免疫筛选实验

根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。实验材料cDNA试剂、试剂盒BHI氯霉素NaOHSSC氯仿异戊醇TESSDSmRNA甲硫氨酸乙醇乙酸钠免疫沉淀缓冲液仪器、耗材转子硝酸纤维滤膜离心管微量多孔洗涤仪实验步骤1. 往微量滴定板的每孔中加入250 μl 含适当抗生素的选择性BHI培养液,并分别接种独立的cDNA克隆,37℃温育过夜。2. 在250 ml 烧瓶中加入50 ml BHI/抗生素培养液,以10个克隆过夜培养液为一组, 从每个微孔中取100 μl 培养液,混合后接种到烧瓶中。3. 37℃培养至A590=0.7,然后加入氯霉素继续于37℃温育过夜;对每组10个过夜的克隆重复培养。4. 2 000 g 4℃离心10 min,制备质粒DNA。 5. 将制得的约50......阅读全文

离心浓缩仪是利用抽真空降低溶剂沸点

 离心浓缩仪是利用抽真空降低溶剂沸点,靠真空泵的抽真空和/或辅以冷阱及时收集所蒸发出来的蒸气来完成去除溶剂、干燥/浓缩样品的目的。  离心浓缩仪是一种常用的蒸发仪器,本机型适合于分子生物学、生物化学、遗传学、分析化学、质量控制等实验室的RNA/DNA,核苷、蛋白、药物、代谢物、酶或类似样品的浓缩合成

抗血清中去除交叉反应性抗体实验

            试剂、试剂盒 封闭缓冲液 封闭液 细胞悬浮缓冲液 抗体 LB 培养基 仪器、耗材

抗血清中去除交叉反应性抗体实验

试剂、试剂盒 封闭缓冲液封闭液细胞悬浮缓冲液抗体LB 培养基仪器、耗材 Sorval GSA 转子或相当转子适用于处理细菌的超声波破碎仪大肠杆菌 Y1090 hsdR实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存缓冲液和试剂的组分请见时录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl

熟悉真空离心浓缩仪的工作原理

 真空离心浓缩仪是分子生物学、生物化学、遗传学、分析化学、质量控制等领域中RNA/DNA、核苷、蛋白质、药物、代谢物、酶或类似物的常用蒸发仪器,用于样品浓缩成分的溶剂去除以及浓缩或者蛋白质的干燥。经离心浓缩处理后的样品可方便地用于化学、生化、生物分析、免疫筛选和仪器分析等各种定性和定量分析。  真空

解析真空离心浓缩仪和冻干机的区别

样品浓缩技术是样品前处理的比较常用技术手段之一,应用广泛,浓缩的方法也有很多,各有所长,常见的浓缩仪器也有很多,例如:旋转蒸发仪、氮吹仪、真空离心浓缩仪、冷冻干燥机/冻干机。接下来杰懋万得福小编就主要为大家介绍真空别离心浓缩仪和冻干机的区别。1、真空离心浓缩仪:原理:采用离心机、真空和加热相结合的方

来讲讲平行浓缩仪的浓缩“三要素”

 平行浓缩仪采用大屏幕显示屏,操作程序简单,整个仪器由合金铝制成,干燥室的内部经过防腐处理。免维护非接触式驱动器旋转系统,设计精美,操作简单,使用方便。它可以通过存储功能轻松读取,并且可以同时保存温度,转速,时间和其他条件。使用时,只需选择常用条件并按开始按钮即可开始操作。在使用过程中,也可以关闭加

抗血清中去除交叉反应性抗体实验

本方案介绍一种通过抗血清与细菌裂解液共同温育而从多克隆抗血清中去除与细菌编码蛋白质发生反应抗体的方法。本节介绍的吸收方法仅仅适用于制备含有低滴度抗大肠杆菌抗体的抗血清。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒封闭缓冲液封闭液细胞悬浮缓冲

干货!平行浓缩仪的基本知识点

平行浓缩仪是在温和的条件下,其基本原理是通过同时加热/减压/漩涡振荡将多样品快速蒸干或定量浓缩的小型仪器,有效的避免高温对某些目标物的破坏,全程无需操作人员看管,自动化程度高  平行浓缩仪用于在离心状态下连续抽取样品,甚至接近真空,从而可以快速蒸发样品中的溶剂,可以快速浓缩或干燥样品系统,平行浓缩仪

平行浓缩仪的离心浓缩要点说明

 平行浓缩仪综合利用离心力、加热和外接真空泵提供的真空作用来进行溶剂蒸发,可同时处理多个样品而不会导致交叉污染。浓缩仪应用于DNA/RNA、核苷、蛋白、药物、代谢物、酶或类似样品的浓缩合成物的溶剂去除,具有浓缩效率高,样品活性留存高的特点。一个完整的浓缩系统由:浓缩仪、浓缩仪转子、冷阱、真空泵、冷凝

实验室实验器材使用实验

1、了解化学试剂的等级和保管原则2、掌握玻璃器械的规范使用3、明确各玻璃器械的功用试剂、试剂盒纯水仪器、耗材量筒容量瓶吸管移液管吸球天平温度什移液瓶实验步骤一、实验材料:不同等级的化学试剂 量材 量筒 容量瓶 吸管(移液管 无分度两标线管 有分度吸管 微量吸管)吸球二、实验步骤:1. 根据试剂瓶上的

