去磷酸化的平端或5凹端DNA分子的磷酸化

在 T4 多核苷酸激酶的正向反应中,带有平端、5' 凹端或分子内切口的 DNA 底物比 5' 突出端的分子标记效率低。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理在 T4 多核苷酸激酶的正向反应中,带有平端、5' 凹端或分子内切口的 DNA 底物比 5' 突出端的分子标记效率低。实验材料T4 噬菌体多核苷酸激酶试剂、试剂盒乙酸铵EDTA乙醇咪唑缓冲液聚乙二醇仪器、耗材液体闪烁计数仪Sephadex G-50 离心柱Sephadex G-50 柱实验步骤一、方法1. 缓冲液和溶液乙酸铵(10 mol/L)EDTA ( 0.5 mol/L,pH 8.0)乙醇10X 咪唑缓冲液(500 mmol/L 咪唑盐酸(pH 6.4),180 mmol/L MgCl2,50 mmol/L DTT,1 mmol/L 亚精胺盐酸,1 mmol/L EDTA (pH 8.0))水配制聚乙二醇(24% m......阅读全文

DNA分子杂交原理

DNA分子杂交的原理是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区.如果两DNA有一段相同碱基的话,就能形成氢键,且形成稳定的双链区

DNA分子杂交的意义

分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人DN

简述DNA分子杂交的意义

  分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人

于军:DNA分子之神奇

  如果我告诉你,DNA也许并不是生命起源初始时必需的大分子(基本上包括核苷酸、蛋白质和多糖)“建筑材料”,你相信吗?如果我告诉你,DNA是被它的“兄弟”——大分子RNA(组成RNA和DNA的基本单元在分子结构上只差一个氧原子)“挟持”到生命的“最小独立复制单元”——细胞里来的,你相信吗?如果我告诉

简述DNA分子杂交的意义

  分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人

DNA分子克隆的几个概念

在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接,转入细胞获得大量拷贝的过程中DNA分子克隆(或基因克隆)。其基本步骤包括:制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接,制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。载体(vecors)在细胞内自我复制,并带动重组的分子片段共同增殖,从而

简述DNA分子杂交的意义

  分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人

DNA分子杂交技术的简介

  DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链放在一起杂交,其中一种

分子遗传学词汇核心DNA

中文名称:核心DNA英文名称:core DNA定  义:缠绕在核小体核心颗粒上的DNA。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

分子遗传学词汇线状DNA

中文名称:线状DNA英文名称:linear DNA定  义:DNA的一种构象。同时具有游离3`端和5`端的线性长链DNA分子。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

分子遗传学词汇反义DNA

中文名称:反义DNA定义:反义DNA又称反义链。在20世纪60年代的文献上常把作为转录模板的那条链称为有义链或称有义DNA,而另一条单链就称为反义DNA或称反义链,而较近期的文献则相反,把不作模板转录的链称为有义DNA或称编码链,作为模板转录的链称为反义链或反义DNA,或模板链。

单个DNA分子动力研究获进展

  无论是在病毒还是在细胞中,DNA皆以紧密压缩的结构存在。比如,在真核细胞中,DNA缠绕在组蛋白周围形成核小体,并进一步凝聚成大家熟知的染色体结构。在哺乳动物精子中,DNA凝聚成更致密的面包圈状(toroid)结构。了解DNA这些紧密排列的结构,并分析它们形成的动力学过程,对认识DNA复制甚至繁殖

分子遗传学词汇无用DNA

中文名称:无用DNA英文名称:junk DNA定  义:基因组中不表达的因而功能不明的DNA。但已有证据表明这些无用DNA是有其各种不同功能的。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

分子遗传学词汇叶绿体DNA

中文名称:叶绿体DNA外文名称:chloroplast DNA定义:叶绿体DNA,英文chloroplast DNA,缩写cpDNA,存在于叶绿体内,双链环状,长度中间值通常为45微米,具有独立基因组。一个叶绿体含有10~50个cpDNA。

分子遗传学词汇匿名DNA

中文名称:匿名DNA英文名称:anonymous DNA定  义:功能尚不明确的DNA序列。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

分子遗传学词汇松弛DNA

中文名称:松弛DNA英文名称:relaxed DNA定  义:呈非超螺旋状态的环状双链DNA分子。如质粒或病毒DNA基因组,通常是超螺旋结构,在酶或者物理化学因子的作用下双链核酸分子中一条单链出现断裂并导致超螺旋结构破坏,形成带切口的松弛DNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因

