帽子转换RACE实验

这里介绍的方法,是用一个生物素化的引物来帮助纯化第一链产物。这些纯化技术是可以互换的。与之类似,使用这里所介绍的基于寡核苷酸-(dT) 的引物,在反转录的起始阶段使用的基因特异性引物(如上所述)也是可以互换的。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒寡核苷酸引物cDNA 文库HerculesHot-Start 聚合酶HerculesHot-Start 聚合酶缓冲液dNTP 溶液TE反转录缓冲液RNasinSuperscript II 逆转录酶生物素标记的引物 Ptotal帽子发现接头引物poly(A)+RNA仪器、耗材热循环仪链霉抗生物素蛋白磁性珠磁性分离器水浴或加热仪实验步骤试剂5'RACE 能否成功依赖于帽子发现接头序列结合在 cDNA 合成的起始处。这一步依赖于在第一链 cDNA 末端附加额外的寡核苷酸(dC)。已有证据显示,反转录缓冲液如果存在Mn2+,能大大提高这一步的效率(S......阅读全文

人才东南飞:人可以走,“帽子”得留下

   又一次,在政协教育界别联组会上,来自西部的校长感慨起了人难留。  去年,发声的是兰州大学校长严纯华;今年,则是西北师范大学校长刘仲奎。  刘仲奎开门见山:西部地区高校的领军人才和骨干教师向东单向流动的态势一段时期内难以逆转。入选国家高层次人才计划(长江学者、杰出青年基金获得者、万人计划入选者等

继电保护实验仪校验装置A/D转换电路设计

  模拟信号是不能被微处理器直接测量识别出来的,只有通过A/D转换器将模拟信号转换为微处理器可识别的数字信号,才能通过微处理器处理并由液晶显示器显示出测量结果。  电力行业标准要求,校验装置分辨率应比被校装置的显示分辨率高一位。因此,在本校验装置中选用4 1/2位双斜率积分A/D转换器ICL7135

快速方法转换,助力制药QC实验室提升效率(三)

示例四Vanquish Core液相支持等度的UHPLC药典方法转换——极zhi提升效率(点击查看大图) 新Vanquish Core液相系统耐压700bar,采用了Acclaim系列超高效液相色谱柱,依药典原则转换后的多索茶碱UHPLC方法zui高压力不过500bar,Vanquish Core可

理化所“空间功热转换技术重点实验室”成立

  12月6日,中科院理化技术研究所空间功热转换技术重点实验室揭牌仪式举行。所长张丽萍、党委书记黄勇、各职能部门负责人、以及实验室全体职工、学生共40余人参加了揭牌仪式。   黄勇首先宣读了关于实验室成立和实验室主任任命的文件。随后,黄勇、张丽萍先后发表讲话。黄勇希望重点实验室成立后

快速方法转换,助力制药QC实验室提升效率(二)

示例一Vanquish Core和核壳型Accucore色谱柱联用,支持HPLC方法转换成UHPLC方法(点击查看大图) 色谱柱是作为液相分离的核心,是方法转换的关键。核壳型填料Accucore 系列色谱柱zui大的特点是低反压、高柱效,从上面的示例看,运行时间从75min变为23.7min,大大提

快速方法转换,助力制药QC实验室提升效率(一)

蓄能2020药典系列|快速方法转换,助力制药QC实验室提升效率经过多年的发展,超高效液相色谱UHPLC技术,因其能获更高的柱效和更快的分析速度,且在多数情况下可替代常规HPLC方法,目前已经得到一定范围内的普及。但是,由于缺乏公认方法转换规则,制药行业的质控QC,大多数还在使用HPLC 方法。202

用新-RACE-法扩増-cDNA-的-5末端

这一实验方案分为 6 个阶段。第 1 阶段:降解 RNA 的去磷酸化; 第 2 阶段:完整 RNA 去帽; 第 3 阶段:RNA 寡核苷酸的制备; 第 4 阶段:RNA 寡核苷酸与细胞 RNA 的连接; 第 5 阶段:反转录; 第 6 阶段:扩增。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康

用新-RACE-法扩増-cDNA-的-5末端

            试剂、试剂盒 缓冲液、溶液和试剂 酶和酶缓冲液 核酸和寡核苷酸 仪器、耗材 特殊设备

RACE技术在基因工程抗体中的应用

前言20世纪80年代后期,随着分子生物学的迅速发展,使得人们可以通过基因工程技术对天然的分子进行人为的改造,这为抗体药物带来了新的突破点和希望。了解和阐明抗体分子的结构及功能,为人类疾病诊断及治疗提供了新的推动力。基因工程抗体 为了解决传统的鼠源性单抗存在的弊端,对鼠源性单抗进行改进以及人源化单抗的

