动态监控果蝇翻译过程，揭示空间异质性
mRNA翻译成蛋白质的过程涉及到的因子已经有大量的研究，但是在活的多细胞生物体中多步骤的翻译过程是如何进行的还未可知。为了回答该问题，法国蒙彼利埃大学Mounia Lagha研究组与Jeremy Dufourt（第一作者）合作在Science发文，题为Imaging translation dynamics in live embryos reveals spatial heterogeneities，通过对果蝇卵中翻译过程的动态监控揭示出翻译的空间异质性。 60多年前，大家开始了解mRNA翻译成蛋白质的过程。然而，研究表明，一个给定的mRNA的水平和它编码的蛋白质的数量并不直接相关。这种共线性的缺失可能是由于mRNA靶向亚细胞隔室中的翻译差异造成的。为了对mRNA与初生蛋白质之间相关性进行定量和比较，对于此过程的可视化实验方法的需求呼之欲出。mRNA的活体成像最早差不多可以追溯到1998年，但那时只能够在培养的细胞中......阅读全文
mRNA的转运和翻译
mRNA的转运真核生物和原核生物之间的另一个区别是mRNA的转运。由于真核转录和翻译是在不同的细胞器内进行的，真核mRNA必须从细胞核输出到细胞质。 这一过程可能受不同信号通路的调节。成熟的mRNA通过其加工的修饰被识别，在结合帽结合蛋白CBP20和CBP80及转录/输出复合物（TREX）后通过核孔
mRNA的转运和翻译介绍
mRNA的转运 真核生物和原核生物之间的另一个区别是mRNA的转运。由于真核转录和翻译是在不同的细胞器内进行的，真核mRNA必须从细胞核输出到细胞质。 这一过程可能受不同信号通路的调节。成熟的mRNA通过其加工的修饰被识别，在结合帽结合蛋白CBP20和CBP80及转录/输出复合物（TREX）后
外无细胞体系翻译病毒－mRNA
实验材料 ATP GTP 质粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 胶肌酸磷酸激酶 核酸酶 tRNAHeLaS3 细胞 TgSVA 细胞 Lx 细胞来源于表达人脊髓灰质炎病毒受体的 Ltk 细胞 NS20Y 细胞 人肝癌来源的 HepG2 细胞试剂、试剂盒 HEPES-KOH Tris-HCl 等渗
外无细胞体系翻译病毒－mRNA
实验材料 ATP GTP 质粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 胶 肌酸磷酸激酶 核酸酶
动态监控果蝇翻译过程，揭示空间异质性
mRNA翻译成蛋白质的过程涉及到的因子已经有大量的研究，但是在活的多细胞生物体中多步骤的翻译过程是如何进行的还未可知。为了回答该问题，法国蒙彼利埃大学Mounia Lagha研究组与Jeremy Dufourt（第一作者）合作在Science发文，题为Imaging translation dy
4.6－外无细胞体系翻译病毒－mRNA
用哺乳动物细胞 S10 抽提物翻译脊髓灰质炎病毒和丙型肝炎病毒 mRNA 的技术。实验材料ATPGTP质粒 DNA肌酸磷酸激酶10%SDS 胶肌酸磷酸激酶核酸酶tRNAHeLaS3 细胞TgSVA 细胞Lx 细胞来源于表达人脊髓灰质炎病毒受体的 Ltk 细胞NS20Y 细胞人肝癌来源的 HepG2
清华学者揭示新的mRNA翻译终止机制
2016年12月1日，清华大学生命科学学院、结构生物学高精尖创新中心高宁课题组和合作者在《Nature》在线发表题为Mechanistic insights into the alternative translation termination by ArfA and RF2的研究论文。该论
试管内成功再现抑制mRNA翻译的过程
生命是根据基因的设计图被制作出来的蛋白质起作用而延续的。蛋白质的合成首先是DNA信息被一部分mRNA转录，接着mRNA与蛋白质的合成工场“核糖体”会合，核糖体按照mRNA的信息去与氨基酸连接(叫做“翻译”)。这就是生物的基本结构。 近年，人们知道了仅仅20几个碱基连接的“mic
mRNA－在麦胚提取物中的翻译
