气体的干燥与纯化
1、气体干燥与纯化的目的减小噪音干扰:一些杂质会增加特定检测器的本底噪音、甚至出鬼峰,从而降低检测器的灵敏度或严重干扰定性定量工作。保护色谱柱:气体中的某些杂质可能会减少色谱柱的寿命。例如,水分会明显影响某些气-固色谱柱的寿命。2、载气干燥与纯化的原则:除水、除氧、除烃3、气体干燥与纯化的办法:除水:一般情况下,可以在载气管路中加上净化器,净化器内装硅胶和 5A 分子筛。硅胶或分子筛予先应充分活化,活化方法如下:A)分子筛在 420℃的马福炉中连续加热 24 小时,不等凉至室温,迅速将它装入净化器中,两头塞上脱脂棉。B)硅胶在 120℃的烘箱中活化, 直至恢复吸水前的颜色(天蓝色) 。除氧:净化氮气和氩气中微量的氧,可通过 300~400℃装有活性铜胶催化剂的柱管,一般可将氧含量降至 10ppm 以下;氢气中的微量氧可在常温下通过装有 105 型钯催化剂的柱管,使氢气中的氧降至 10ppm 以下。除烃:不论载气,还是辅助气体(H......阅读全文
分离纯化总RNA
1) 用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取纯化组织和细胞中的RNA1. 选取从组织细胞或细胞中提取RNA的适宜方法组织a. 分离组织并立即置于液氮中。b. 将约100 mg冰冻组织含液氮的研钵中,用研棒研磨。研磨过程中可加入液氮使组织保持冰冻状态。c.
包涵体的纯化
关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器
简述PCR-产物纯化
PCR 反应完成目标 DNA 的扩增后,PCR 产物可以用于进一步的研究,例如用于 DNA 测序、克隆、分析基因的功能和表达等。然而,通过 PCR 反应后体系中仍然存在具有活性的 DNA 聚合酶,剩余的 dNTP、引物以及反应缓冲体系中的各种金属离子等。因此,我们必须通过一定的方法从反应体系中提纯
包涵体的纯化
关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器
mRNA提取、分离纯化
从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之
DNA纯化手册1
Purification of plasmid DNA (miniprep) with high yields using diatomaceous earthKyung-Soo Kim and Charles K. PallaghySchool of Botany, La Trobe Univer
DNA纯化手册2
Key points to observe: a. Use a endA1- E. coli strain for plasmid propagation and isolation whenever possible. The instability of plasmids isolated fr
痘苗病毒纯化实验
大规模纯化 实验方法原理 对于很多研究,部分纯化的病毒就足够了(进行到本实验步骤 14), 如果是纯化 MVA 病毒,则不能用胰酶消化,也不能用 CEF 细胞
蛋白质纯化
是当代生物产业当中的核心技术。该技术难度、成本均高;例如一个生物药品的成本75%都花在下游蛋白质分离纯化当中。常用技术有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分
IgG抗体纯化实验
虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选,然而有时这种纯化方式却非必需,或者无法实施进行。在大多数锖况下,运铁蛋白可发生共沉淀或共纯化,能用凝胶滤过层析去除之。实验材料抗体试剂、试剂盒SAS仪器、耗材透析膜离心机实验步骤1. 于4℃不断搅拌下,往2体积的含有IgG的混合物中,逐滴加入1体枳pH7.
纯化水的标准
纯化水 Chunhuashui Purified Water [修订] 本品为饮用水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得的制药用水,不含任何添加剂。 【检查】 总有机碳 不得过0.50mg/L(附录Ⅷ R)。 易氧化物 取本品100ml,加稀硫酸10ml,煮
GST蛋白纯化步骤
制备细胞裂解物:1.每100ml培养物的细胞沉淀悬于4mlPBS;2.加入溶菌酶至终浓度1mg/ml,冰上放置30min;3.用针筒将10ml 0.2%Triton X-100强行注入细胞裂解物中,剧烈震动数次混匀;4.加入DNase和RNase至终浓度5μg/ml,4℃震动温育10min;5.4℃
单克隆抗体的纯化——蛋白A琼脂糖纯化
单克隆抗体的纯化可用于:(1)制备体外诊断试剂;(2)制备治疗用药实验方法原理目前常用的纯化方法有:盐析、凝胶过滤、离子交换层析和辛酸提取等方法达到纯化目的,也有采用较简便的酸沉淀法。最有效的纯化法为亲合纯化法,常用葡萄球菌A蛋白或抗小鼠免疫球蛋白抗体与载体交联,制备亲合层析柱将抗体结合后洗脱,回收
全自动蛋白纯化系统可以检测、分离、纯化多种生物样品
全自动蛋白纯化系统可完成从实验室基础研究到整个工艺方法快速开发及放大。可以进行生物大分子的范例纯化,已知和未知蛋白质的纯化,蛋白质的结构动力学药物作用靶点研究,药物蛋白的分离,蛋白质工程药物的合成,蛋白质的定性,组织细胞中各种蛋白质在生物体中如何发展功能,基因表达产物的分离。全自动蛋白纯化系统可以检
可溶性表达的蛋白如何纯化?纯化后如何除咪唑?
