免疫筛选实验
根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。实验材料cDNA试剂、试剂盒BHI氯霉素NaOHSSC氯仿异戊醇TESSDSmRNA甲硫氨酸乙醇乙酸钠免疫沉淀缓冲液仪器、耗材转子硝酸纤维滤膜离心管微量多孔洗涤仪实验步骤1. 往微量滴定板的每孔中加入250 μl 含适当抗生素的选择性BHI培养液,并分别接种独立的cDNA克隆,37℃温育过夜。2. 在250 ml 烧瓶中加入50 ml BHI/抗生素培养液,以10个克隆过夜培养液为一组, 从每个微孔中取100 μl 培养液,混合后接种到烧瓶中。3. 37℃培养至A590=0.7,然后加入氯霉素继续于37℃温育过夜;对每组10个过夜的克隆重复培养。4. 2 000 g 4℃离心10 min,制备质粒DNA。 5. 将制得的约50......阅读全文
免疫筛选实验
根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。实验方法基本方案 实验材料 cDNA 试剂、试剂盒 BHI 氯霉素 NaOH SSC 氯仿 异戊醇 TES SDS mRNA 甲硫氨酸 乙醇 乙酸钠 免疫沉淀缓冲液 仪器、
免疫筛选实验
根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。实验材料cDNA试剂、试剂盒BHI氯霉素NaOHSSC氯仿异戊醇TESSDSmRNA甲硫氨酸乙醇乙酸钠免疫沉淀缓冲液仪器、耗材转子硝酸纤维滤膜离心管微量多孔洗涤仪实验步骤1.
免疫筛选实验
基本方案 实验材料 cDNA 试剂、试剂盒
免疫筛选实验
实验材料 cDNA试剂、试剂盒 BHI氯霉素NaOHSSC氯仿异戊醇TESSDSmRNA甲硫氨酸乙醇乙酸钠免疫沉淀缓冲液仪器、耗材 转子硝酸纤维滤膜离心管微量多孔洗涤仪实验步骤 1. 往微量滴定板的每孔中加入250 μl 含适当抗生素的选择性BHI培养液,并分别接种独立的cDNA克隆,37℃温育过
融合蛋白的免疫筛选实验
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 LB顶层琼脂糖叠氮钠第一抗体仪器、耗材 硝酸纤维素滤膜实验步骤 1. 在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度,宿主菌为大肠杆菌LE392菌株,每个平板使用7 ml 1%LB顶层琼脂。2. 选择适当的滴度铺平板,于37℃温育8 h。 3.
融合蛋白的免疫筛选实验
基本方案 IPTG法 实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒
融合蛋白的免疫筛选实验——IPTG法
实验方法原理用抗体筛选λgt11 cDNA文库时,可待噬斑长到一定裎度方可诱导表达融合蛋白,筛选到阳性克隆的成功概率就可能大大增加。噬菌体生长3~4 h 后,将含诱导剂IPTG的滤膜放入噬斑平板,即可诱导β-半乳糖苷酶-cDNA融合蛋白的表达,继续在37℃培养,然后按基本方案用抗体对影印滤膜进行筛选
融合蛋白的免疫筛选实验——基本方案
实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LB顶层琼脂糖叠氮钠第一抗体仪器、耗材硝酸纤维素滤膜实验步骤1. 在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度,宿主菌为大肠杆菌LE392菌株,每个平板使用7 ml 1%LB顶层琼脂。2. 选择适当的滴度铺平板,于37℃温育8 h。 3. 将直径1
免疫筛选的的技术方法
中文名称免疫筛选英文名称immunoscreening定 义根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
