PCR仪的基本原理

PCR仪的基本原理1、基本要素和扩增原理基本要素与DNA复制的基本要素是一致的。待拷贝的 DNA 称为模板,它可以是双链 DNA 也可是单链DNA,zui后扩增得到的产物是双链状态的。引物是 DNA 复制的先锋,就象结晶过程中的晶核,引导 DNA 的合成。在 PCR 扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。DNA 聚合酶是 DNA 复制的动力,在 dNTP 等底物存在时在引物的引导下沿着模板 DNA 合成互补的 DNA 链。2 、PCR 扩增的步骤首先将模板 DNA 置于 92℃ -96℃,进行变性(denaturation)处理,使 dsDNA 在高温下解链成为 ssDNA ,且热变性不改变其化学性质;然后退火(annealing) ,将温度降至 37℃ -72℃,使引物与模板的互补区相结合;zui后,在 72℃ 条件下, DNA 聚合酶将 dNTP 连续加到引物的 3'-OH 端,合成 DNA ,这个步骤称为延......阅读全文

pcr仪的临床应用

  风疹病毒感染  风疹病毒(RV)是一种单股正极性RNA病毒,人是风诊病毒的唯一宿主。RV感染可以引起胎儿的畸形,影响胎儿免疫系统的发育,因此RV检测在优生优育工作中显得非常重要。RV检测可以用直接培养法及IgM抗体测试法。培养法费时很长而且常受到其它病毒的干扰,IgM测定法结果了不太准确,PCR

PCR仪使用方法

(一)试剂PCR仪  (1)引物:决定扩增的特异性。根据检测的DNA不同,选用不同引物,每种病原微生  物都有自己特异的引物。  (2)耐热的DNA聚合酶:此酶是从耐热细菌中分离出来的,能耐受高温90℃-100℃。  (3)10×PCR缓冲液:500mmol/l KCl;100mmol/L Tris

PCR仪的工作原理

PCR 扩增的步骤首先将模板 DNA 置于 92℃ -96℃,进行变性(denaturation)处理,使 dsDNA 在高温下解链成为 ssDNA ,且热变性不改变其化学性质;然后退火(annealing) ,将温度降至 37℃ -72℃,使引物与模板的互补区相结合;zui后,在 72℃ 条件下,

PCR仪使用方法

  (一)试剂PCR仪  (1)引物:决定扩增的特异性。根据检测的DNA不同,选用不同引物,每种病原微生  物都有自己特异的引物。  (2)耐热的DNA聚合酶:此酶是从耐热细菌中分离出来的,能耐受高温90℃-100℃。  (3)10×PCR缓冲液:500mmol/l KCl;100mmol/L Tr

PCR仪的产品分类

PCR仪的产品分类一、梯度PCR仪把一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常12种温度梯度,这样的仪器就叫梯度PCR仪。二、普通的PCR仪把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫传统的PCR仪,也叫普通PCR仪三、原位PCR仪用于从细胞内靶DNA的定位分析的细

定量PCR仪选择宝典

定量PCR仪主要由两部分组成,一个是PCR系统,一个是荧光检测系统。选择定量PCR仪的关键——由于定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的,对于定量PCR系统来说,重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等,更重要的还在于样品孔之间的均一性,以避免微小的差别被指

定量PCR仪的应用

定量PCR仪的应用实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction简称Real Time PCR)是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied biosystems公司推

PCR仪定期运行维护

  1.PCR仪器需要定期检测,视制冷方式而定一般半年至少一次。  2.PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的,当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1~2℃时,可以运用温度修正法纠正PCR实际反应温度差。  3.PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制,要求越短越好,当PCR仪的

PCR仪反应主要步骤

 PCR仪的要素基本的PCR须具备1.要被复制的DNA模板 Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料(四种脱氧核苷酸)及水。    PCR仪工作原理    利用升温使DNA变性,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基

PCR仪有哪些分类

普通的PCR仪把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫传统的PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究,教学,医学临床,检验检疫等机构。梯度PCR仪把一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件

PCR扩增仪的选择

1971年Kleppe等人在Journal of molecular biology上发表文章首次准确、精炼、客观的阐述了PCR方法,1976年一种从嗜热水生菌(Thermus aquaticus)分离得到的热稳定的DNA依赖的DNA聚合酶的应用大大增加了PCR的效率。而现今所发展出来的PC