分子遗传学词汇A型DNA

中文名称:A型DNA外文名称:A-form DNA定义:A型DNA指的是由反向的两条多核苷酸链组成的右手双螺旋,碱基与中心轴之倾角呈19度的DNA。

能做工的DNA-分子马达面世

一项7月20日发表于《自然》的研究中,物理学家用DNA链构建了一个分子级马达,并可通过“拧紧”DNA“弹簧”来储存能量。该技术为旨在寻找合成化学和药物递送等领域应用的“DNA折纸术”提供了新技巧。研究团队成员之一、德国慕尼黑工业大学的生物物理学家Hendrik Dietz指出,这不是第一个以DNA为

分子遗传学词汇间隔DNA

中文名称:间隔DNA英文名称:spacer DNA定  义:基因组内基因间存在的一种功能未知的非编码DNA序列。存在于真核细胞及某些病毒基因组中,通常含有高度重复的DNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

DNA修复机制的分子机理

当DNA双链发生断裂时,细胞启动DNA破坏反应(DNA-damage response, DDR)。DDR的一个重要方面是被破坏的DNA位点的信号的反馈和修复因子的聚集。这项研究表明,在高等的真核生物中,DDR机制中向双链破坏位点不断的积聚作用依赖于组蛋白变体(histone varia

DNA分子杂交的方法和过程

DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链放在一起杂交,其中一种生物

分子遗传学词汇dna基因

中文名称:dna基因英文名称:dna gene定  义:与细菌DNA复制直接相关的基因。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

分子遗传学词汇自在DNA

中文名称:自在DNA英文名称:selfish DNA定  义:除能复制自身外,不具有其他功能的DNA片段。泛指间隔DNA及卫星DNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

分子遗传学词汇质体DNA

中文名称:质体DNA英文名称:plastid DNA定  义:真核生物细胞器质体中存在的DNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

分子遗传学词汇环状DNA

中文名称:环状DNA分    类:环状单链DNA和环状双链定义:超螺旋,DNA双螺旋本身进一步盘绕称超螺旋,超螺旋有正超螺旋和负超螺旋两种。当盘旋方向与DNA双螺旋方向相同时,其超螺旋结构为正超螺旋,反之则为负超螺旋,负超螺旋的存在对于转录和复制都是必要的。

DNA-同源重组的关键分子机制

  蛋白质与植物基因研究国家重点实验室研究团队揭示 DNA 同源重组的关键分子机制  作为三大DNA代谢途径(DNA 复制、重组、损伤修复)之一,DNA同源重组(Homologous Recombination)是生命体的基本生物事件。它在细胞生长、减数分裂、配子形成、物种进化、DNA双链断裂修复、

分子生态学词汇​DNA指纹

DNA指纹指具有完全个体特异的DNA多态性,其个体识别能力足以与手指指纹相媲美,因而得名。可用来进行个人识别及亲子鉴定,同人体核DNA的酶切片段杂交,获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为"DNA指纹"。

DNA分子的自发性损伤

DNA复制中的错误以DNA为模板按碱基配对进行DNA复制是一个严格而精确的事件,但也不是完全不发生错误的。碱基配对的错误频率约为10-1-10-2,在DNA复制酶的作用下碱基错误配对频率降到约10-5-10-6,复制过程中如有错误的核苷酸参入,DNA聚合酶还会暂停催化作用,以其3’-5’外切核酸酶的

微卫星DNA分子标记及其应用

  微卫星(Microsatellite,MS)又称短串联重复(Short Tandem Repeats,STR)或简单序列重复(Simple Sequnce Repeat,SSR),是指基因组中以少数几个核苷酸(多数为2-4个)为单位多次串联重复组成的长达几十个核苷酸的序列。其中最常见的是双核苷酸

分子克隆实验载体DNA的选择

①质粒:质粒是细菌染色体外遗传因子,DNA呈环状,大小为1-200千碱基对(kb)。在细胞中以游离超螺旋状存在,很容易制备。质粒DNA可通过转化引入寄主菌。在细胞中有两种状态,一是“紧密型”;二是“松弛型”。此外还应具有分子量小,易转化,有一至多个选择标记的特点。质粒型载体一般只能携带10kb以下的