1,破细胞,高速离心收上清收集上清(同时平衡好柱子);2,既然你是His-tag,用Ni-NTA之类的柱子,两次上柱,buffer平衡;3,低浓度咪唑(5mM)洗5-10柱体积,以洗去杂蛋白;4,过梯度咪唑(10-500MM),用紫外检测仪监测280nm,收下每个峰;5,用峰液跑SDS-PAGE,看
拜泰齐推出全新Flash快速纯化系统及配套纯化柱
分析测试百科网讯 近日,Biotage(拜泰齐)宣布推出新型Selek Flash快速纯化系统和新型Sfär系列Flash纯化柱。这两种新产品将共同为有机化学和多肽化学家提供了改善其分离的机会。 拜泰齐Selek Flash快速纯化系统设计非常紧凑,具有较小的占地面积,新发布的Sfär色谱柱可
免疫球蛋白纯化技术——盐析法纯化免疫球蛋白
在大多数情况下,免疫血清、杂交瘤细胞培养上清以及腹水中的抗体需经纯化后再用于各种免疫学检测中去。免疫球蛋白常用的纯化方法有盐析法、凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析以及高效液相色谱等方法。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990)实验方法原理蛋白质在水
可溶性表达的蛋白如何纯化?纯化后如何除咪唑?
1,破细胞,高速离心收上清收集上清(同时平衡好柱子);2,既然你是His-tag,用Ni-NTA之类的柱子,两次上柱,buffer平衡;3,低浓度咪唑(5mM)洗5-10柱体积,以洗去杂蛋白;4,过梯度咪唑(10-500MM),用紫外检测仪监测280nm,收下每个峰;5,用峰液跑SDS-PAGE,看
核酸分离与纯化的原则、步骤、磁珠法纯化DNA原理
磁珠提核酸磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤、磁珠法纯化DNA原理。核酸分离与纯化的原则核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分
GST融合蛋白纯化方法
Abstract: Many people have vented out frustration over insoluble GST-fused proteins. This is a protocol for enzymatically active soluble GST-fused pro
oligos纯化方法的比较
为了纯化合成的寡核苷酸,将采取方法有脱盐、BioRP、PAGE、HPLC等进行oligos纯化的工作。各种方法的侧重点不同,需根据具体实验的要求来选择最适合的纯化方法:脱盐 寡核苷酸合成后,为了纯化寡核苷酸成为天然的DNA结构,首先必须去除保护基团。通过浓氨水处理,合成的寡核苷酸从固相载体上分离
纯化测序反应产物实验
试剂、试剂盒 甲酰胺核酸寡核苷酸仪器、耗材 ABI PRISM 3100Genetic Analyzer微量离心管DTR Gel Filtration Cartridges (Edge Biosystems)或相应的真空浓缩仪实验步骤 一、材料1.缓冲液和溶液样品上样液所用的样品上样液取决于所用的设
mRNA的分离与纯化
真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或寡聚(U)
纯化测序反应产物实验
试剂、试剂盒 甲酰胺 核酸 寡核苷酸 仪器、耗材 ABI PRISM 3100Genetic An
纯水水质纯化方法(一)
紫外线照射法紫外线照射法已广泛的使用在水处理上,低压水银灯所放射出来的254nm的紫外线是一种有效的杀菌方法,因为细菌中的DNA及蛋白质会吸收紫外线而导致死亡。近来在UV灯制造技术方面的进步,已可制造同时产生185nm和254nm波长的紫外灯管,这种光波长组合可利用光氧化有机化合物,接着这种特殊灯泡
纯水技术——水质纯化方法
离子交换法 离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水,水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透(RO)处理之前,先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂,以两个钠离子交换一个钙离子或镁离子的方式来软化水
核酸纯化仪产品特点
大屏幕全中文操作大屏幕全中文显示;触屏式操作,简单易用。精确控制内建工程用电脑,无需再连接个人电脑;单机操作节省更多的空间与能源,并提供高稳定度的自动化控制系统。温度控制可根据需求自定义裂解、洗脱温度。自由编程强大的程序编辑功能;灵活、高效地定义您的应用,可满足不同试剂要求。快速提取操作时间短,30
包涵体的纯化4
9、什么叫复性成功 复性效果的检测: 根据具体的蛋白性质和需要,可以从生化、免疫、物理性质等方面对蛋白质的复性效率进行检测。 1,凝胶电泳:一般可以用非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳可以检测变性和天然状态的蛋白质,或用非还原的聚丙烯酰胺电泳检测有二硫键的蛋白复性后二硫键的配对情况。 2,光谱学方法:可以用
核酸纯化仪常见品牌
是目前国际市场上的主流品牌有:ABI Prism® 6100 Nucleic Acid PrepStation、epMotion 5075 TMX、QuickGene610等。 国内品牌较少主要有:天隆 NP968系列、Smart LabAssist-32等。
纯水水质纯化方法(六)
离子交换法 离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水,水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化 主要是用在反渗透(RO)处理之前,先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂,以两个钠离子交换一个钙离子或镁离子