程红/田斌组揭示mRNA出核因子调控可变加尾的重要功能

真核细胞中绝大多数前体mRNA(pre-mRNA)的3'端经过切割和多聚腺苷酸化两个步骤的加工后,可以产生具有多聚腺苷酸尾的成熟mRNA【1】。通常哺乳动物的基因含有不止一个多聚腺苷酸位点(PAS),细胞选择使用不同的PAS可产生具有不同长度3'非翻译区、甚至不同编码序列的异构体(isoform)(这一过程被称为可变加尾)。这些异构体在定位、翻译及降解上具有明显的差异【2,3】。可变加尾是近年备受关注的一种重要的转录后调控方式,在分化发育、肿瘤发生等多种生理病理过程中发挥重要调控功能。 可变加尾受到多种因素的调控。3'端加工复合物CFI(Cleavage Factor I)是可变加尾的重要调控因子,CFI的两个组成蛋白CFI-25和CFI-68能广泛调控可变加尾【4-7】。另有研究表明,转录过程中启动子的活性和转录延伸速率也能够调控可变加尾【8-10】。最近的研究表明具有长3'非翻译区的mR......阅读全文

我国学者在人巨细胞病毒核衣壳出核研究方面取得新进展

   近日,中国科学院武汉病毒研究所罗敏华课题组在HCMV核衣壳出核研究方面取得新进展,发现宿主细胞蛋白WDR5通过辅助形成出核复合体在HCMV核衣壳出核过程中具有重要作用。本工作在线发表于Journal of Virology。敲低WDR5将会影响IINM形成,从而抑制HCMV出核   人巨细胞病

抗核抗体(ANA)或抗核因子(ANF)的临床意义及注意事项

  临床意义  ANA见于多种自身免疫病(尤其是自身免疫性风湿病)患者,例如全身性红斑狼疮(SLE)、药物诱导的狼疮、混合性结缔组织病的检出率都可达100%;干燥综合征(Sjgren综合征)、进行性全身性硬化症检出率可达70%~85%;其他如类风湿性关节炎、多发性肌炎及皮肌炎、慢性活动性肝炎、溃疡性

抗核抗体(ANA)或抗核因子(ANF)的注意事项及检查过程

  注意事项  (1)用IIF法检测ANA,正确诊断的前提是对每份待测血清同时用Hep-2细胞和肝细胞做抗原片进行平行测定,选用何种细胞为抗原片,抗原片的固定方法,荧光抗体的特异性、效价、亲和力,荧光显微镜的质量等都对测定的结果有不容忽视的影响,因此,每个实验室都应进行严密的室内检验质量控制,每次试

抗核抗体(ANA)或抗核因子(ANF)的注意事项及检查过程

  注意事项  一、抽血前的注意事项:  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。  3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。  二、抽血后应注意: 

抗核抗体(ANA)或抗核因子(ANF)的正常值及临床意义

  正常值  免疫荧光定性法阴性。  免疫荧光滴度法

动态监控果蝇翻译过程,揭示空间异质性

  mRNA翻译成蛋白质的过程涉及到的因子已经有大量的研究,但是在活的多细胞生物体中多步骤的翻译过程是如何进行的还未可知。为了回答该问题,法国蒙彼利埃大学Mounia Lagha研究组与Jeremy Dufourt(第一作者)合作在Science发文,题为Imaging translation dy

人核转录因子(NFkB-)ELISA试剂盒

人核转录因子(NF-kB )ELISA试剂盒原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 NF-kB 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NF-kB 与单抗结合,加入生物素化的抗人NF-kB ,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工

小鼠核转录因子(NFkB-)ELISA试剂盒

小鼠核转录因子(NF-kB )ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 NF-kB 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NF-kB 与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠NF-kB ,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加

小鼠核因子қB(NFқB)酶联免疫分析

小鼠核因子қB(NF-қB)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中核因子қB(NF-қB)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠核因子қB(NF-қB)水平。用纯化的小鼠核因子қB(NF-қB)抗体包被

抗核周因子抗体检测的临床意义

  抗核周因子与类风湿关节炎有明显的相关性,不仅阳性率高,特异性也好。抗核周因子可出现在类风湿关节炎早期,甚至在发病之前。在早期RF阴性的类风湿关节炎病人中可有53.3% 的病人抗核周因子呈阳性。抗核周因子阳性、RF阴性的类风湿关节炎病人往往预后较差,这不仅有助于早期诊断,也有助于判断预后。同时抗核

核受体信号通路相关因子CYP2B6

这个基因,cyp2b6,编码细胞色素p450酶超家族的一个成员。细胞色素p450蛋白是一种单加氧酶,催化药物代谢和胆固醇、类固醇等脂类的合成。该蛋白定位于内质网,由苯巴比妥诱导表达。已知这种酶能代谢一些外源性物质,如抗癌药物环磷酰胺和ifosphamide。该基因的转录变体已经被描述过;然而,这些转

核受体信号通路相关因子H3F3A

组蛋白是负责真核生物染色体纤维核小体结构的基本核蛋白。四个核心组蛋白(h2a、h2b、h3和h4)中的两个分子形成一个八聚体,大约146bp的DNA被包裹在一个称为核小体的重复单元中。连接组蛋白h1与核小体之间的连接DNA相互作用,并在染色质压缩成高阶结构的过程中发挥作用。这个基因包含内含子,它的m

人核转录因子elisa试剂盒使用说明

检测范围                                                     80 ng/L -2000 ng/L 使用目的本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中核转录因子(NF-kB )含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人核转录因子(NF-k