什么是能量转换

能量的存在有很多种形式:动能,内能,势能,等等当能量从一种形式变成另一种形式时,我们说能量发生了转换。譬如球从高处落下,球静止于高空时,具有重力势能,落下的过程中,重力势能减少,动能增加,我们说这是重力势能转化为动能。又如双手摩擦,会发热。我们手的机械能转化为内能。能量转换包括两种:转化和转移。如两

什么是能量转换

能量的存在有很多种形式:动能,内能,势能,等等当能量从一种形式变成另一种形式时,我们说能量发生了转换。譬如球从高处落下,球静止于高空时,具有重力势能,落下的过程中,重力势能减少,动能增加,我们说这是重力势能转化为动能。又如双手摩擦,会发热。我们手的机械能转化为内能。能量转换包括两种:转化和转移。如两

顺反异构互相转换

自然界的顺反异构体中通常是反式比较稳定,而顺式较不稳定。顺反异构体的构型转化是一个化学动态平衡过程。此过程一般可分为3种类型:光致异构化、热致异构化和催化异构化。基态时反式异构体总是比顺式稳定,所以后一类异构化过程的结果通常是反式异构体占多数,而光致异构化的结果往往相反 [1]  。如将顺式异构体加

中青报:评价科研人员要提防简单戴“帽子”

想要简单快速地判断一位科研人员的“段位”,一睹其“帽”便知:是头顶“长江”,还是手握“黄河”;是身怀“楚天”,还是脚踏“泰山”…… 这里的“帽子”即“头衔”。 近年来,国家有关部门和各省市纷纷推出各自的人才计划,各种“帽子”也纷至沓来。“帽子”为科研人员送去了一众“福利”,在吸引、培养

贵州摘掉“煤矿事故死亡人数全国第一”帽子

  贵州省人民政府4日发布消息,经过不懈努力,贵州省2012年煤矿事故起数和死亡人数大幅下降,一举摘掉了戴了12年之久的“煤矿事故死亡人数全国第一”的“帽子”。   贵州省安全生产监督管理局局长李尚宽说,2012年全省发生煤矿事故58起,死亡117人,同比分别下降60%和58.1%,

人民日报:别让“帽子”遮蔽科学的眼睛

  一些地方按照类似实行招商引资优惠政策的方式招徕人才,而这些人才究竟按照何种科学的评价体系予以界定,却越来越少有人关注  “过多的人才计划可能会耽误科研”“不要再人为创造不平等了,让学者们静下心来做学术吧”!日前,本报刊发的《人才“帽子”那么多究竟效果怎样》,在科技教育界引发热烈反响。  据粗略统

闻玉梅院士:为了摘掉“乙肝大国”的帽子

  闻玉梅,湖北浠水人,1934年出生于北京。医学微生物学专家,中国工程院院士。1956年毕业于上海第一医学院(今复旦大学上海医学院)。历任上医大微生物教研室讲师、副教授、教授。现为复旦大学医学分子病毒学重点实验室教授。曾任中国微生物学会理事长。主编《中国的病毒性肝炎:问题与控制策略》等。  纯白如

科研领域怪象不断:疯狂抢“帽子”-负债搞科研

  游击战帽子战审批战:科研人员还坐得住吗?  我国正快马加鞭建设创新型国家。2016年我国研发经费投入强度达到2.11%,超过欧盟15个初创国家的平均水平2.08%。然而,与经费投入力度持续加大形成鲜明对比的是,我国科研领域尚存一系列久治不愈的怪现象。  游击战:“打一枪换一个地方”  冷门前沿领

闻玉梅院士:为了摘掉“乙肝大国”的帽子

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/503980.shtm   ?学人小传闻玉梅,湖北浠水人,1934年出生于北京。医学微生物学专家,中国工程院院士。1956年毕业于上海第一医学院(今复旦大学上海医学院)。历任上医大微生物教研室讲师、

“项目多、帽子多、牌子多”-体制弊端如何破解

  周忠和有三个身份——全国政协委员、中国科学院院士、中科院古脊椎动物与古人类研究所所长。这三个身份让他成为科技体制改革最热忱的呼吁者和科技体制弊端最直接的体会者。  在这三个身份里,所长的身份让周忠和切身体会到科研人员心中最大的无奈。  作为所长,他不想让所里的科研人员疲于奔命地申请项目、申请“帽