实时荧光定量PCR仪

  在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机

PCR仪操作与维护

简单的说,PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前,常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光

PCR扩增仪发展历史

  1971年,Dr. Kjell Kleppe首次在Journal of molecular biology期刊发表的文章中准确、客观地阐述了PCR方法。  1985年,美国PE-Cetus公司的Kary Mullis等人发明PCR技术。它推动了现代医学由细胞水平向分子水平、基因水平发展,是DNA

PCR扩增仪工作原理

  PCR技术的原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于靶序列两端互补的寡核苷酸引物,由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成 [2] 。  1. 模板DNA的变性  模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下

PCR仪有哪些分类

普通的PCR仪把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫传统的PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究,教学,医学临床,检验检疫等机构。梯度PCR仪把一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件

PCR仪特点详细介绍

PCR仪就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。PCR仪特点:1、半导体技术、、zui新一代半导体(Peltier)技术2、方便灵活的模块更换装置,轻松更换所需

梯度PCR仪的应用

 梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNA片段其zui适合的退火温度

梯度PCR仪的应用

梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNA片段其zui适合的退火温度不

PCR仪反应主要步骤

PCR仪的要素基本的PCR须具备1.要被复制的DNA模板 Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料(四种脱氧核苷酸)及水。    PCR仪工作原理    利用升温使DNA变性,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因

梯度PCR仪的简介

  梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置。梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围

梯度PCR仪的简介

梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置。梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按

PCR仪热盖作用

PCR仪热盖作用是防止蒸发的水汽在管盖上凝结。反应液中的水份还是会有部分变成蒸汽在管中,只是不会凝结在管盖上(如果没有热盖也不加石蜡油,反应管中的水份会全都凝结在管盖上的)。PCR仪的热盖大致可以分为以下四种:非可调式热盖、可调节式热盖、自适应式热盖和自动式热盖。1、非可调式热盖:即热盖并不能同时适

PCR基因扩增仪简介

  聚合酶链式反应简称PCR(英文全称:Polymerase Chain Reaction)聚合酶链式反应  聚合酶链式反应,简称PCR。聚合酶链式反应,其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应

PCR扩增仪的选择

1971年Kleppe等人在Journal of molecular biology上发表文章首次准确、精炼、客观的阐述了PCR方法,1976年一种从嗜热水生菌(Thermus aquaticus)分离得到的热稳定的DNA依赖的DNA聚合酶的应用大大增加了PCR的效率。而现今所发展出来的PCR则是源

PCR仪的分类原则

  简单的说,PCR仪就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时

PCR仪的技术特性

1、加热模式:立体膜加热技术2、制冷技术:新一代“peltier”效应“半导体热泵制冷”3、控温及管理:16位微机智能式4、DTC型基因扩增仪主要由外壳、变温反应腔、散热系统、加热系统、制冷系统、电子控制系统、供电系统、人机界面等各部分组成。5、单机操作,也可与电脑联机使用,通过数据线可直观显示温度

实时定量PCR仪概述

  实时定量PCR仪是一种用于生物学、基础医学、临床医学领域的分析仪器,于2016年2月23日启用。  ViiA7TM系统实现了很好的可重复性,孔间差异、批间差异、不同仪器间差异降至最低。仪器可与标准96孔板,快速96孔板,384孔及TaqMan微流体芯片和各种试剂完全兼容,在任何规模的实验室均可实

定量PCR仪选择宝典

定量PCR仪主要由两部分组成,一个是PCR系统,一个是荧光检测系统。选择定量PCR仪的关键——由于定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的,对于定量PCR系统来说,重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等,更重要的还在于样品孔之间的均一性,以避免微小的差别被指数级放大。至于荧

手掌上的PCR仪

  Ahram Biosystems公司去年4月份新推出的Palm PCR 掌上PCR系统,可谓风头正劲,被生物通读者评为2011年度生命科学十大创新产品。犹如手掌大小的Palm PCR仪到底有何魅力,会如此受到用户的青睐?  首先,Palm PCR仪是一款以