成骨细胞与核结合因子的相互影响

  核结合因子-α1(CBF-α1)由成骨细胞特异性表达,是决定成骨细胞分化的因子,其调控的成骨细胞分化途径是不可替代的(Tou等,2001)。CBF-α1是骨形成的关键基因,决定着成骨细胞的发生与分化,它在维持正常的骨骼生长发育中起着重要作用(David等,2000)。  研究结果已证明CBF-α

真核细胞蛋白质合成的相关介绍

  真核细胞蛋白质合成的起始真核细胞蛋白质合成起始复合物的形成中需要更多的起始因子参与,因此起始过程也更复杂。  ⑴需要特异的起始tRNA即,-tRNAfmet,并且不需要N端甲酰化。已发现的真核起始因子有近10种(eukaryote Initiation factor,eIF)  ⑵起始复合物形成

mRNA的分离

与rRNA和tRNA不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用 oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制备mRNA

如何提取mrna

1 细胞总RNA的提取1)、6孔板细胞(CNE-2)汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂(Gibco公司) 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5分钟(观察:液体变粘稠,细胞脱壁).2)、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml E

mRNA的纯化

实验概要本文介绍了mRNA的纯化方法。实验原理mRNA的分离方法较多,其中以寡聚(dT)-纤维素柱层析法最为有效,已成为常规方法。此法利用mRNA  3‘末端含有Poly(A  )的特点,在RNA流经寡聚(dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液的作用下,mRNA被特异地结合在柱上,当逐渐降低盐的浓度时或在低

mRNA的分离

与rRNA和tRNA不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制备mRNA模板。进行

mRNA的分离

与rRNA和tRNA不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制备mRNA模板。进行

RNA的转录与逆转录相关介绍

转录是以DNA为模板合成RNA的过程,经过转录DNA分子中的贮存信息传递到RNA分子中,再由mRNA做为模板合成蛋白质分子。逆转录也是从RNA的一个特定位置开始的,以RNA分子中的一条链为模板,在逆转录酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大

RNA复制、转录与逆转录

转录是以DNA为模板合成RNA的过程,经过转录DNA分子中的贮存信息传递到RNA分子中,再由mRNA做为模板合成蛋白质分子。逆转录也是从RNA的一个特定位置开始的,以RNA分子中的一条链为模板,在逆转录酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大

RNA的转录和逆转录

转录是以DNA为模板合成RNA的过程,经过转录DNA分子中的贮存信息传递到RNA分子中,再由mRNA做为模板合成蛋白质分子。逆转录也是从RNA的一个特定位置开始的,以RNA分子中的一条链为模板,在逆转录酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成。大

RNA复制的转录与逆转录的过程介绍

  转录是以DNA为模板合成RNA的过程,经过转录DNA分子中的贮存信息传递到RNA分子中,再由mRNA做为模板合成蛋白质分子。逆转录也是从RNA的一个特定位置开始的,以RNA分子中的一条链为模板,在逆转录酶的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,合成方向仍是5'→3',完成cDNA的合成

以乳糖操纵子为例原核生物基因表达调控的原理

原核生物的基因表达调控原核生物的基因表达调控虽然比真核生物简单,然而也存在着复杂的调控系统,如在转录调控种就存在着许多问题:如何在复杂的基因组内确定正确的转录起始点?如何将DNA的核苷酸按着遗传密码的程序转录到新生的RNA链中?如何保证合成一条完整的RNA链?如何确定转录的终止?上述问题决定于DNA

我国学者发现果蝇性别决定新因子

  中科院分子植物科学卓越创新中心/植物生理生态研究所严冬研究组和美国哈佛大学Norbert Perrimon研究组合作研究,发现并鉴定了RNA m6A甲基转移酶复合物的新成员Xio,并且该基因也是果蝇性别决定信号途径新的组分。相关研究成果近日在线发表于美国《国家科学院院刊》。  N6-methyl

遗传发育所鉴定出小麦穗发育的转录调控因子

  小麦是重要的粮食作物之一。小麦的产量主要由亩穗数、千粒重和穗粒数决定。穗型结构影响小麦的小穗数、穗粒数和产量,是育种改良地重要的选择性状。挖掘小麦穗发育重要调控因子与解析分子调控机制,对小麦穗型的分子设计与精准改良、突破产量瓶颈具有重要意义。由于小麦功能基因组学发展较晚,穗发育关键基因挖掘及作用

简述原核生物的转座因子的遗传学效应

  虽然各种转座因子上所带的基因可以很不相同,但它们都有一些共同的遗传学效应:  (1)引起插入突变,使插入位置上出现新的基因。除了上面已经提到的由Is1和Mu引起的插入突变以外,Tn同样能引起插入突变,那么,不管插入的转座因子上带有何种基因,它一方面造成一个基因的插入突变,另一方面使这一位置上出现

人抗核周因子抗体(APF)试剂盒技术原理

保存条件及有效期:    1.试剂盒保存:2-8℃。    2.有效期:6个月检测范围:          48T    25 ng/L -800 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本抗核周因子抗体类(APF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗核周因子抗体类

翻译水平上的调控

蛋白质合成翻译阶段的基因调控有三个方面:① 蛋白质合成起始速率的调控;② MRNA的识别;③ 激素等外界因素的影响。蛋白质合成起始反应中要涉及到核糖体、mRNA蛋白质合成起始因子可溶性蛋白及tRNA,这些结构和谐统一才能完成蛋白质的生物合成。mRNA则起着重要的调控功能。真核生物mRNA的“扫描模式