真空冷却离心浓缩仪全套系统
真空冷却离心浓缩仪全套系统是一种用于生物学、基础医学、中医学与中药学领域的科学仪器,于2017年12月29日启用。 技术指标 1.5/2.0ml离心管。 主要功能 、质量控制等实验室的RNA/DNA,核苷、蛋白、药物、代谢物、酶或类似样品的浓缩合成物的溶剂去除,以及蛋白的浓缩或干燥.离心
筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验(一)
试剂、试剂盒 封闭缓冲液氯仿IPTG抗原-抗体复合物检测试剂SMTNT 缓冲液洗涤缓冲液放射性碘标记第二抗体第一抗体LB 琼脂板LB 顶层琼脂板硝酸纤维素滤膜λ噬菌体表达文库E.coli仪器、耗材 预设 42°C 的空气培养箱培养管平头镊子装有防水黑墨水(印度墨水)并带有 18 号针头的注射器实验步
样品浓缩仪的相关介绍及优点
样品浓缩仪是一种常用的蒸发仪器,本机型适合于分子生物学、生物化学、遗传学、分析化学、质量控制等实验室的RNA/DNA,核苷、蛋白、药物、代谢物、酶或类似样品的浓缩合成物的溶剂去除,以及蛋白的浓缩或干燥.离心浓缩处理过后的样品可方便地用于各种定性和定量分析上 化学、生物化学、生物分析、免疫筛选及仪
真空离心浓缩仪原理和特性
ZLNS-2真空离心浓缩仪原理 ZLNS-2真空离心浓缩仪是将样品在离心的状态下同时用真空泵不断抽气,乃至接近真空,从而使样品中的溶剂快速蒸发、样品体系得到快速浓缩或干燥,并能采用冷阱与过滤的办法有效收集被蒸发的溶剂。本机型适合于分子生物学、生物化学、遗传学、分析化学、质量控制等实验室的RNA
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液 封闭试剂 抗体 LB 顶层琼脂糖 LB 平板琼脂培养基 仪器、耗材
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒封闭缓冲液封闭试剂抗体LB 顶层琼脂糖LB 平板琼脂培养基仪器、耗材硝酸纤维素滤膜λ噬菌体载体cDNA 文库实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的组分请见附录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)150 mmol/L NaCl
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液封闭试剂抗体LB 顶层琼脂糖LB 平板琼脂培养基仪器、耗材 硝酸纤维素滤膜λ噬菌体载体cDNA 文库实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的组分请见附录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)150 mmol/L N
真空离心浓缩仪的结构功能及用途
真空离心浓缩仪是替代传统氮吹仪进行样本分离、浓缩的具有高效、环保的一种科学实验仪器,传统氮吹仪的工作原理是采用底部加温,顶部用氮气进行吹扫,使试管内被加热的有即溶剂迅速挥发而达到让样品快速浓缩的目的,同时有毒的溶剂不经收集就挥发在空气中。真空离心浓缩仪式一种在真空状态下离心样品,从而将溶剂蒸发以浓
平行真空浓缩仪的工作原理来了解下
平行真空浓缩仪为实验室的前处理过程带来了质变,不仅浓缩效率大大提升,且节省了人力和实验室珍贵的通风橱空间。是在温和的条件下,平行真空浓缩仪的基本原理是通过同时加热/减压/漩涡振荡将多样品快速蒸干或定量浓缩的小型仪器,有效的避免高温对某些目标物的破坏,全程无需操作人员看管,自动化程度高。用于在离心状
低温离心浓缩仪是怎么处理样品的?
