JACS:华东理工大学实现光控荧光“双重检测”生物成像

近日,国际化学领域著名刊物《美国化学会志》在线报导了华东理工大学化学与分子工程学院费林加诺贝尔奖科学家联合研究中心题为“Photocontrolled Fluorescence “Double-Check” Bioimaging Enabled by a Glycoprobe−Protein Hybrid”的最新研究成果(DOI: 10.1021/jacs.8b05425)。 近年来细胞及活体成像技术发展迅速,但设计合成可在活细胞中精确定位并远程调控的化学探针仍然是一项极具挑战的交叉学科研究课题。为解决这一关键问题,研究人员将糖基光控小分子荧光探针(Gal-NSp)与人血清白蛋白(HSA)通过主客体作用相结合,简易构建了可通过远程光控实现双制式荧光信号细胞精准定位及靶标识别的蛋白质光控荧光探针复合物。初步研究发现,不同于传统单制式光致变色探针,该复合探针体系可通过紫外/可见光的循环光照,实现对插入蛋白质疏水空腔螺吡喃/部......阅读全文

双重荧光定量PCR探针荧光基团该怎么选择

有干扰的话,在仪器上面就可以看出来,比如说,FAM和VIC,FAM有信号,单独看VIC也肯定有信号,只是低点而已

JACS:华东理工大学实现光控荧光“双重检测”生物成像

   近日,国际化学领域著名刊物《美国化学会志》在线报导了华东理工大学化学与分子工程学院费林加诺贝尔奖科学家联合研究中心题为“Photocontrolled Fluorescence “Double-Check” Bioimaging Enabled by a Glycoprobe−Protein

功能纳米荧光探针用于肿瘤细胞检测

  恶性肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病之一,目前已成为人类死亡的主要原因,并且其发病率呈逐年上升的趋势。若能早期发现肿瘤并及时治疗,可大大提高肿瘤的治愈率。因此,对于肿瘤的早期检测和诊治已成为各国科学家关注的热点。为了实现肿瘤早期诊治,目前研究大多集中于检测活细胞内一种肿瘤标志物,这可能会带来“假

荧光探针的分类检测

  常用的荧光探针有荧光素类探针、无机离子荧光探针、荧光量子点、分子信标等。荧光探针除应用于核酸和蛋白质的定量分析外,在核酸染色、DNA电泳、核酸分子杂交、定量PCR技术以及DNA测序上都有着广泛的应用。  检测荧光探针的方法主要有单点测定和电荷耦合装置(CCD)荧光成像(包括用于微区分析的激光共聚

新型光可控化学荧光探针-实现细胞精准定位

  华东理工大学和中科院上海药物所的一项最新合作研究为细胞的靶向、精准功能标记研究提供了新的光可控化学探针工具。相关研究成果日前在线发表于《自然-通讯》。  可靶向、精准探测不同细胞生命和疾病过程的荧光探针技术,对生命科学的发展和疾病早期诊断具有重要意义。传统荧光探针易受生物背景光干扰,且通常只能通

细胞凋亡检测实验——荧光探针双标记法

实验方法原理本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡,同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)对细胞进行双重染色,可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱(HT)是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病,

钙离子荧光探针:比值型荧光探针

前面我们介绍了荧光指示剂法可以将Ca2+检测的实验与其他技术结合使用,如可以与流式细胞仪、荧光分光光度计、或者荧光显微镜进行联合检测 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等,数量较少,可见光型数目较多,包括Fluo-3、钙黄绿素、Rhod-2等。荧光指示剂根据测光原理和数据

检测酶活性的荧光探针

检测酶活性的荧光探针 共聚焦激光扫描显微镜除了具备荧光显微镜检测荧光酶细胞化学的作用以外,在检测活细胞酶活性动态变化方面有着无可比拟的优势。通过对细胞施予不同的处理因素可检测细胞内相应的酶被激活或灭活的动态变化过程。有的酶荧光探针是自身就可发出荧光、有的是与酶结合后发出荧光、有的则是被酶分解后发出荧

自动荧光显微系统:高效光控蛋白

光遗传学是近年来最具创新性的显微技术之一,通过结合遗传学和光学方法,科学家们可以利用光来特异性控制活细胞中精确时间段的蛋白活性,以及蛋白相互作用。  在进行光遗传学实验的时候,研究人员经常需要使用一种激光共焦显微镜的光漂白模式(photobleaching mode)。虽然目前特殊激光或其它通过光学

自动荧光显微系统:高效光控蛋白

  光遗传学是近年来最具创新性的显微技术之一,通过结合遗传学和光学方法,科学家们可以利用光来特异性控制活细胞中精确时间段的蛋白活性,以及蛋白相互作用。  在进行光遗传学实验的时候,研究人员经常需要使用一种激光共焦显微镜的光漂白模式(photobleaching mode)。虽然目前特殊激光或其它通过

局部荧光探针可以检测肠癌啦!