实验材料 精胺或4.0〜8.Ommol L亚精胺 肌氨酸激酶 新鲜麦胚 沙粒 试剂、试剂盒
mRNA－在麦胚提取物中的翻译
实验材料 精胺或4.0〜8.Ommol L亚精胺肌氨酸激酶新鲜麦胚 沙粒试剂、试剂盒 提取缓冲液 平衡缓冲液 DEFC 10X能量缓冲液 乙酸钾 DTT LHEPES mRNA [3 H] 或 [35S] 标记的 L-氨基酸 三氯乙酸（TCA)。仪器、耗材 SephatkxG-25(粗级）高温烘箱
mRNA－在网织红细胞裂解液中的翻译
实验材料 家兔胰核糖核酸酶 小球菌核酸酶 I 型磷酸肌酸激酶试剂、试剂盒 乙酰苯肼溶液 A 溶液 B 灭菌重蒸水 CaCl2 EGTA 氯高铁血红素储存液 亚精胺 磷酸肌酸 氨基酸 DTT HEPES 水 KCl 乙酸镁 [35S] 甲硫氨酸.仪器、耗材 电泳装置干酪包布离心机实验步骤 一、材料与设
mRNA－在网织红细胞裂解液中的翻译
实验材料 家兔 胰核糖核酸酶 小球菌核酸酶 I 型磷酸肌酸激酶 试剂、试剂盒
4.1－mRNA－在网织红细胞裂解液中的翻译
从哺乳动物细胞中提取的 mRNA 或通过克隆化 DNA 在体外转录产生的 mRNA 在无细胞提取液中能被翻译而合成蛋白质,这些蛋白质可用于免疫沉淀试验或进行生物学活性测定。实验材料家兔胰核糖核酸酶小球菌核酸酶I 型磷酸肌酸激酶试剂、试剂盒乙酰苯肼溶液 A溶液 B灭菌重蒸水CaCl2EGTA氯高铁血红
4.2－mRNA－在麦胚提取物中的翻译
麦胚提取物体外翻译系统可用于病毒和真核细胞中 mRNA 在异种无细胞体系中的有效的翻译实验材料精胺或4.0〜8.Ommol L亚精胺肌氨酸激酶新鲜麦胚沙粒试剂、试剂盒提取缓冲液平衡缓冲液DEFC10X能量缓冲液乙酸钾DTTLHEPESmRNA[3 H] 或 [35S] 标记的 L-氨基酸三氯乙酸（T
Science：蛋白质翻译的真相
Yeshiva大学的科学家们开发了一个新荧光标记技术，首次确定了蛋白质合成的时间和地点。该技术允许研究者在活细胞中直接观察mRNA分子翻译成蛋白质的过程，有助于揭示蛋白质合成异常引发人类疾病的具体机制。这项研究发表在三月二十日的Science杂志上。 “过去我们一直没能确切查明mRNA翻译成蛋
eLife：“通读”终止密码子非常普遍
基因意味着开放性阅读框。在翻译特定基因的mRNA转录本时，从起始密码子AUG开始，以三个碱基为单位进行，直到核糖体遇到终止密码子，才完成蛋白质的延伸。以上这些都是生物教科书里的规则。 不过，人们常说“规则就是用来打破的”，核糖体也不例外。科学家们已经发现了一些“通读”(Read-throu
关于颗粒状细胞器—核糖体的mRNA的翻译功能介绍
核糖体的主要功能是将遗传密码转换成氨基酸序列并从氨基酸单体构建蛋白质聚合物。mRNA包含一系列密码子，被核糖体解码以产生蛋白质。核糖体以mRNA作为模板，核糖体通过移动穿过mRNA的每个密码子（3个核苷酸），将其与氨酰基-tRNA提供的适当氨基酸配对。氨基酰基-tRNA的一端含有与密码子互补的反
Nature子刊：华中农大发现转座子可抑制mRNA翻译
来自华中农业大学生命科学学院，作物遗传改良国家重点实验室的研究人员发现水稻中的一类DNA转座子具有翻译抑制功能，这揭示了微小反向重复转座元件的新功能，对研究其他重复序列的功能提供了借鉴意义，同时也拓宽了对于转座子的认识。 这一研究成果公布在3月3日的Nature Communications杂
Science：神经元突起中，单核糖体偏好性地翻译突触mRNA
RNA测序和原位杂交揭示了神经元树突和轴突中存在意想不到的大量RNA种类，而且许多研究已经记录了蛋白在这些区室中的局部翻译。在信使RNA（mRNA）的翻译过程中，多个核糖体可以同时占据单个mRNA（一种称为多核糖体的复合物），从而导致编码蛋白的多个拷贝产生。多核糖体通常在电子显微镜图片中被识别为
生物物理所果蝇生殖发育关键蛋白质与RNA研究获进展