离心浓缩是一种用于将溶剂蒸发出去的浓缩或干燥样品的独特过程,离心浓缩处理过后的样品可方便地用于各种定性和定量分析上 化学、生物化学、生物分析、免疫筛选及仪器分析, CSC系列产品技术融合了离心、抽真空及加热三种因素,以有效地蒸发多种溶剂来满足实验室需求。低温离心浓缩仪利用离心力原理做样品溶质的沉降
离心浓缩原理
离心浓缩是一种用于将溶剂蒸发出去的浓缩或干燥样品的独特过程,离心浓缩处理过后的样品可方便地用于各种定性和定量分析上 化学、生物化学、生物分析、免疫筛选及仪器分析离心浓缩是在负压条件下利用旋转产生的离心力使样品中的溶剂与溶质分离的浓缩方法。离心力可以抑制迸沸发生,使样品干固于试管底部,便于回收。离心浓
上海巴斯德所合作研究取得丙型肝炎病毒研究新进展
丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白(ARFP)是近年来报道的HCV核心抗原(core)基因的核糖体读码框移蛋白,其功能尚未充分阐明。上海巴斯德研究所肿瘤病毒研究组邓强副研究员等与上海瑞金医院张欣欣教授合作,应用合成F蛋白15肽对MHC-II人源化转基因小鼠(HLA-DR1以及HLA- DP4)进行
真空离心浓缩仪的原理和优缺点介绍
真空离心浓缩仪是一种常用的蒸发仪器,本机型适合于分子生物学、生物化学、遗传学、分析化学、质量控制等实验室的RNA/DNA,核苷、蛋白、药物、代谢物、酶或类似样品的浓缩合成物的溶剂去除,以及蛋白的浓缩或干燥.离心浓缩处理过后的样品可方便地用于各种定性和定量分析上 化学、生物化学、生物分析、免疫筛选及仪
筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验
在典型的免疫筛选实验中,λ噬菌体表达载体构建的文库应铺在不含异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG) 的大肠杆菌菌株的平板上。诱导物的缺少保证了噬菌斑顺利形成前不产生对宿主有毒性的融合蛋白,2~4 h 后,将平板从 42°C 移到 37°C 以稳定温度敏感型的所有融合蛋白。本实验来源于分子克隆实验指
筛选质粒载体构建表达文库实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液 氯仿 裂解缓冲液 检测抗原-抗体复合物所用试剂 SM TNT 缓冲液 洗涤缓冲液
筛选质粒载体构建表达文库实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液氯仿裂解缓冲液检测抗原-抗体复合物所用试剂SMTNT 缓冲液洗涤缓冲液 125I 标记的蛋白质 A 或 125I 标记的免疫球蛋白放射性碘化第二抗体第一抗体LB 或 SOB 琼脂平板仪器、耗材 空气培养箱平头镊子 装有防水黑墨水(印度墨水)并带有 18 号针头的注射器硝酸纤维
筛选质粒载体构建表达文库实验
检测结合抗体的方法有以下 3 种:放射化学筛选,生色反应筛选及化学发光反应筛选。3 种方法的优缺点在本章导言中有所论述。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒封闭缓冲液氯仿裂解缓冲液检测抗原-抗体复合物所用试剂SMTNT 缓冲液洗涤缓
冷冻离心浓缩仪的相关知识介绍
离心浓缩是一种用于将溶剂蒸发出去,以浓缩或干燥生物或非生物样品的独特过程。离心浓缩处理过后的样品可方便地用于各种定性和定量分析上生物化学、生物分析、免疫筛选及仪器分析;冷冻离心浓缩仪是将溶剂蒸发以浓缩或干燥样品的仪器,并通过超低温的冷阱捕捉溶剂。 冷冻离心浓缩仪是在-5℃~100℃范围内可以进
真空离心浓缩仪的工作你知道么
真空离心浓缩仪是一种常用的蒸发仪器,本机型适合于分子生物学、生物化学、遗传学、分析化学、质量控制等实验室的RNA/DNA,核苷、蛋白、药物、代谢物、酶或类似样品的浓缩合成物的溶剂去除,以及蛋白的浓缩或干燥.离心浓缩处理过后的样品可方便地用于各种定性和定量分析上 化学、生物化学、生物分析、免疫筛选及
筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液 氯仿 IPTG 抗原-抗体复合物检测试剂 SM TNT 缓冲液 洗涤缓冲液 放射
真空离心浓缩仪用途及构造
真空离心浓缩仪是一种常用的浓缩仪产品,主要用于各种样品的浓缩合成物的溶剂去除,具有操作简便、使用灵活、可靠性高等优点。 真空离心浓缩仪是一种常用的蒸发仪器,适合于分子生物学、生物化学、遗传学、分析化学、质量控制等实验室的RNA/DNA,核苷、蛋白、药物、代谢物、酶或类似样品的浓缩合成物的溶剂去除