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琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸的研究，为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖，是由1，3连接的β－D吡喃半乳糖和1，4连接的3，6脱水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使其相互盘绕成绳状琼脂糖束，而形成大网孔型凝胶。琼脂是从海藻中提取出来的多糖体，主要由琼脂糖（约占80%）和琼脂胶组成。琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖，从琼脂胶中脱去硫酸酯基和丙酮酸酯基可获得琼脂糖。琼脂胶和琼脂糖的结构相似，但由于琼脂胶含硫酸根和羧基，凝胶能力差；琼脂糖中存在极微量的硫酸根和丙酮酸酯基取代电离基团，在电场作用下能产生较强的电渗；硫酸根可与某些蛋白质作用，从而影响电泳速度和分离效果。因此，在琼脂糖凝胶制备过程中需要把琼脂胶尽量除去。质量较好的琼脂糖凝胶的硫酸根含量较低，通常小于0.2%，电渗较小。......阅读全文
第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定 第二章DNA 酶切及凝胶电泳 第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第六章基因组DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技术 第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第九章分
酶切基础知识DNA酶切一般分为质粒直接酶切和PCR产物酶切第一节 DNA酶切及凝胶电泳 一.DNA的限制性内切酶酶切分析 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在
一. DNA的限制性内切酶酶切分析限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶
电泳法，是指带电荷的供试品（蛋白质、核苷酸等）在惰性支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等）中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。 电泳技术的
学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大小。实验原理：闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同，在加溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳上呈现不同的迁移率，因而在紫外灯下观察，能区别闭合环状质粒DNA（cccDNA）、线性质粒DNA（L-DNA）和开环质粒DNA（ocDNA）。实
（一）醋酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄 膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象，又因为膜的亲水性比较小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分由样 品传导，所以分离速度快，电泳时间短，样品
收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体，将琼脂糖凝胶置于其中，电泳 25 min，加入酶反应试剂，孵育 5~20 min 后，冲洗凝胶，
实验目的 学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大小。 实验原理 闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同，在加溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳上呈现不同的迁移率，因而在紫外灯下观察，能区别闭合环状
实验方法原理 收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2 μl的细胞抽提物、标准
实验方法原理收集细胞，用 D-PBSA 洗涤，重新制成 5×107个/ml 的细胞悬液，制备细胞抽提物并置于 -70°C 保存。准备凝胶装置，取 1~2 μl的细胞抽提物、标准品及对照点样于琼脂糖凝胶。槽内充满液体，将琼脂糖凝胶置于其中，电泳 25 min，加入酶反应试剂，孵育 5~20 m
一、琼脂糖凝胶的特点 天然琼脂（agar）是一种多聚糖，主要由琼脂糖（agarose，约占80％）及琼脂胶（agaropectin）组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质，不带电荷，而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖，由于这些基团带有电荷，
学习琼脂糖凝胶电泳的基本原理； （2） 掌握使用水平式电泳仪的方法； （3）掌握核酸琼脂糖凝胶电泳的基本操作 2实验原理 琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸的研究，为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖，是由1，3连接的β－D吡喃半乳糖和1，4连接的3，6脱水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸研究。琼脂糖凝胶属于大孔胶，可分析分子量为107的大分子，这种大孔特性有利于免疫电泳和微量制备。琼脂糖形成凝胶后孔径的大小取决于琼脂糖凝胶浓度，琼脂糖凝胶浓度与平均孔径的关系如下：一、琼脂糖凝胶浓度为0.075%时，平均孔径为800nm。二、
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸的研究，为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖，是由1，3连接的β－D吡喃半乳糖和1，4连接的3，6脱水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳 实验方法原理 琼脂糖主要通过氢键而形成凝胶。电泳时因凝胶含水量大（98－9
凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种.一、琼脂糖凝胶电泳: 琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和 鉴定核酸的方法.琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物.根据琼脂糖的溶解温度， 把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖.低熔点琼脂糖熔点为62～65℃，溶解后在 37℃下维持液体
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳可应用于：（1）测定血清中蛋白质含量；（2）诊断疾病。实验方法原理琼脂糖主要通过氢键而形成凝胶。电泳时因凝胶含水量大（98－99%），近似自由电泳，因为固体支持物的影响少，故电泳速度快，区带整齐。而且由于琼脂糖不含带电荷的基团，电渗影响很少，是一种较好的电泳材料，分离效果较好。
DNA琼脂糖凝胶电泳 实验方法原理 利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。
实验概要学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、构型、含量和分子量大小。实验原理闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同，在加溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳上呈现不同的迁移率，因而在紫外灯下观察，能区别闭合环状质粒 DNA（cccDNA）、线性质粒DNA（L-DNA）和开环质粒DNA（ocDN
琼脂糖凝胶电泳可应用于：（1）DNA切胶回收；（2）DNA分离；（3）佐证DNA是否重组，质粒等是否切开以及其他分子生物学研究。实验方法原理用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻
DNA电泳可用于：（1）分离不同大小的DNA片段；（2）鉴定目的DNA片段；（3）纯化和回收DNA片段。实验方法原理利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电，在电场中向正极移动，且相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，能以
实验方法原理 用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大
实验方法原理 用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就大
PCR扩增反应完成之后，必须通过严格的鉴定，才能确定是否真正得到了准确可靠的预期特定扩增产物。凝胶电泳是检测PCR产物常用和最简便的方法，能判断产物的大小，有助于产物的鉴定。凝胶电泳常用的有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳，前者主要用于DNA片段大于100bp者，后者主要用来检测小片段DNA。1．
【概述】带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，称为电泳(electrophoresis, EP)。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。 1807年，由俄国莫斯科大学的斐迪南·弗雷德里克·罗伊斯（Ferdinand Frederic Reuss）最早发现。
PCR扩增反应完成之后，必须通过严格的鉴定，才能确定是否真正得到了准确可靠的预期特定扩增产物。凝胶电泳是检测PCR产物常用和zui简便的方法，能判断产物的大小，有助于产物的鉴定。凝胶电泳常用的有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳，前者主要用于DNA pian段大于100bp者，后者主要用
实验方法原理 RNA 免疫沉淀-随机聚合链反应方法可用来鉴定细胞内 RNP 复合物中的 RNA 组分。 实验材料
RNA 免疫沉淀-随机聚合链反应方法可用来鉴定细胞内 RNP 复合物中的 RNA 组分。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理RNA 免疫沉淀-随机聚合链反应方法可用来鉴定细胞内 RNP 复合物中的 RNA 组分。实验材料载体酵母 tRNARQ1 DNA 酶糖原小牛肠碱性磷酸酶
一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术，学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度，并能对实验结果进行分析。二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的