mRNA的时空定位是mRNA转录后调控的重要步骤之一，在生殖细胞发育以及身体非对称性的形成中发挥着重要作用。一个典型的例子是oskarmRNA的定位与翻译的位置决定了果蝇生殖质组装的位置。 oskarmRNA在滋养细胞中转录，并通过微管等细胞骨架运输到卵母细胞的后极。新转录的mRNA通常不翻译
科研中的“新星”技术——MicroRNA荧光定量PCR
Micro RNA简介微小RNA(microRNA，简称miRNA)是生物体内源长度约为20－23个核苷酸的非编码单链小分子RNA，通过与靶mRNA的互补配对而在转录后水平上对基因的表达进行负调控，导致mRNA的降解或翻译抑制。是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶
miRNA的特征、功能及识别方法等详解（三）
2) miRNA的靶基因预测方法 miRNA的研究意义之重大是毋庸置疑的。然而，与新的miRNA的频频发现相比，miRNA的功能研究相对缓慢。到目前为止，在发现的4449多个miRNA中，确定功能的miRNA仅有几十个。导致miRNA功能研究进展缓慢的非常重要的原因是miRNA的作用靶标难以确定。事
RNA干扰相关知识Core－RISC
Core RISC：是介导目标mRNA切割过程或者翻译抑制的最小的RNA-蛋白质复合物。在人和果蝇身上发现的分子量少于200kDa的RISCs可能就是core RISC的重要代表。AGO蛋白质和Core RISC密切相关。
Core－RISC的概念
Core RISC：是介导目标mRNA切割过程或者翻译抑制的最小的RNA-蛋白质复合物。在人和果蝇身上发现的分子量少于200kDa的RISCs可能就是core RISC的重要代表。AGO蛋白质和Core RISC密切相关。
Core－RISC的概念
Core RISC：是介导目标mRNA切割过程或者翻译抑制的最小的RNA-蛋白质复合物。在人和果蝇身上发现的分子量少于200kDa的RISCs可能就是core RISC的重要代表。AGO蛋白质和Core RISC密切相关。
关于体外翻译翻译系统的选择介绍
虽然不是必须，但一般说，选用真核系统来翻译真核序列，选用原核系统来翻译原核序列。 如果一个系统存在功能上或抗原的交叉反应，就得选择另一个系统。使用微粒体膜进行翻译后修饰或加工一般只与兔网织红细胞系统兼容。仅在某些特定条件下麦胚芽翻译系统才与微粒体膜兼容。
果蝇实验技术
一、实验原理 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有2500个种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。果蝇优点： 1. 饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。 2.
小分子RNA
RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”，但越来越多的证据清楚的表明，RNA在生命的进程中扮演的角色远比我们早前设想的更为重要。RNA 干扰（RNA interference）的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识，更因为可以简化/替代基因敲除而成为研究基因功能的有力工具，
miRNA的特征、功能及识别方法等详解（一）
什么是miRNAMicroRNAs (miRNAs)是一种大小约21—23个碱基的单链小分子RNA，是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成，不同于siRNA（双链）但是和siRNA密切相关。据推测，这些非编码小分子RNA（miRNAs）参与调控基因表达
关于调节子的分类介绍
一些核糖核酸调节子通过与其他RNA简单的反义相互作用发挥功能。依据基因组来源，内源的反义RNA大致可以分为两类： ①反式反义RNA(trans-antisenseRNA)，该反义RNA转录自推测的靶特定位点； ②顺式反义RNA(cis-antisenseRNA)，该反义RNA由靶RNA同一基