实验室实验器材使用实验

试剂、试剂盒 纯水仪器、耗材 量筒 容量瓶 吸管移液管 吸球天平温度什 移液瓶实验步骤 一、实验材料:不同等级的化学试剂 量材 量筒 容量瓶 吸管(移液管 无分度两标线管 有分度吸管 微量吸管)吸球二、实验步骤:1. 根据试剂瓶上的标志说明该试剂的等级及保管方法2,玻璃量器的使用:按照玻璃量器上的标

实验动物实验标本的采集实验

(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:适用于少量采血,如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后,将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。②眼眶后静脉丛采血:一手拇指及食指抓住鼠两耳之

实验动物实验标本的采集实验——实验动物脑脊液采集

实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤(1) 狗、兔脑脊液的采集:通常采取脊髓穿刺法,穿刺部位在两髂连线中点稍下方第七腰椎间隙。动物麻醉后侧卧位固定,头尾部尽量弯向腰部,去被毛。消毒后一手固定穿刺部位的皮肤,腰穿针垂直刺入,当有落空感及动物的后肢跳动时,针已达椎管内,抽去针芯,即

实验动物实验标本的采集实验——实验动物尿液采集

实验材料实验动物试剂、试剂盒水仪器、耗材收集器实验步骤尿液的采集 常用的采集方法较多,一般在实验前需给动物灌服一定量的水。(1) 代谢笼法:此法较常用,适用于大、小鼠。将动物放在特制的笼内。一般需收集 5 小时以上的尿液,最后取平均值。(2) 导尿法:常用于雄性兔、狗。动物轻度麻醉后,固定于手术台上

实验动物实验标本的采集实验——实验动物腹水的采集

实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤抽取大鼠、小鼠的腹水时,抓取固定动物,使动物腹部朝上,消毒皮肤,针头在腹股沟和腹中线之间刺人腹腔,腹压高时腹水自然流出,腹水少时可用注射器抽取。

关于新药研发中-宿主细胞蛋白-那些事

宿主细胞是生产诸如重组蛋白、抗体和疫苗类药物的上游材料,不同用途的药物会采用不同的宿主细胞,重组蛋白类药物常用的细胞有中国仓鼠卵巢细胞(CHO),新型疫苗常采用非洲绿猴肾细胞(Vero)、犬肾细胞 (MDCK)、昆虫细胞、人二倍体细胞,传统疫苗还会采用大肠杆菌、鸡胚等作为宿主细胞。宿主细胞蛋白如果残

亲和层析法去除交叉反应性抗体实验

本节介绍一种利用结合细菌蛋白质的基质去除粗制免疫球蛋白中与细菌编码蛋白质发生反应成分的方法(de Wet et al.1984)。该方法也适用于利用培养的细胞或组织抽提物去除交叉反应抗体。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒缓冲液和

杂交实验的实验目的

了解用聚乙二醇PEG方法诱异同种植物原生质体融合的技术,并能根据新本原生质体的形态樗来鉴别杂种细胞。

实验动物标记实验

实验材料 兔子 小鼠试剂、试剂盒 3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤 1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)

细胞划痕实验实验步骤

一.准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)二.流程:1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过一夜能铺

实验动物标记实验

实验材料兔子 小鼠试剂、试剂盒3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)。标记的原则是

杂交实验的实验原理

不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合,所产生的杂种细胞,即异核体经过培养可再生新壁,分裂形成愈伤组织,进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞,故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组,因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究

实验动物实验标本的采集实验——动物采血方法

实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:适用于少量采血,如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后,将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。

杂交实验的实验材料仪器

1.实验材料:烟草或其它植物无菌苗的叶片。胡萝卜肉质根诱导的松软愈伤组织或悬浮培养细胞。2.试剂2.1酶液及洗涤液,同植物原生质体的分离和培养实验。2.2PEG溶液2.3高pH高钙稀释液2.4DPD培养基同植物原生质体的分离和培养实验。

杂交实验的实验结果分析

1.在倒置显微镜下观察异源融合。在培养3天以内,可根据双新原生质体的形态特征来鉴别异核体。因为来自叶肉组织的原生质体具有明显绿色叶绿粒,而来自培养细胞的原生质体无色,但具浓密原生质丝,并可看到显示的核区。2.统计异源融合的频率

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基             实验材料

杂交实验的实验方法

所有操作均在超净工作台上进行。1.原生质体的分离和收集。2.将收集的两种不同材料的原生质体分别悬浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生质体密度调整为2×105/ml左右(用血细胞计数板统计原生质体密度)。3.将两种原生质体悬液等量混合。4.用刻度吸管将混合的原生质体悬

克尔效应实验的实验原理

各向同性的介质如玻璃,石蜡,水,硝基苯等,在强电场作用下会表现出各向异性的光学性质,表现出双折射现象。折射率差与电场强度的平方成正比,称为克尔效应。在两平行平板之间加上高电压,在电场作用下,由于分子的规律排列,这些介质就表现出象单轴晶体那样的光学性质,光轴的方向就与电场的方向对应。当线偏振光沿着与电

PCR实验如实预防实验污染

进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,zui大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。1.划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行:(1)标本

克尔效应实验的实验原理

各向同性的介质如玻璃,石蜡,水,硝基苯等,在强电场作用下会表现出各向异性的光学性质,表现出双折射现象。折射率差与电场强度的平方成正比,称为克尔效应。在两平行平板之间加上高电压,在电场作用下,由于分子的规律排列,这些介质就表现出象单轴晶体那样的光学性质,光轴的方向就与电场的方向对应。当线偏振光沿着与电