  近日,国际化学与生物学杂志chemistry&biology发表了来自斯坦福大学医学院Matthew Bogyo研究小组的一项最新研究成果,他们发现一种荧光淬灭探针(aABP)能够特异性靶向在肠道发育不良中高表达的半胱氨酸蛋白酶,对指示肠道肿瘤具有非常高的敏感性和特异性。  早期检测结肠息肉能够

荧光探针有毒吗

有毒的。在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其荧光性质可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。

细胞骨架的荧光探针标记方法

细胞骨架主要有微管(micmtuble, MT),微丝(microfilament, MF),中间丝(intermediate filament, IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成,其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组

ros荧光探针检测结果怎么看

活性氧检测试剂盒(Reactive oxygen species assay kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细

LSCM常用的检测内容及其荧光探针

胞内游离钙 共聚焦激光扫描显微镜常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等,前两者为单波长激光探针,利用其单波长激发特点可直接测量细胞内Ca2+动态变化,为钙定性探针;后两者为双波长激发探针,利用其双波长激发特点和比率技术,能定量细胞内i,为钙定量探针。定量细胞内[Ca2+]i

荧光pH探针于细胞内pH检测的使用(一)

细胞内pH在各种细胞事件中起重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附等等。借助pH敏感的荧光指示剂,研究人员能够以更高的灵敏度、空间分辨率、采样密度来监控活细胞内的pH波动。 通常,细胞的细胞内pH在其各个细胞区室之间会有所不同。例如,

荧光pH探针于细胞内pH检测的使用(二)

  pH 6.0  pH 8.5  图2. 用RatioWorks™BCFL,AM标记的Hela细胞。将Hela细胞与5 µM RatioWorks™BCFL,AM(Cat# 21190)在37°C 下孵育30分钟

荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别

  荧光原位杂交探针和荧光探针有什么区别  荧光原位杂交技术问世于70年代后期,其曾多用于染色体异常的研究,近年来随着FISH所应用的探针钟类的不断增多,特别是全Cosmid探针及染色体原位抑制杂交技术的出现,使FISH技术不仅在细胞遗传学方面,而且还广泛应用于肿瘤学研究,如基因诊断基因定位等 。原

光致开关荧光探针用于微管蛋白的原位检测和超分辨成像

微管蛋白一直被认为是潜在癌症化疗的靶点。许多临床数据表明:跟踪微管蛋白的变化将有助于对癌症治疗。传统的宽场光学显微镜的显微分辨率受到衍射极限的限制,无法获得细胞内的精细结构信息,大大降低了对微管蛋白类分子的观察能力。远场超分辨成像方法是近些年发展起来的利用荧光分子在纳米级分辨率下对生物体内的相关物质

荧光响应型CRISPR荧光探针实现活细胞基因组高清成像

  中国科学院动物研究所研究员李幸系统梳理并评述了荧光点亮响应型CRISPR成像探针在活细胞基因组DNA成像中的最新进展,为这一前沿领域提供了全面的技术概览与未来展望。相关论文在线发表于《细胞-化学生物学》。  在活细胞中原位解析基因组DNA的动态行为,对揭示染色质三维结构、DNA相互作用、基因表达

蛋白质的内源荧光与荧光探针

利用荧光光谱法研究蛋白质一般有两种方法。一是测定蛋白质分子的自身荧光(内源荧光),另一种是当蛋白质本身不能发射荧光时,通过非共价吸附或共价作用向蛋白质分子的特殊部位引入外源荧光(也称荧光探针),然后测定外源荧光物质的荧光。  蛋白质的内源荧光 含有芳香族氨基酸(色氨酸(tryptophan ,Trp

荧光定量PCR检测试剂盒简述荧光探针法的应用

荧光定量PCR检测试剂盒简述荧光探针法的应用荧光定量PCR检测试剂盒的原理在于PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;P

荧光探针的相关介绍

  在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。  与核酸(DNA或RNA)、蛋白质或其他大分子结构非共价相互作用而使一种或几种荧光性质发生改变的小分子物质。可用于研究大分子物质的性

荧光探针的功能介绍

在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其 荧光性质(激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。

摇核酸的荧光探针

DNA和RNA?摇核酸的荧光探针 用于共聚焦激光扫描显微镜的主要有Acridine Orange(吖啶橙,AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶,PI)。两种染料既可标记DNA又可标记RNA,如为获得单独的DNA或RNA分布,染色前可用RNA酶或DNA酶处理细胞。PI不能进入完整的细胞膜

溶酶体荧光探针原理介绍

溶酶体荧光探针溶酶体为单层膜蛋白包围的内含一系列酸性水解酶的小体。溶酶体中含有多种酶,如糖苷酶、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、组织蛋白酶等等,是物质代谢的场所。弱碱性胺选择性聚集在胞内低pH值的小室中,可用于研究溶酶体的生物合成和发病机理。其中最常用的就是DAMP,它不发荧光,需要和抗DNP的抗体共同使用

荧光探针技术的概念

受到激发光激发后,从激发态单重态回到基态,在紫外-可见-近红外区有特征发光,称之为荧光。荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子,被称为荧光探针。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针,可以根据探针尺寸分为

新型复合荧光探针可实现快速、灵敏检测

  过氧亚硝酸盐(Peroxynitrite,ONOO-)是由超氧阴离子自由基和一氧化氮自由基形成的具有高活性的活性氮物种,是许多体内循环途径的信号传导分子。同时,该分子具有强氧化性,可引起自由基介导的硝化反应,从而会影响生物体内多种生物过程,对脂质、蛋白、DNA等造成不可逆转的损伤。研究表明,过氧

全新双重荧光定量PCR方法助力细菌污染核酸检测

  目前,核酸筛检系统(Nucleic Acids Testing,NAT)已广泛用于血制品常规病原体(乙肝、丙肝、艾滋、梅毒)的核酸检测,极大降低了相关疾病的输血传播。但是,在输血感染性风险中,血小板的细菌污染及相关败血症性输血反应仍是棘手的问题。将核酸筛检技术用于细菌污染检测还有不少困难,包括:

双重或多重荧光串色处理

在两种或两种以上荧光素之间,如果荧光发射峰很近,那么荧光光谱彼此会有部分重叠,检测时可能出现一种荧光素的信号扩散到另一荧光通道的情况。这种现象称为串色或荧光光谱交叉(crosstalk)。避免或排除光谱交叉干扰的方法通常有以下几种:1. 使用几种荧光素时,尽量选择相互之间无光谱交叉的荧光素。2. 降