性质(激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。

荧光探针技术的概念

受到激发光激发后,从激发态单重态回到基态,在紫外-可见-近红外区有特征发光,称之为荧光。荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子,被称为荧光探针。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针,可以根据探针尺寸分为

荧光探针的相关介绍

  在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。  与核酸(DNA或RNA)、蛋白质或其他大分子结构非共价相互作用而使一种或几种荧光性质发生改变的小分子物质。可用于研究大分子物质的性

荧光探针的分类检测

  常用的荧光探针有荧光素类探针、无机离子荧光探针、荧光量子点、分子信标等。荧光探针除应用于核酸和蛋白质的定量分析外,在核酸染色、DNA电泳、核酸分子杂交、定量PCR技术以及DNA测序上都有着广泛的应用。  检测荧光探针的方法主要有单点测定和电荷耦合装置(CCD)荧光成像(包括用于微区分析的激光共聚

溶酶体荧光探针原理介绍

溶酶体荧光探针溶酶体为单层膜蛋白包围的内含一系列酸性水解酶的小体。溶酶体中含有多种酶,如糖苷酶、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、组织蛋白酶等等,是物质代谢的场所。弱碱性胺选择性聚集在胞内低pH值的小室中,可用于研究溶酶体的生物合成和发病机理。其中最常用的就是DAMP,它不发荧光,需要和抗DNP的抗体共同使用

RNA探针的基本信息介绍

  RNA探针是一类很有前途的核酸探针,由于RNA是单链分子,所以它与靶序列的杂交反应效率极高。早期采用的RNA探针是细胞mRNA探针和病毒RNA探针,这些RNA是在细胞基因转录或病毒复制过程中得到标记的,标记效率往往不高,且受到多种因素的制约。这类RNA探针主要用于研究目的,而不是用于检测。例如,