项目多、帽子多、牌子多-体制弊端如何破解

“三多”现象大讨论系列报道之一编者按: 习近平总书记在两院院士大会上的重要讲话提及“项目多、帽子多、牌子多”的现象,反映了当下我国科技体制中存在的突出问题。“三多”现象是如何抑制创新活力释放的?如何破解科技体制改革中的这些痼疾?如何切实提高创新体系整体效能?围绕上述问题,本报即日起进行深入讨论。

欧洲大型强子对撞机实验数据首次被转换为声音

大型强子对撞机项目科学家首次将这台对撞机生成的海量数据转换为声音。这是他们认为的希格斯玻色子的数据所展现的模样。大型强子对撞机位于法国和瑞士边境地下100米深、27公里长的环形隧道内,正以每秒4000万次的速度处理数据。  北京时间1月5日消息,欧洲大型强子对撞机(LHC)项目科学家

用新-RACE-法扩増-cDNA-的-5末端(一)

试剂、试剂盒 缓冲液、溶液和试剂酶和酶缓冲液核酸和寡核苷酸仪器、耗材 特殊设备实验步骤 第 1 阶段:降解 RNA 的去磷酸化一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙酸钠,3mol/L,pH5.2乙醇二硫苏糖醇(DTT)(0.1mol/L)苯酚/氯仿(1:1,体积比)2. 酶和酶缓冲液磷酸酶缓冲液,10X

用新-RACE-法扩増-cDNA-的-5末端(二)

第 3 阶段:RNA 寡核苷酸的制备选择离 T7 或 T3RNA 聚合酶作用位点下游约 lOObp 处可以线性化的质粒 [见图 25-3(b)]。因为来自多克隆位点回文序列的引物用于 PCR 效果不好,因此比较理想的是用在多克隆位点克隆进某个插入片段的质粒。一个已经验证过的质粒是 pBS-S

PCR仪得不到全长的5’RACE-PCR产物

  *CIP反应后的RNA降解产生了新的带有5’磷酸的断裂模板,可以同GeneRacer RNA Oligo连接。一定要小心操作,保证RNA无降解。  *CIP脱磷酸不完全,可以增加反应中CIP的量或减少RNA的量。  *PCR产生了杂带,并不是真正的连接产物,可以使用上述建议优化PCR。

降压转换器和FlyBuck转换器设计技巧

每个隔离式输出只需一个绕组、一个整流器二极管和一个输出电容器。可使用这种拓扑以低成本的简单方式生成多个半稳压隔离式或非隔离式输出。降压转换器和 Fly-Buck 转换器中存在一些主要电流差别。我们对降压转换器中的开关电流环路已经很熟悉了,如图 1 所示。包含输入旁路电容器、VIN 引脚、高低

电源转换器概述

  电源转换器是学名,也就是插线板、也叫排插、插板、接线板,香港人叫拖线板等。拿起我们平时使用的插线板后面除了印有电源转换器的产品名称外,还有一些电气参数,例如最大电压,最大电流,频率等。大家在使用电源转换器的时候要按照这些参数来使用,使用不当的话,特别是使用劣质电源转换器的时候,会发生触电、火灾等

频率下转换的定义

中文名称频率下转换英文名称frequency down-conversion定  义两束不同频率的光束在非线性介质中混频而产生差频的过程。应用学科机械工程(一级学科),光学仪器(二级学科),激光器件和激光设备-激光技术(三级学科)

激素原的转换

4-雄烯二醇(4-androstenediol,4AD or 4diol) 转换为睾丸酮。19-去甲-4-雄烯二醇(19-nor-4-androstenediol,Nordiol)转换为去甲睾丸酮或叫诺龙。1-雄烯二醇(1 androstenediol,1AD)转换为1-TESTOSTERONE (

电源转换器简介

  电源转换器又称交流转换器,是变压器的一种.由于世界各国及地区的电力环境不同,民用电压也存在差异,各国电器的电压适用范围也不同.常见的有220V 电压和110V电压两种.随着世界科技日新月异的进步,民间交流越来越频繁,交流转换器便成为出国人士的必备用品,给人们的工作生活带来极大的便利,并节省了资金

频率下转换的定义

中文名称频率下转换英文名称frequency down-conversion定  义两束不同频率的光束在非线性介质中混频而产生差频的过程。应用学科机械工程(一级学科),光学仪器(二级学科),激光器件和激光设备-激光技术(三级学科)